| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| ·果聚糖类型及广泛分布 | 第14-15页 |
| ·果聚糖代谢相关途径 | 第15-18页 |
| ·果聚糖的合成 | 第15-17页 |
| ·果聚糖的降解 | 第17-18页 |
| ·果聚糖与植物抗逆性的关系 | 第18页 |
| ·果聚糖合成酶转基因研究现状 | 第18-19页 |
| ·小麦组织培养再生体系改进 | 第19-21页 |
| ·生长素成分的优化 | 第19-20页 |
| ·无机盐成分的优化 | 第20-21页 |
| ·植物多基因转化研究进展 | 第21-26页 |
| ·农杆菌介导烟草多基因转化 | 第21-22页 |
| ·水稻多基因转化 | 第22-24页 |
| ·玉米多基因转化 | 第24页 |
| ·其它植物多基因转化 | 第24-26页 |
| ·本研究目的和意义 | 第26页 |
| ·技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 小麦果聚糖合成酶基因表达载体构建 | 第28-40页 |
| ·试验材料 | 第28-30页 |
| ·小麦材料 | 第28页 |
| ·菌系及载体 | 第28-29页 |
| ·酶和试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·测序 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·RNA 提取 | 第30页 |
| ·RNA 纯化 | 第30页 |
| ·RNA 反转录 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增 | 第31页 |
| ·目的片段回收 | 第31-32页 |
| ·测序载体与目的片段连接和转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆测序鉴定 | 第32页 |
| ·质粒DNA 提取 | 第32-33页 |
| ·目的片段及表达载体酶切回收 | 第33页 |
| ·目的片段纯化 | 第33-34页 |
| ·植物表达载体连接和转化 | 第34页 |
| ·表达载体阳性克隆鉴定及测序 | 第34页 |
| ·三亲杂交 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·小麦Ta1-SST 和Ta1-FFT 基因的扩增 | 第35页 |
| ·重组克隆载体菌液检测 | 第35-36页 |
| ·测序载体pMD18-Ta1-SST 和pMD18-Ta1-FFT 酶切验证 | 第36-37页 |
| ·重组表达载体pBI121-Ta1-SST 和pZP211-Ta1-FFT 构建 | 第37页 |
| ·重组表达载体pBI121-Ta1-SST 和pZP211-Ta1-FFT 酶切验证 | 第37-38页 |
| ·重组表达载体pBI121-Ta1-SST 和pZP211-Ta1-FFT 转化农杆菌 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 小麦果聚糖合成酶基因在烟草中的功能鉴定 | 第40-58页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·植物表达载体 | 第40页 |
| ·化学试剂及耗材 | 第40页 |
| ·仪器设备 | 第40-41页 |
| ·引物合成 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-47页 |
| ·烟草农杆菌转化 | 第41页 |
| ·SDS 法小量提取DNA | 第41-42页 |
| ·转基因烟草植株检测 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草抗逆性鉴定 | 第43页 |
| ·转基因烟草生理指标测定 | 第43-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·多基因共转化烟草植株的获得 | 第47页 |
| ·转基因烟草植株的分子检测 | 第47-49页 |
| ·转基因烟草植株抗逆性鉴定 | 第49-53页 |
| ·转基因烟草植株生理指标分析 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 小麦再生体系的优化 | 第58-69页 |
| ·试验材料 | 第58-59页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·试剂和耗材 | 第58页 |
| ·仪器设备 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·培养基浓度设置 | 第59页 |
| ·培养方法 | 第59页 |
| ·统计及分析方法 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-66页 |
| ·不同生长素对小麦幼胚再生率的影响 | 第60-63页 |
| ·CuSO_4 对小麦成熟胚组织培养的影响 | 第63页 |
| ·Fe 盐浓度对小麦胚培养再生效果的影响 | 第63-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 第五章 小麦果聚糖合成酶基因沉默诱导和过表达 | 第69-83页 |
| ·试验材料 | 第69-70页 |
| ·植物材料 | 第69页 |
| ·植物表达载体 | 第69-70页 |
| ·化学试剂及耗材 | 第70页 |
| ·仪器设备 | 第70页 |
| ·引物合成 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-77页 |
| ·农杆菌介导的小麦幼胚及成熟胚遗传转化 | 第70-73页 |
| ·基因枪介导的小麦幼胚遗传转化 | 第73-75页 |
| ·SDS 法提取小麦gDNA | 第75页 |
| ·抗性再生植株PCR 检测 | 第75-76页 |
| ·R NA 提取、纯化、反转录 | 第76页 |
| ·荧光定量PCR 检测 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-81页 |
| ·农杆菌介导法转化pANDA-Ta1-FFT-RNAi | 第77-78页 |
| ·基因枪介导法转化pRTL2-Ta1-SST、pRTL2-Ta1-FFT | 第78-80页 |
| ·转基因植株荧光定量PCR 检测 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 结论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简介 | 第97页 |
