| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-36页 |
| 1.1 背景 | 第12-28页 |
| 1.1.1 Exosomes的生物学起源及其结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Exosomes的组成 | 第13-19页 |
| 1.1.3 Exosomes的生物学功能 | 第19-24页 |
| 1.1.4 Exosomes作为基因药物及小分子药物载体研究现状 | 第24-28页 |
| 1.2 本文结构安排和研究意义 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-36页 |
| 第二章 具有靶向功能的exosomes设计及其共载基因与化疗药物研究 | 第36-72页 |
| 2.1 引言 | 第36-38页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第38-40页 |
| 2.3 实验方法 | 第40-52页 |
| 2.3.1 细胞培养及细胞转染 | 第40页 |
| 2.3.2 表达融合蛋白的质粒载体构建 | 第40-45页 |
| 2.3.3 慢病毒包装及浓缩 | 第45-48页 |
| 2.3.4 培养液中exosomes提取 | 第48页 |
| 2.3.5 Exosomes的TEM表征 | 第48页 |
| 2.3.6 Exosomes中RNA提取 | 第48页 |
| 2.3.7 Western Blot检测蛋白表达 | 第48-50页 |
| 2.3.8 microRNA(siRNA)表达水平的检测 | 第50-51页 |
| 2.3.9 细胞共培养系统的建立 | 第51-52页 |
| 2.3.10 裸鼠移植瘤的建立 | 第52页 |
| 2.3.11 统计学分析 | 第52页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第52-68页 |
| 2.4.1 融合蛋白Tar-Her2-LAMP2的构建及靶向exosomes的获得 | 第52-56页 |
| 2.4.2 Tar-Her2-EXO的表征及体外对HCT116细胞的靶向作用 | 第56-59页 |
| 2.4.3 电穿孔法获得含有Tar-Her2-EXO/miR-21 inhibitor/5-FU | 第59-60页 |
| 2.4.4 Tar-Her2-EXO/miR-21 inhibitor/5-FU体外抗肿瘤作用 | 第60-66页 |
| 2.4.5 Tar-Her2-EXO-miR-21 inhibitor/5-FU体内对肿瘤组织的靶向作用及抗肿瘤作用 | 第66-68页 |
| 2.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 第三章 基于生物合成方法实现exosomes对功能性小RNA载入的研究 | 第72-102页 |
| 3.1 引言 | 第72-73页 |
| 3.2 miRNA载入exosomes的生物合成方法 | 第73-85页 |
| 3.2.1 实验材料与方法 | 第73-75页 |
| 3.2.2 结果与讨论 | 第75-85页 |
| 3.3 siRNA载入exosomes的生物合成方法 | 第85-93页 |
| 3.3.1 实验材料与方法 | 第87-88页 |
| 3.3.2 结果与讨论 | 第88-93页 |
| 3.4 miRNA-decoy载入exosomes的生物合成方法 | 第93-99页 |
| 3.4.1 实验材料与方法 | 第95-96页 |
| 3.4.2 结果与讨论 | 第96-99页 |
| 3.5 本章小结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 第四章 基于生物合成方法获得载有siR-PLK1的exosomes及其用于肿瘤治疗研究 | 第102-118页 |
| 4.1 引言 | 第102-104页 |
| 4.2 实验方法 | 第104-108页 |
| 4.2.1 siRNA设计合成及重组质粒构建 | 第104-105页 |
| 4.2.2 RNAi表达载体pLVX-shRNA2的构建 | 第105-106页 |
| 4.2.3 pLVX-siR-PLK1-SM的构建 | 第106-108页 |
| 4.2.4 慢病毒包装及浓缩 | 第108页 |
| 4.2.5 慢病毒感染 | 第108页 |
| 4.2.6 细胞培养及传代 | 第108页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第108-115页 |
| 4.3.1 过表达siR-PLK1的工程细胞系的建立 | 第108-111页 |
| 4.3.2 工程细胞系来源的exosomes在体外对BT474中靶基因的调控作用 | 第111-113页 |
| 4.3.4 EXO-siR-PLK1对BT474细胞的周期及增殖的影响 | 第113-115页 |
| 4.4 本章小结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-118页 |
| 第五章 总结与展望 | 第118-122页 |
| 5.1 论文总结 | 第118-120页 |
| 5.2 论文创新 | 第120-121页 |
| 5.3 论文不足 | 第121页 |
| 5.4 展望 | 第121-122页 |
| 博士期间研究成果 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
