Dissertation Title | 第2-3页 |
Sponsorship | 第3-11页 |
Certification | 第11-12页 |
Declaration | 第12-13页 |
Acknowledgement | 第13-15页 |
Abstract | 第15页 |
Part-I: Review | 第18-78页 |
Chapter-1 Transgenic Crops: Current Challenges and Future Perspectives | 第18-39页 |
1.1 Introduction | 第18-19页 |
1.2 Mechanisms by Food Hazards may arise during the genetic engineering of crops | 第19-21页 |
1.2.1 Inserted transgenes and their expression products | 第19页 |
1.2.2 Secondary and pleiotropic effects of gene expression | 第19-21页 |
1.3 Assessment of risks relative to traditional crop breeding | 第21-23页 |
1.3.1 Inserted genes and their expression products | 第21-22页 |
1.3.2 Secondary effects of gene expression | 第22-23页 |
1.4 Hazards associated with some commercially important transgenes | 第23-32页 |
1.4.1 Herbicide resistance transgenes | 第23-24页 |
1.4.2 Insect resistance transgenes | 第24-26页 |
1.4.3 Use of selectable marker genes | 第26-29页 |
1.4.4 Grain quality alterations | 第29-30页 |
1.4.5 Non target effects | 第30-32页 |
References | 第32-39页 |
Chapter-2 Approaches to Pest Control for Plant protection by Genetic Engineering | 第39-56页 |
2.1 Need for approaches | 第39-40页 |
2.2 Lectins | 第40-41页 |
2.3 Arcelin | 第41页 |
2.4 Amylase inhibitors | 第41-42页 |
2.5 Ribosome- inactivating proteins (RIPs) | 第42页 |
2.6 Cytokinin-mediated insect resistance | 第42-43页 |
2.7 Lipid Oxidases- potent insecticidal proteins | 第43-44页 |
2.8 Vegetative insecticidal protein from Bacillus thuringiensis,VIPs | 第44页 |
2.9 Proteinase inhibitors | 第44-46页 |
2.10 Other novel genes | 第46-47页 |
Rreferences | 第47-56页 |
Chapter-3 Bacillus thuringiensis and its application in agriculture | 第56-78页 |
3.1 Historical background | 第56-57页 |
3.2 Genetic manipulation of Bt | 第57页 |
3.3 Mode of action | 第57-59页 |
3.4 Diversification of genes encoding 8-endotoxins | 第59-60页 |
3.5 Specificity and durability | 第60-61页 |
3.6 Achieving adequate expression of Bt. in crop plants | 第61-63页 |
3.7 Field trial testing of Bt. crops | 第63-67页 |
3.8 The future of transgenic Bt. expressing plants | 第67-68页 |
3.9 Other bacterial insecticidal proteins | 第68页 |
References | 第68-78页 |
Part-II | 第78-161页 |
Chapter-4 Assessment of role of various key factors involved in the culture system of Rice (Oryza sativa L.) | 第78-97页 |
4.1 Introduction | 第78-79页 |
4.2 Materials and methods | 第79-81页 |
4.2.1 Plant materials and callus culture conditions | 第79-80页 |
4.2.2 Callus induction | 第80页 |
4.2.3 Plant regeneration | 第80-81页 |
4.3 Results | 第81-91页 |
4.3.1 Callus induction | 第81-88页 |
4.3.1.1 Effect of growth regulators on embryogenic callus induction | 第82-85页 |
4.3.1.2 Effect of sucrose concentrations on embryogenic callus induction | 第85-86页 |
4.3.1.3 Comparison of carbon source on embryogenic callus induction | 第86页 |
4.3.1.4 Impact of Casien Hydrolysate on callus Browning in XC-95 | 第86-87页 |
4.3.1.5 Effect of gelation types on embryogenic callus induction | 第87-88页 |
4.3.2 Plant regeneration | 第88-91页 |
4.3.2.1 Effect of phyta gel strength on shoot regeneration capacity | 第88-89页 |
4.3.2.2 Effect of cytokinin concentration on shoot regeneration | 第89-90页 |
4.3.2.3 Plantlet establishment | 第90-91页 |
4.4 Discussion | 第91-94页 |
References | 第94-97页 |
Chapter 5 Development of Transgenic Rice Plants Expressing Resistance to Lepidoptera Insect Pests | 第97-145页 |
5.1 Introduction | 第97-101页 |
5.2 Materials and methods | 第101-112页 |
5.2.1 Plant Materials and Tissue Culture Conditions | 第101页 |
5.2.2 Transformation Vectors | 第101-102页 |
5.2.3 Preparation of Competent Agrobacterium Cells | 第102-105页 |
5.2.4 Transformation of plasmid DNA into Agrobacterium | 第105页 |
5.2.5 Transformation Strategy; co-cultivation, selection and plant regeneration | 第105-106页 |
5.2.6 Factor evaluation | 第106-107页 |
5.2.7 PCR analysis | 第107-109页 |
5.2.7.1 Mini-preparation of Genomic DNA | 第107-108页 |
5.2.7.2 Thermal Reaction | 第108-109页 |
5.2.8 RT (Reverse transcriptase)-PCR Analysis | 第109页 |
5.2.8.1 RNA extraction | 第109页 |
5.2.8.2 Reaction conditions | 第109页 |
5.2.9 GUS Histochemical assay | 第109-111页 |
5.2.10 Comparison of Morphological traits and Progeny Testing | 第111页 |
5.2.11 Insect Bio-assay | 第111-112页 |
5.2.11.1 Stripe stem borer(Chilo suppressalis) | 第111页 |
5.2.11.2 . Rice Leaffolder {Cnaphalocrocis medinalis (Guenee) | 第111-112页 |
5.2.12 Quantification of CrylAc Protein | 第112页 |
5.2.13 Data analysis | 第112页 |
5.3 Results | 第112-135页 |
5.3.1 Plasmid DNA Transformation frequency studies in Agrobacterium | 第112-113页 |
5.3.2 Factors affecting plant tissue transformation efficiency mediated by Agrobacterium | 第113-120页 |
5.3.2.1 Effect of virulence induction medium (VIM) | 第113-115页 |
5.3.2.2 Significance of Acetosyringone , a phenolic inducer compound | 第115-116页 |
5.3.2.3 Impact of relationship between bacterial density and co-cultivation time | 第116-117页 |
5.3.2.4 Effect of pH | 第117-118页 |
5.3.2.5 Effect of carbon source type | 第118-119页 |
5.3.2.6 Effect of Photoperiod conditions during co-cultivation | 第119-120页 |
5.3.3 Comparison of different selection procedures on transformation efficiency | 第120页 |
5.3.4 PCR and RT- PCR analyses for transgenes in the putative transgenic plants | 第120-121页 |
5.3.5 Inheritance of the selective gene | 第121-122页 |
5.3.6 Rl Agronomic performance analysis | 第122-123页 |
5.3.7 Insect Bio-Assay | 第123-127页 |
5.3.7.1 Strip stem borer (Chilo suppressalis) | 第123-125页 |
5.3.7.2 Rice Leaffolder (Cnaphalocrocis medinalis -Guenee) | 第125-127页 |
5.3.8 Quantification of CrylA(c) ICP levels 110 5.4 Discussion 111 5.4.1 Insect Resistance Evaluation | 第127-135页 |
References | 第135-145页 |
Chapter-6 Characterization of relative expression pattern of constitutive and tissue specific promoters in the transgenic Rice (Oryza sativa L.) | 第145-161页 |
6.1 Introduction | 第145-146页 |
6.2 Materials and methods | 第146-149页 |
6.2.1 Plant materials | 第146页 |
6.2.2 Transformation vectors | 第146-147页 |
6.2.3 Transformation of plasmid DNA into Agrobacterium | 第147页 |
6.2.4 Transformation Strategy; co-cultivation, selection and plant regeneration | 第147页 |
6.2.5 PCR analysis | 第147-148页 |
6.2.6 Substrates | 第148页 |
6.2.7 Histochemical assay | 第148页 |
6.2.8 Fluorometric assay | 第148-149页 |
6.2.8.1 Lysis conditions | 第148-149页 |
6.2.8.2 Reaction | 第149页 |
6.2.9 Data analysis | 第149页 |
6.3 Results | 第149-155页 |
6.3.1 Production of transgenic rice lines | 第149-150页 |
6.3.2 Molecular analysis of transgenic clones | 第150页 |
6.3.3 Activity of Promoters in various vegetative tissues of transgenic lines | 第150-153页 |
6.3.3.1 Strength of CaMV 35S promoter | 第150页 |
6.3.3.2 Strength of tissue specific promoter | 第150-152页 |
6.3.3.3 Overall Comparison of Promoters | 第152-153页 |
6.3.4 Visualization of GUS activity in transgenic plants | 第153-155页 |
6.4 Discussion | 第155-157页 |
References | 第157-161页 |
Conclusion and perspectives | 第161页 |