| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 文献综述 | 第14-24页 |
| 第一章 胎猪肌肉卫星细胞和 Reversine 的研究进展 | 第14-24页 |
| ·肌肉卫星细胞的研究进展 | 第14-17页 |
| ·肌肉干细胞 | 第14页 |
| ·肌肉干细胞与肌肉卫星细胞的关系 | 第14-17页 |
| ·最原始的肌肉干细胞——肌卫星细胞 | 第15-17页 |
| ·REVERSIINE 的产生背景 | 第17-21页 |
| ·Reversine 与诱导性多能干细胞的关系 | 第18-20页 |
| ·iPS 细胞应用的限制性 | 第18-19页 |
| ·小分子化合物的优点 | 第19-20页 |
| ·Reversine 的作用及其机理 | 第20-21页 |
| ·生殖细胞 | 第21-23页 |
| ·原始生殖细胞的起源和发生 | 第21-22页 |
| ·生殖细胞产生过程中的重要标记基因 | 第22页 |
| ·成体干细胞向生殖细胞分化的研究 | 第22-23页 |
| ·小结与展望 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-65页 |
| 第二章 猪肌肉卫星细胞的分离培养与生物学鉴定 | 第24-38页 |
| ·材料和方法 | 第24-30页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·胎猪胰腺组织的分离 | 第26页 |
| ·胎猪肌肉卫星细胞的分离与培养 | 第26-27页 |
| ·细胞生长曲线的绘制及群体倍增时间的计算 | 第27页 |
| ·细胞生长周期分析 | 第27页 |
| ·RT-PCR | 第27-29页 |
| ·流式细胞仪分析细胞表面抗原 | 第29页 |
| ·免疫荧光化学染色 | 第29页 |
| ·体外多能性分化 | 第29页 |
| ·体外向肌管诱导分化 | 第29页 |
| ·体外向神经诱导分化 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-36页 |
| ·胎猪肌肉卫星细胞的分离培养 | 第30页 |
| ·细胞的生长特性 | 第30-31页 |
| ·细胞相关基因表达的检测 | 第31页 |
| ·胎猪肌肉卫星细胞表达的特征性标记 | 第31-34页 |
| ·肌肉卫星细胞相关标记检测 | 第31-33页 |
| ·细胞表面抗原标记检测 | 第33-34页 |
| ·胎猪肌肉卫星细胞体外多能性分化 | 第34-36页 |
| ·细胞体外向三胚层分化 | 第34页 |
| ·细胞体外定向向肌管诱导分化 | 第34-35页 |
| ·细胞体外定向向神经分化 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 Reversine 对肌肉卫星细胞的作用 | 第38-48页 |
| ·材料和方法 | 第38-41页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要试剂配制 | 第39页 |
| ·Reversine 作用鉴定 | 第39-40页 |
| ·Reversine 处理后细胞计数 | 第39页 |
| ·BrdU 染色 | 第39页 |
| ·Reversine 处理后标记基因表达情况的检测 | 第39-40页 |
| ·QRT-PCR | 第40页 |
| ·Western-blotting 检测 | 第40页 |
| ·免疫荧光检测 | 第40页 |
| ·肌肉卫星细胞用 Reversine 处理后向脂肪细胞诱导 | 第40-41页 |
| ·油红 O 染色 | 第41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·Reversine 处理肌肉卫星细胞后细胞形态学变化 | 第41-42页 |
| ·BrdU 增殖分析 | 第42-43页 |
| ·免疫荧光染色结果 | 第43页 |
| ·QRT-PCR 检测和 Western-blotting 检测 | 第43-44页 |
| ·油红 O 染色 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第四章 胎猪肌肉卫星细胞向生殖细胞诱导 | 第48-65页 |
| ·材料和方法 | 第48-51页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·Reversine 对胎猪肌肉卫星细胞向生殖细胞分化的影响 | 第48-49页 |
| ·在体外牛卵泡液对胎猪肌肉卫星细胞分化的影响 | 第48-49页 |
| ·激素水平检测 | 第49页 |
| ·在体外 Reversine 处理后胎猪肌肉卫星细胞向生殖细胞分化 | 第49页 |
| ·免疫荧光染色检测 | 第49页 |
| ·RT-PCR 检测和 QRT-PCR 检测 | 第49页 |
| ·转染 Fifla 基因对胎猪肌肉卫星细胞的影响 | 第49-50页 |
| ·胎猪肌肉卫星细胞转染 Figla 基因和启动子 | 第49-50页 |
| ·免疫荧光染色检测 | 第50页 |
| ·QRT-PCR | 第50页 |
| ·实验动物 | 第50页 |
| ·数据处理 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-63页 |
| ·在体外 Reversine 能够促进胎猪肌肉卫星细胞向生殖细胞分化 | 第51-58页 |
| ·形态学观察 | 第51-52页 |
| ·激素水平检测 | 第52-53页 |
| ·在体外胎猪肌肉卫星细胞用 Reversine 处理后向生殖细胞诱导分化 | 第53-54页 |
| ·QRT-PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·免疫荧光染色检测 | 第55-57页 |
| ·阳性对照免疫荧光染色检测 | 第57-58页 |
| ·统计类卵母样阳性细胞个数和 Western-blotting 检测 | 第58页 |
| ·转染 Figla 基因和启动子对胎猪肌肉卫星细胞的影响 | 第58-60页 |
| ·形态学变化 | 第58-59页 |
| ·QRT-PCR 检测转染后基因表达情况 | 第59-60页 |
| ·免疫荧光染色检测转染后基因表达情况 | 第60页 |
| ·细胞移植 | 第60-63页 |
| ·细胞移植块制备 | 第60-61页 |
| ·H.E.染色检测 | 第61页 |
| ·移植块细胞免疫荧光染色 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
