| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| ·研究目的与意义 | 第11-12页 |
| ·TILLING 技术原理及特点 | 第12-14页 |
| ·TILLING 技术基本原理 | 第12-13页 |
| ·TILLING 技术特点 | 第13-14页 |
| ·国内外TILLING 技术的应用现状 | 第14-16页 |
| ·在小麦中的应用 | 第14页 |
| ·在水稻中的应用 | 第14-15页 |
| ·在玉米中的应用 | 第15页 |
| ·在大豆中的应用 | 第15页 |
| ·在自然资源分析中EcoTILLING 的应用 | 第15-16页 |
| ·TILLING 技术改进研究 | 第16-18页 |
| ·TILLING 分析群体的构建 | 第16页 |
| ·DNA 建池策略 | 第16-17页 |
| ·突变位点鉴定 | 第17-18页 |
| ·TILLING 技术发展趋势与前景 | 第18页 |
| ·研究内容与目标 | 第18-20页 |
| 第二章 基于CELⅠ酶切的小麦TILLING 体系建立与优化 | 第20-30页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-24页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·DNA 浓度测定及DNA 池的构建 | 第21页 |
| ·目的基因片段PCR 扩增 | 第21-22页 |
| ·酶切反应 | 第22-23页 |
| ·样品纯化及浓缩 | 第23页 |
| ·凝胶制备及电泳 | 第23-24页 |
| ·图像分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-29页 |
| ·基因组DNA 提取方法的改进 | 第24-25页 |
| ·DNA 浓度 | 第25页 |
| ·PCR 扩增体系的优化 | 第25-27页 |
| ·酶切反应体系及产物纯化的改进 | 第27-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 第三章 小麦品质与抗逆性状目标基因的TILLING 分析 | 第30-36页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·种子材料 | 第30页 |
| ·目标基因 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| ·引物设计及引物序列 | 第30页 |
| ·引物合成 | 第30-31页 |
| ·特异性引物筛选 | 第31页 |
| ·目的基因突变位点检测 | 第31页 |
| ·图像分析 | 第31页 |
| ·DNA 序列分析 | 第31页 |
| ·点突变频率 | 第31页 |
| ·种子硬度测定 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-35页 |
| ·小麦硬质基因Pinb | 第32-34页 |
| ·小麦抗逆转录因子DREB1 | 第34页 |
| ·小麦慢锈基因Lr34 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第四章 基于PCR 扩增的小麦LR34 基因大片段缺失检测 | 第36-39页 |
| ·试验材料与方法 | 第36-37页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·Lr34 基因大片段缺失检测 | 第36页 |
| ·大片段缺失验证 | 第36-37页 |
| ·大片段缺失突变频率 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第39-43页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| ·TILLING 检测平台的建立与优化 | 第39-41页 |
| ·空间诱变点突变频率与突变类型 | 第41页 |
| ·空间诱变大片段缺失突变频率 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |