| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-43页 |
| §1.1 引言 | 第14-15页 |
| §1.2 肿瘤细胞迁移的机理 | 第15-17页 |
| §1.2.1 细胞迁移的原理 | 第15-16页 |
| §1.2.2 肿瘤细胞迁移的特征 | 第16-17页 |
| §1.2.3 影响细胞迁移的外部因素 | 第17页 |
| §1.3 SDF-1/CXCR4生物轴的生物功能 | 第17-20页 |
| §1.3.1 SDF-1/CXCR4生物轴简介 | 第17-18页 |
| §1.3.2 CXCR4与WHIM综合征 | 第18页 |
| §1.3.3 SDF-1/CXCR4生物轴与癌症 | 第18-20页 |
| §1.4 CXCR4内吞及分类转运的机制 | 第20-24页 |
| §1.4.1 CXCR4的泛素化 | 第20-21页 |
| §1.4.2 CXCR4在细胞内的分类转运机制 | 第21-23页 |
| §1.4.3 去泛素化作用对受体分类转运的影响 | 第23-24页 |
| §1.5 MIM蛋白的研究进展 | 第24-28页 |
| §1.5.1 BAR蛋白简介 | 第24-26页 |
| §1.5.2 MIM蛋白研究进展 | 第26-27页 |
| §1.5.3 MIM蛋白与纳米颗粒的吞噬 | 第27页 |
| §1.5.4 IRIKS蛋白研究进展 | 第27-28页 |
| §1.6 本文的主要工作 | 第28-29页 |
| §1.7 参考文献 | 第29-43页 |
| 第二章 MIM基因对小鼠骨髓细胞归巢的调控研究 | 第43-61页 |
| §2.1 引言 | 第43-44页 |
| §2.2 实验部分 | 第44-49页 |
| §2.2.1 实验主要材料及仪器 | 第44-45页 |
| §2.2.2 骨髓细胞的分离和培养 | 第45-46页 |
| §2.2.3 骨髓细胞迁移实验 | 第46页 |
| §2.2.4 骨髓细胞体外贴壁实验 | 第46页 |
| §2.2.5 蛋白免疫印迹(western blot)实验 | 第46-47页 |
| §2.2.6 流式细胞仪(FACS)技术分析细胞表面CXCR4内吞 | 第47页 |
| §2.2.7 免疫荧光染色实验 | 第47-48页 |
| §2.2.8 GST-Pull down实验分析小GIP酶激活水平 | 第48页 |
| §2.2.9 骨髓细胞归巢效率分析和菌落形成实验 | 第48-49页 |
| §2.2.10 数据分析 | 第49页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第49-58页 |
| §2.3.1 MIM基因敲除(MIM~(-/-))对骨髓细胞迁移能力的影响 | 第49-50页 |
| §2.3.2 MIM~(-/-)骨髓细胞表面CXCR4分析 | 第50-52页 |
| §2.3.3 MIM基因缺失对小鼠骨髓细胞归巢行为的影响 | 第52-54页 |
| §2.3.4 MIM基因的缺失对小GTP酶Rac和CDC42激活水平的影响 | 第54-55页 |
| §2.3.5 MIM基因的缺失对p38和ERK1/2磷酸化水平的影响 | 第55-56页 |
| §2.3.6 阻断p38磷酸化对细胞迁移以及归巢效率的影响 | 第56-58页 |
| §2.4 本章小结 | 第58-59页 |
| §2.5 参考文献 | 第59-61页 |
| 第三章 MIM蛋白调控CXCR4胞吞与降解的分子机理研究 | 第61-80页 |
| §3.1 引言 | 第61-62页 |
| §3.2 实验部分 | 第62-65页 |
| §3.2.1 主要实验材料及仪器 | 第62-63页 |
| §3.2.2 细胞培养及转染 | 第63-64页 |
| §3.2.3 Transwell实验检测细胞的迁移能力 | 第64页 |
| §3.2.4 蛋白免疫印迹(western blot)实验 | 第64页 |
| §3.2.5 流式细胞仪(FACS)技术分析细胞表面CXCR4 | 第64页 |
| §3.2.6 追踪实验分析CXCR4的降解速率 | 第64-65页 |
| §3.2.7 免疫共沉淀检测CXCR4泛素化水平以及蛋白之间的相互作用 | 第65页 |
| §3.2.8 数据分析 | 第65页 |
| §3.3 结果与讨论 | 第65-77页 |
| §3.3.1 MIM蛋白抑制细胞趋向SDF-1的迁移 | 第65-67页 |
| §3.3.2 MIM下调了细胞表面CXCR4内吞效率 | 第67-68页 |
| §3.3.3 MIM蛋白促进了SDF引起的CXCR4的降解 | 第68-70页 |
| §3.3.4 MIM蛋白增强了CXCR4泛素化水平 | 第70-71页 |
| §3.3.5 MIM蛋白增强了CXCR4和AIP4的相互作用 | 第71-72页 |
| §3.3.6 MIM、CXCR4、AIP4三者之间的相互作用分析 | 第72页 |
| §3.3.7 MIM和CXCR4、AIP4相互作用的机理 | 第72-74页 |
| §3.3.8 MIM和AIP4相互作用对泛素化的影响 | 第74-75页 |
| §3.3.9 MIM蛋白对SDF-1/CXCR4下游信号通路的调控 | 第75-77页 |
| §3.4 本章小结 | 第77-78页 |
| §3.5 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 MIM调控CXCR4胞内转运机制研究 | 第80-104页 |
| §4.1 引言 | 第80-81页 |
| §4.2 实验部分 | 第81-83页 |
| §4.2.1 实验主要材料及仪器 | 第81-82页 |
| §4.2.2 细胞培养及转染 | 第82页 |
| §4.2.3 Transwell实验检测细胞的迁移能力 | 第82页 |
| §4.2.4 流式细胞仪(FACS)检测细胞表面CXCR4数量 | 第82页 |
| §4.2.5 免疫共沉淀结合蛋白质免疫印迹检测蛋白之间的相互作用 | 第82页 |
| §4.2.6 免疫荧光标记实验检测蛋白之间的共定位 | 第82-83页 |
| §4.2.7 数据分析 | 第83页 |
| §4.3 结果与讨论 | 第83-101页 |
| §4.3.1 MIM蛋白和CXCR4在初级内体(EE)中的共定位研究 | 第83-85页 |
| §4.3.2 MIM蛋白和AIP4的共定位研究 | 第85-87页 |
| §4.3.3 MIM蛋白和CXCR4在多囊泡体(MVB)中的共定位研究 | 第87-90页 |
| §4.3.4 MIM蛋白CCD结构域是其和MVB共定位的关键结构域 | 第90-91页 |
| §4.3.5 MIM蛋白促进了多囊泡体的生物合成 | 第91-92页 |
| §4.3.6 MIM蛋白和CD9标记的MVB共定位研究 | 第92页 |
| §4.3.7 MIM蛋白和Rab5、Rab7相互作用分析 | 第92-95页 |
| §4.3.8 MIM蛋白和转运必需内体分选复合物(ESCRT)系统相互作用研究 | 第95-96页 |
| §4.3.9 MIM蛋白和溶酶体(LAMP)的共定位研究 | 第96-98页 |
| §4.3.10 MIM突变基因对受体内吞的影响 | 第98-100页 |
| §4.3.11 MIM突变基因对细胞迁移的影响 | 第100-101页 |
| §4.4 本章小结 | 第101-102页 |
| §4.5 参考文献 | 第102-104页 |
| 第五章 IRTKS对肿瘤细胞迁移调控机制研究 | 第104-119页 |
| §5.1 引言 | 第104页 |
| §5.2 实验部分 | 第104-106页 |
| §5.2.1 实验材料及仪器 | 第104-105页 |
| §5.2.2 细胞培养及转染 | 第105-106页 |
| §5.2.3 蛋白质免疫印迹分析 | 第106页 |
| §5.2.4 细胞迁移实验 | 第106页 |
| §5.2.5 细胞形态分析 | 第106页 |
| §5.2.6 数据分析 | 第106页 |
| §5.3 实验结果 | 第106-114页 |
| §5.3.1 IRTKS和MIM对细胞迁移能力的影响 | 第106-107页 |
| §5.3.2 IRTKS主要结构域对细胞迁移能力的分析 | 第107-108页 |
| §5.3.3 IRTKS增强了ERK和p38的磷酸化以及Rac1和CDC42的激活水平 | 第108-111页 |
| §5.3.4 IRIKS调控细胞迁移的机制研究 | 第111-112页 |
| §5.3.5 IRTKS、MIM蛋白对细胞形态学的影响 | 第112-114页 |
| §5.4 讨论 | 第114-116页 |
| §5.5 本章小结 | 第116页 |
| §5.6 参考文献 | 第116-119页 |
| 第六章 总结与展望 | 第119-122页 |
| §6.1 论文总结 | 第119-121页 |
| §6.2 论文展望 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 攻读博士期间的主要学术成果 | 第123-126页 |
| 附录:博士论文证明信 | 第126页 |
