| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 河流弧菌研究概况 | 第10页 |
| 1.2 细菌粘附研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 细菌粘附概况 | 第10页 |
| 1.2.2 细菌粘附研究现状 | 第10-11页 |
| 1.2.3 细菌粘附机制研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 粘附的研究方法 | 第13-14页 |
| 1.3.1 直接计数法 | 第13页 |
| 1.3.2 间接计数法 | 第13-14页 |
| 1.3.3 其它方法 | 第14页 |
| 1.4 转座子和转座子标签技术 | 第14-16页 |
| 1.4.1 转座子 | 第14-15页 |
| 1.4.2 转座子标签技术 | 第15页 |
| 1.4.3 Mini-Tn10的转座机制 | 第15-16页 |
| 1.5 主要研究内容和本研究的意义 | 第16-17页 |
| 第2章 河流弧菌对大黄鱼粘液粘附作用研究 | 第17-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第17-20页 |
| 2.1.1 试验菌株及培养条件 | 第17页 |
| 2.1.2 粘液的制备 | 第17-18页 |
| 2.1.3 体外粘附试验 | 第18页 |
| 2.1.4 ELISA法测定粘附的最佳条件的选择 | 第18页 |
| 2.1.5 菌浓度与粘附量关系的确定 | 第18-19页 |
| 2.1.6 不同条件下河流弧菌对各部分粘液的粘附作用 | 第19页 |
| 2.1.7 菌体的不同处理对粘附的影响试验 | 第19-20页 |
| 2.1.8 统计学分析 | 第20页 |
| 2.2 结果与分析 | 第20-27页 |
| 2.2.1 ELISA法测定粘附的最佳条件的选择 | 第20页 |
| 2.2.2 菌浓度与OD492关系的确定 | 第20-21页 |
| 2.2.3 菌浓度对河流弧菌粘附的影响 | 第21页 |
| 2.2.4 不同条件下河流弧菌对各部分粘液的粘附作用 | 第21-25页 |
| 2.2.5 菌体的不同处理对粘附的影响试验 | 第25-27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-31页 |
| 第3章 河流弧菌粘附缺陷突变株突变基因序列及功能分析 | 第31-47页 |
| 3.1 材料 | 第32页 |
| 3.1.1 试验用菌和载体 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 细菌结合转化构建河流弧菌突变体库 | 第32-33页 |
| 3.2.2 河流弧菌的粘附缺陷菌株的筛选 | 第33-34页 |
| 3.2.3 转座突变菌株的PCR鉴定 | 第34页 |
| 3.2.4 基因组DNA的抽取 | 第34页 |
| 3.2.5 Tail-PCR法克隆转座子插入位点侧翼序列 | 第34-36页 |
| 3.2.6 PCR产物回收和测序 | 第36页 |
| 3.2.7 序列分析 | 第36页 |
| 3.2.8 突变株生物性状分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-42页 |
| 3.3.1 质粒pLOF/Km的提取及转化E.coli Sm10 | 第37页 |
| 3.3.2 粘附缺陷突变株的筛选结果 | 第37-38页 |
| 3.3.3 突变株的PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.4 Tail-PCR结果 | 第39-40页 |
| 3.3.5 转座子插入位点侧翼序列分析 | 第40-41页 |
| 3.3.6 生长曲线 | 第41-42页 |
| 3.3.7 趋化试验 | 第42页 |
| 3.3.8 生物膜形成的测定 | 第42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-47页 |
| 第4章 小结与展望 | 第47-48页 |
| 4.1 小结 | 第47页 |
| 4.2 展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第57页 |
