摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略表 | 第10-12页 |
第一章 绪论 | 第12-21页 |
·禽流感的概述 | 第12页 |
·高致病性禽流感的爆发及其公共卫生意义 | 第12-14页 |
·高致病性禽流感的分子生物学特性 | 第14-15页 |
·禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的生物学特性 | 第15-17页 |
·血凝素 (Hemagglutinin HA) | 第17-18页 |
·HA 结构和功能 | 第17页 |
·HA 裂解与流感病毒的致病性的关系 | 第17-18页 |
·高致病性禽流感诊断及防制 | 第18-20页 |
·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 针对流感病毒血凝素 HA 蛋白单抗的制备及鉴定 | 第21-33页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·病毒株、细胞及实验动物 | 第21页 |
·实验主要试剂 | 第21页 |
·实验仪器及设备 | 第21-22页 |
·实验主要溶液与其配制 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-26页 |
·动物免疫 | 第22-23页 |
·饲养细胞的制备 | 第23页 |
·小鼠的骨髓瘤细胞的准备 | 第23页 |
·细胞融合 | 第23-24页 |
·筛选阳性杂交瘤细胞 | 第24页 |
·腹水制备及纯化 | 第24-25页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-31页 |
·细胞融合率及阳性率 | 第26-27页 |
·杂交瘤细胞的染色体数 | 第27页 |
·抗体亚类鉴定 | 第27页 |
·杂交瘤细胞稳定性检测 | 第27-28页 |
·腹水效价的检测 | 第28页 |
·广谱性检测 | 第28-29页 |
·特异性检测结果 | 第29-30页 |
·间接免疫荧光实验结果 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
·免疫原的选择及小鼠免疫效果 | 第31页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第31页 |
·单克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
·单克隆抗体的应用价值 | 第32-33页 |
第三章 血凝素 HA 基因的体外高效表达和纯化 | 第33-51页 |
·实验材料 | 第33-35页 |
·引物 | 第33页 |
·细胞株 | 第33页 |
·载体和试剂 | 第33-34页 |
·仪器设备 | 第34页 |
·主要溶液及其配制 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-42页 |
·AIV HA 基因的扩增 | 第35-36页 |
·重组原核载体PFastbac1-HA 的构建与鉴定 | 第36-38页 |
·重组转座子的构建及鉴定 | 第38页 |
·转染 | 第38-39页 |
·免疫荧光检测 | 第39页 |
·重组杆状病毒的扩大培养 | 第39页 |
·表达蛋白的HIS 纯化 | 第39-40页 |
·表达蛋白的鉴定 | 第40-41页 |
·凝胶过滤层析结果 | 第41-42页 |
·纯化蛋白的活性检测 | 第42页 |
·结果 | 第42-48页 |
·HA 基因扩增结果 | 第42-43页 |
·转移载体和PCR 产物双酶切结果 | 第43-44页 |
·重组质粒PCR 鉴定 | 第44页 |
·重组转座子的PCR 鉴定结果 | 第44-45页 |
·免疫荧光鉴定结果 | 第45页 |
·His 纯化的蛋白的 SDS-PAGE 鉴定 | 第45-46页 |
·His 纯化的蛋白的 Western-blotting 鉴定 | 第46页 |
·重组蛋白纯化结果及鉴定 | 第46-48页 |
·纯化蛋白的活性检测结果 | 第48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
·本研究的目的 | 第48-49页 |
·凝胶过滤层析条件的优化及实验结果的分析 | 第49页 |
·需要解决的关键问题及创新点 | 第49页 |
·研究成果的意义和应用前景 | 第49-51页 |
第四章 全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |