| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-12页 |
| 2 材料和方法 | 第12-29页 |
| ·试验材料 | 第12-14页 |
| ·菌株和质粒 | 第12页 |
| ·供试培养基 | 第12页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第12-14页 |
| ·主要仪器和设备 | 第14页 |
| ·玉米大斑病菌漆酶活性分析 | 第14-15页 |
| ·玉米大斑病菌平板显色反应比较 | 第14页 |
| ·漆酶活力测定 | 第14-15页 |
| ·漆酶对玉米大斑病菌致病力的影响 | 第15页 |
| ·玉米大斑病菌STLAC1 基因敲除突变体的获得 | 第15-20页 |
| ·StLAC1 基因重组质粒的提取与酶切验证 | 第15-16页 |
| ·同源重组载体转化玉米大斑病菌原生质体 | 第16页 |
| ·转化子的筛选 | 第16页 |
| ·转化子基因组DNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第17页 |
| ·转化子的Southern blot 验证 | 第17-19页 |
| ·转化子总RNA 提取及第一链cDNA 的合成 | 第19页 |
| ·转化子的半定量RT-PCR 分析 | 第19-20页 |
| ·玉米大斑病菌STLAC1 基因敲除突变体分析 | 第20-25页 |
| ·突变菌株生长发育分析 | 第20页 |
| ·突变菌株漆酶活性的测定 | 第20-21页 |
| ·突变菌株的胞内黑色素分析 | 第21页 |
| ·突变菌株附着胞膨压的测定 | 第21-23页 |
| ·突变菌株的渗透调节能力分析 | 第23页 |
| ·突变菌株的细胞壁降解酶活性分析 | 第23-24页 |
| ·突变菌株HT-毒素活性分析 | 第24-25页 |
| ·玉米大斑病菌STLAC2 基因全长的克隆及生物信息学分析 | 第25-28页 |
| ·玉米大斑病菌总RNA 提取及第一链cDNA 的合成 | 第25页 |
| ·玉米大斑病菌基因组DNA 提取 | 第25页 |
| ·玉米大斑病菌StLAC2 基因同源片段的获得及基因全长引物的设计 | 第25页 |
| ·5′RACE 技术获得StLAC2 同源片段上游序列 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增产物的克隆 | 第26-27页 |
| ·基因的拼接 | 第27页 |
| ·StLAC2 基因开放阅读框（ORF）的扩增 | 第27页 |
| ·基因结构及功能的生物信息学分析 | 第27页 |
| ·玉米大斑病菌漆酶基因相似性的聚类分析及保守结构域的鉴定 | 第27-28页 |
| ·玉米大斑病菌STLAC2 基因的拷贝数分析 | 第28-29页 |
| ·探针制备 | 第28页 |
| ·限制性内切酶酶切基因组DNA | 第28页 |
| ·电泳、转膜、杂交 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-49页 |
| ·玉米大斑病菌漆酶活性分析 | 第29-31页 |
| ·平板显色反应比较 | 第29页 |
| ·漆酶活力测定 | 第29-30页 |
| ·漆酶致病力分析 | 第30-31页 |
| ·玉米大斑病菌漆酶基因STLAC1 的功能分析 | 第31-43页 |
| ·StLAC1 重组载体的酶切验证 | 第31-32页 |
| ·玉米大斑病菌原生质体的再生及转化子筛选 | 第32页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第32-34页 |
| ·转化子的Southern blot 验证 | 第34-35页 |
| ·转化子的半定量RT-PCR 分析 | 第35页 |
| ·突变菌株的形态学特征 | 第35-36页 |
| ·突变菌株的产孢量 | 第36页 |
| ·突变菌株菌丝的显微观察 | 第36-37页 |
| ·突变菌株漆酶活性的测定 | 第37页 |
| ·突变菌株的胞内黑色素分析 | 第37-38页 |
| ·突变菌株附着胞膨压的测定 | 第38-41页 |
| ·突变菌株的渗透调节能力分析 | 第41页 |
| ·突变菌株的细胞壁降解酶活性分析 | 第41-42页 |
| ·突变菌株HT-毒素活性分析 | 第42-43页 |
| ·STLAC2 基因全长的克隆与结构分析 | 第43-48页 |
| ·StLAC2 基因5′-末端cDNA 的克隆 | 第43-44页 |
| ·StLAC2 基因的全长DNA 和cDNA 的克隆与分析 | 第44-45页 |
| ·StLAC2 基因及其编码产物的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| ·玉米大斑病菌漆酶相似性的聚类分析及保守结构域的鉴定 | 第46-48页 |
| ·STLAC2 基因的拷贝数分析 | 第48-49页 |
| ·探针的制备 | 第48页 |
| ·基因组DNA 酶切效果检测 | 第48页 |
| ·StLAC2 基因的拷贝数分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·漆酶活性分析 | 第49页 |
| ·STLAC1 基因的功能 | 第49-50页 |
| ·漆酶基因家族 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
