| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-42页 |
| 1.1 生物支架材料 | 第16-28页 |
| 1.1.1 生物支架材料分类 | 第17-23页 |
| 1.1.2 生物材料支架制备工艺 | 第23-26页 |
| 1.1.3 生物支架特征 | 第26-28页 |
| 1.2 种子细胞 | 第28-37页 |
| 1.2.1 成骨细胞 | 第28页 |
| 1.2.2 骨髓基质细胞 | 第28-29页 |
| 1.2.3 基因修饰细胞 | 第29-30页 |
| 1.2.4 干细胞 | 第30-37页 |
| 1.2.5 种子细胞存在的问题及展望 | 第37页 |
| 1.3 生物活性因子 | 第37-39页 |
| 1.3.1 成纤维细胞生长因子 | 第38页 |
| 1.3.2 胰岛素样生长因子 | 第38页 |
| 1.3.3 血小板衍生生长因子 | 第38页 |
| 1.3.4 转化生长因子β | 第38-39页 |
| 1.3.5 骨形态发生蛋白 | 第39页 |
| 1.3.6 血管内皮生长因子 | 第39页 |
| 1.4 本课题研究的目的和意义 | 第39-42页 |
| 第二章 生物材料的制备 | 第42-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 2.2.1 HAP/β-TCP/CS多孔支架材料制备技术路线 | 第43页 |
| 2.2.2 KGM/HA多孔支架材料制备技术路线 | 第43-44页 |
| 2.2.3 HAP/β-TCP/CS多孔支架材料的制备方法 | 第44-45页 |
| 2.2.4 KGM/HA多孔支架材料的制备方法 | 第45页 |
| 2.2.5 支架孔径分析方法 | 第45-46页 |
| 2.2.6 支架抗压强度分析方法 | 第46页 |
| 2.2.7 支架吸水率分析方法 | 第46页 |
| 2.2.8 扫描电镜(SEM)分析 | 第46页 |
| 2.2.9 支架体外降解性能分析 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 2.3.1 HAP/β-TCP/CS多孔支架材料 | 第47-51页 |
| 2.3.2 KGM/HA多孔支架材料 | 第51-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-56页 |
| 第三章 诱导多能干细胞的制备和鉴定 | 第56-94页 |
| 3.1 实验材料 | 第57-60页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第57-58页 |
| 3.1.2 试剂配制方法 | 第58-59页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第59-60页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第60页 |
| 3.1.5 成纤维细胞来源 | 第60页 |
| 3.1.6 天然诱导剂制备 | 第60页 |
| 3.2 实验方法 | 第60-73页 |
| 3.2.1 诱导多能干细胞的制备和鉴定实验方案 | 第60-61页 |
| 3.2.2 成纤维细胞的制备 | 第61页 |
| 3.2.3 蛋白标准曲线的绘制 | 第61-62页 |
| 3.2.4 改良MTT法检测鱼卵提取物对成纤维细胞增殖的影响 | 第62页 |
| 3.2.5 人成纤维细胞的诱导 | 第62页 |
| 3.2.6 免疫细胞化学检测方法 | 第62页 |
| 3.2.7 半定量PCR检测基因表达量 | 第62-65页 |
| 3.2.8 组织切片制作方法 | 第65-66页 |
| 3.2.9 体内分化致瘤实验 | 第66页 |
| 3.2.10 DNA甲基化修饰分析(BSP法) | 第66-67页 |
| 3.2.11 实时荧光定量PCR分析 | 第67-70页 |
| 3.2.12 透射电镜切片制作 | 第70页 |
| 3.2.13 重编程细胞体外成骨分化诱导 | 第70-71页 |
| 3.2.14 重编程细胞体外成脂分化诱导 | 第71页 |
| 3.2.15 重编程细胞体外成神经细胞分化诱导 | 第71页 |
| 3.2.16 Western Blot分析 | 第71-73页 |
| 3.2.17 数据统计分析 | 第73页 |
| 3.3 结果 | 第73-88页 |
| 3.3.1 蛋白测定标准曲线 | 第73-74页 |
| 3.3.2 成纤维细胞的纯度鉴定 | 第74页 |
| 3.3.3 成纤维细胞的形态学 | 第74-75页 |
| 3.3.4 鱼卵提取物对成纤维细胞增殖的影响 | 第75-76页 |
| 3.3.5 诱导细胞形态学特征与干细胞标志性基因表达分析 | 第76-78页 |
| 3.3.6 畸胎瘤的组织结构 | 第78-79页 |
| 3.3.7 多潜能基因启动子区域甲基化分析 | 第79-81页 |
| 3.3.8 实时荧光定量PCR结果 | 第81-82页 |
| 3.3.9 信号通路关键蛋白磷酸化结果 | 第82-85页 |
| 3.3.10 重编程细胞体外分化潜能 | 第85-87页 |
| 3.3.11 亚细胞结构分析 | 第87-88页 |
| 3.4 讨论 | 第88-91页 |
| 3.5 小结 | 第91-94页 |
| 第四章 细胞-支架复合材料的生物相容性及对骨损伤的治疗和修复作用 | 第94-110页 |
| 4.1 实验材料 | 第95页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第95页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-99页 |
| 4.2.1 细胞-支架生物相容性及骨损伤治疗研究总体方案 | 第95-96页 |
| 4.2.2 iMS细胞的制备 | 第96-97页 |
| 4.2.3 生物支架材料浸提液的制备 | 第97页 |
| 4.2.4 细胞毒性实验 | 第97-98页 |
| 4.2.5 组织切片的制作步骤 | 第98页 |
| 4.2.6 细胞-支架复合材料的制备方法 | 第98页 |
| 4.2.7 狗桡骨缺损动物模型及移植方法 | 第98页 |
| 4.2.8 兔桡骨缺损动物模型及移植方法 | 第98-99页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第99-107页 |
| 4.3.1 iMS细胞-HAP/β-TCP/CS复合材料的生物相容性及骨损伤修复结果 | 第99-103页 |
| 4.3.2 iMS细胞-KGM/HA复合材料的生物相容性及骨损伤修复结果 | 第103-107页 |
| 4.4 小结 | 第107-110页 |
| 第五章 结论与展望 | 第110-114页 |
| 5.1 结论 | 第110-111页 |
| 5.2 创新点 | 第111页 |
| 5.3 问题及展望 | 第111-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-132页 |
| 附录 | 第132-138页 |
| 附录A 攻读博士学位期间发表的论文及成果 | 第132-133页 |
| 附录B 相关图表 | 第133-138页 |
