| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写及中文对照 | 第8-12页 |
| 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 大熊猫消化道分解纤维素的微生物概况 | 第12-13页 |
| 2 纤维素分解酶分解纤维素的机制 | 第13-16页 |
| 2.1 纤维素酶的组成 | 第13-14页 |
| 2.2 纤维素酶降解纤维素的假说 | 第14-16页 |
| 3 β-葡萄糖苷酶的分类 | 第16页 |
| 4 β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第16-18页 |
| 5 新的β-葡萄糖苷酶的发现 | 第18-19页 |
| 6 β-葡萄糖苷酶的基因 | 第19-20页 |
| 7 β-葡萄糖苷酶基因克隆与表达进展 | 第20-22页 |
| 7.1 微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第20页 |
| 7.2 植物β-葡萄糖苷酶的基因的克隆 | 第20-21页 |
| 7.3 β-葡萄糖苷酶基因的表达 | 第21-22页 |
| 8 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第22-24页 |
| 8.1 作为食品风味酶应用 | 第22-23页 |
| 8.2 β-葡萄糖苷酶在纤维素降解中的应用 | 第23页 |
| 8.3 其它应用 | 第23-24页 |
| 实验部分 | 第24-52页 |
| 1 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1.1 材料 | 第24-25页 |
| 1.1.1 样品来源 | 第24页 |
| 1.1.2 主要试剂及药品 | 第24页 |
| 1.1.3 培养基及缓冲液 | 第24-25页 |
| 1.2 方法 | 第25-33页 |
| 1.2.1 菌株分离和纯化 | 第25页 |
| 1.2.2 菌株的复筛 | 第25-26页 |
| 1.2.3 菌种的保存 | 第26页 |
| 1.2.4 菌株的生理生化鉴定 | 第26页 |
| 1.2.5 菌株的16S rDNA分析 | 第26-27页 |
| 1.2.6 β-葡萄糖苷酶产酶条件的研究 | 第27-29页 |
| 1.2.7 β-葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第29-30页 |
| 1.2.8 bglH基因扩增片段的纯化与回收 | 第30-31页 |
| 1.2.9 目的片段与T载体连接 | 第31页 |
| 1.2.10 转化入E.coli DH5a感受态细胞 | 第31页 |
| 1.2.11 bglH基因在大肠杆菌BL21的表达 | 第31-32页 |
| 1.2.12 目的蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| 1.2.13 表达产物的SDS-PAGE | 第32-33页 |
| 1.2.14 酶反应条件的研究 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-48页 |
| 2.1 菌株的分离和筛选 | 第33-35页 |
| 2.2 菌株的生理生化特性 | 第35-36页 |
| 2.2.1 菌株的形态特征 | 第35页 |
| 2.2.2 生理生化检测 | 第35-36页 |
| 2.3 菌株的16SrDNA的PCR扩增及系统发育分析 | 第36-37页 |
| 2.4 3株纤维素酶高产菌的产酶条件优化 | 第37-42页 |
| 2.4.1 菌株的筛选 | 第37页 |
| 2.4.2 接种量对纤维素酶生成的影响 | 第37-38页 |
| 2.4.3 培养时间对纤维素酶生成的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.4 培养温度对纤维素酶生成的影响 | 第39页 |
| 2.4.5 初始培养基pH对纤维素酶生成的影响 | 第39-40页 |
| 2.4.6 碳源对纤维素酶生成的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.7 氮源对纤维素酶生成的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.8 产酶条件优化结果 | 第42页 |
| 2.5 bglH基因的克隆 | 第42-43页 |
| 2.6 bglH基因的序列测定 | 第43页 |
| 2.7 重组菌株BL21/pET-bglH的筛选及鉴定 | 第43-44页 |
| 2.8 SDS-PAGE | 第44-45页 |
| 2.9 表达产物酶反应条件的研究 | 第45-48页 |
| 2.9.1 β-葡萄糖苷酶反应的最适温度的确定 | 第45-46页 |
| 2.9.2 β-葡萄糖苷酶反应的最适pH的确定 | 第46-47页 |
| 2.9.3 β-葡萄糖苷酶的热稳定性 | 第47-48页 |
| 2.9.4 β-葡萄糖苷酶的pH稳定性 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 3.1 纤维素酶分解菌筛选方法的确定 | 第48-49页 |
| 3.2 β-葡萄糖苷酶基因的提供菌选择 | 第49-50页 |
| 3.3 β-葡萄糖苷酶基因 | 第50页 |
| 3.4 表达产物的性质研究 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |
