| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 红树植物简介 | 第10-12页 |
| 1.1.1 红树植物的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 红树植物的耐盐机制 | 第11-12页 |
| 1.2 植物的耐盐机制 | 第12-15页 |
| 1.3 抗氧化酶类 | 第15-18页 |
| 1.3.1 超氧化物歧化酶 | 第15-17页 |
| 1.3.2 过氧化氢酶 | 第17-18页 |
| 1.3.3 过氧化物酶 | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第18-20页 |
| 2 盐胁迫对角果木根系抗氧化酶类的影响 | 第20-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 不同盐浓度的盐胁迫下角果木根系可溶性蛋白含量的测定 | 第20-21页 |
| 2.2.2 不同盐浓度的盐胁迫下角果木根系SOD活性的测定 | 第21-23页 |
| 2.2.3 不同盐浓度的盐胁迫下角果木根系POD活性的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.4 不同盐浓度的盐胁迫下角果木根系CAT活性的测定 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 不同盐浓度的盐胁迫对角果木根系蛋白质总量的影响 | 第25页 |
| 2.3.2 不同盐浓度的盐胁迫对角果木根部SOD活性的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.3 不同盐浓度的盐胁迫对角果木根部POD活性的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.4 不同盐浓度的盐胁迫对角果木根部CAT活性的影响 | 第27-28页 |
| 3 角果木Mn-SOD和Cu/Zn-SOD基因的克隆 | 第28-35页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验仪器及试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 根据数据表达谱分析筛选得到Mn-SOD和Cu/Zn-SOD基因 | 第29页 |
| 3.2.2 引物合成 | 第29页 |
| 3.2.3 RNA的提取及cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 3.2.4 目的基因的分离 | 第30页 |
| 3.2.5 目的片段的回收、连接 | 第30页 |
| 3.2.6 转化大肠杆菌DH5α及抗性筛选 | 第30页 |
| 3.2.7 重组质粒的提取及测序 | 第30-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.3.1 筛选得到Mn-SOD和Cu/Zn-SOD基因 | 第31-33页 |
| 3.3.2 红树总RNA提取结果 | 第33-34页 |
| 3.3.3 目的片段的分离 | 第34-35页 |
| 4 Mn-SOD和Cu/Zn-SOD基因酵母表达载体的构建及盐胁迫分析 | 第35-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第35页 |
| 4.2 实验药品 | 第35-36页 |
| 4.3 实验方法 | 第36-41页 |
| 4.3.1 目的片段及真核酵母表达载体pYES2进行双酶切 | 第36页 |
| 4.3.2 双酶切产物的连接 | 第36页 |
| 4.3.3 连接产物在感受态DH5α中的遗传转化 | 第36页 |
| 4.3.4 提取重组质粒及其检测 | 第36-37页 |
| 4.3.5 重组质粒在酵母菌INVSc Ⅰ中的遗传转化 | 第37-38页 |
| 4.3.6 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)和INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)的PCR检测 | 第38页 |
| 4.3.7 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)和INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)的蛋白表达检测 | 第38-39页 |
| 4.3.8 盐胁迫对INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)中SOD的影响 | 第39-40页 |
| 4.3.9 盐胁迫对INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)中SOD的影响 | 第40页 |
| 4.3.10 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)和INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)的饱和盐溶液处理 | 第40页 |
| 4.3.11 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)和INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)不同浓度盐溶液处理 | 第40-41页 |
| 4.4 实验结果及分析 | 第41-54页 |
| 4.4.1 重组质粒的提取 | 第41-42页 |
| 4.4.2 重组质粒的PCR检测 | 第42-43页 |
| 4.4.3 重组质粒的双酶切检测 | 第43-44页 |
| 4.4.4 筛选得到重组质粒转化酵母菌INVSc Ⅰ后所用的培养基 | 第44页 |
| 4.4.5 重组质粒酵母菌INVSc Ⅰ遗传转化后的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 4.4.6 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)的蛋白表达 | 第45-46页 |
| 4.4.7 INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)的蛋白表达 | 第46-47页 |
| 4.4.8 盐胁迫对INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)中SOD的影响 | 第47页 |
| 4.4.9 盐胁迫对INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)中SOD的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.10 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)用饱和盐溶液处理结果 | 第48-49页 |
| 4.4.11 INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/ZnSOD)用饱和盐溶液处理结果 | 第49-51页 |
| 4.4.12 INVSc Ⅰ(pYES2-Mn SOD)用不同溶液盐溶液处理 | 第51-52页 |
| 4.4.13 INVSc Ⅰ(pYES2-Cu/Zn SOD)用不同溶液盐溶液处理 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-57页 |
| 6 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
