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拟南芥膜联蛋白基因ANN8负调控RPW8.1介导的细胞死亡和抗病性

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
符号说明第11-13页
第一章 文献综述第13-20页
    1.1 植物的抗病性第13-15页
        1.1.1 植物对病原菌入侵的两种防御机制:PTI和ETI第13-14页
        1.1.2 植物对病原真菌的侵入前抗性和侵入后抗性第14-15页
    1.2 植物对病原菌的防御反应第15-16页
        1.2.1 植物的细胞壁、胼胝质与抗性第15页
        1.2.2 植物的HR反应、ROS积累、几丁质与抗性第15-16页
        1.2.3 水杨酸信号与抗病性第16页
    1.3 拟南芥中的R基因第16-18页
        1.3.1 拟南芥抗病基因研究概况第16-17页
        1.3.2 RPW8的结构和抗性特点第17页
        1.3.3 RPW8的最新研究进展第17-18页
    1.4 膜联蛋白及其作用第18-19页
    1.5 论文选题依据及研究意义第19-20页
第二章 材料与方法第20-33页
    2.1 实验材料第20-23页
        2.1.1 质粒载体第20页
        2.1.2 突变体及相关亲本材料第20页
        2.1.3 工程菌和病原菌第20页
        2.1.4 抗生素第20-21页
        2.1.5 酶和试剂第21-22页
        2.1.6 培养基第22页
        2.1.7 主要的实验器材第22-23页
        2.1.8 试剂盒第23页
    2.2 实验方法第23-33页
        2.2.1 突变体的筛选、分离群体的构建与基因作图克隆第23页
        2.2.2 载体的构建第23-26页
        2.2.3 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备第26页
        2.2.4 大肠杆菌和农杆菌的电击转化第26-27页
        2.2.5 拟南芥的培养与遗传转化第27页
        2.2.6 总RNA的提取第27-28页
        2.2.7 Real-time PCR分析第28-29页
        2.2.8 基因组DNA的提取第29-30页
        2.2.9 活性氧爆发测定第30页
        2.2.10 Trypan Blue染色步骤第30-31页
        2.2.11 H_2O_2的DAB染色第31页
        2.2.12 白粉菌侵染后的胼胝质染色第31页
        2.2.13 细菌生长实验第31-33页
第三章 结果与分析第33-52页
    3.1 突变相关基因的图位克隆与互补实验第33-39页
        3.1.1 b7-6群体中的突变基因定位为AT5G12380第33-35页
        3.1.2 互补实验证明ANNEXIN8~(280A→G)引起b7-6细胞死亡增强第35-36页
        3.1.3 ANN8的RNAi分析第36-38页
        3.1.4 ann8-1单突变体的获得第38-39页
    3.2 ann8-1,ann8-1/R1Y4的抗病性及抗性反应研究第39-46页
        3.2.1 ann8-1增强了RPW8.1介导的抗病性第39-42页
        3.2.2 ann8-1增强了RPW8.1介导的抗性反应第42-46页
    3.3 ann8-1增强RPW8.1的抗病性及抗性反应的分子机理第46-52页
        3.3.1 ann8-1增强了RPW8.1的转录水平第46-47页
        3.3.2 ann8-1增强了R1Y4中PR1和FRK1基因受白粉菌诱导表达的程度第47页
        3.3.3 ANN8在Annexin蛋白家族中特异的表达模式第47-52页
第四章 讨论与结论第52-54页
    4.1 ANN8负调控RPW8.1的抗病性和抗病反应第52-53页
    4.2 展望第53-54页
参考文献第54-61页
附录第61-67页
    附表1. 用于基因定位的分子标记第61-64页
    附表2. 引物第64-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68页

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