摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
英文缩略词表 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 泛素家族基因研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 泛素家族基因研究 | 第12-14页 |
1.1.2 泛素家族在性腺发育中的研究 | 第14-15页 |
1.2 斑节对虾卵巢发育的研究 | 第15-16页 |
1.3 本研究的目的意义 | 第16-17页 |
1.4 本研究的主要技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 材料 | 第18-20页 |
2.1.1 斑节对虾样品制备 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第18-20页 |
2.2 方法 | 第20-30页 |
2.2.1 卵巢切片制作 | 第20页 |
2.2.2 RNA提取及逆转录 | 第20-21页 |
2.2.3 泛素家族基因的筛选和验证 | 第21-24页 |
2.2.4 泛素家族基因的全长获得 | 第24页 |
2.2.5 泛素家族基因的表达情况 | 第24页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第24-25页 |
2.2.7 原核表达 | 第25页 |
2.2.8 SDS-PAGE及免疫印迹 | 第25-27页 |
2.2.9 蛋白纯化 | 第27-28页 |
2.2.10 蛋白浓度测定 | 第28-29页 |
2.2.11 免疫组化 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-68页 |
3.1 卵巢切片分期 | 第30-31页 |
3.2 泛素基因家族的筛选与克隆 | 第31-33页 |
3.2.1 基因的筛选 | 第31页 |
3.2.2 泛素家族基因克隆 | 第31-33页 |
3.3 泛素家族基因的表达分析 | 第33-35页 |
3.3.1 泛素家族基因在斑节对虾不同性腺发育时期卵巢中的表达 | 第33-34页 |
3.3.2 泛素家族基因在斑节对虾不同性腺发育时期肝胰腺中的表达 | 第34-35页 |
3.4 泛素基因家族的蛋白功能研究 | 第35-68页 |
3.4.1 PmUBS30基因的蛋白功能研究 | 第35-40页 |
3.4.2 PmUBA1基因的蛋白功能研究 | 第40-49页 |
3.4.3 PmUBE2A基因的蛋白功能研究 | 第49-53页 |
3.4.4 PmUBE2G1基因的蛋白功能研究 | 第53-58页 |
3.4.5 PmUBE2G2基因的蛋白功能研究 | 第58-62页 |
3.4.6 PmUBE2H基因的蛋白功能研究 | 第62-68页 |
4 讨论 | 第68-77页 |
4.1 泛素基因家族在斑节对虾性腺不同发育时期的卵巢和肝胰腺中的表达分析 | 第68-70页 |
4.1.1 泛素基因家族在卵巢中的表达分析 | 第68-69页 |
4.1.2 泛素基因家族在肝胰腺中的表达分析 | 第69-70页 |
4.2 PmUBS30基因的结构及功能 | 第70-71页 |
4.3 PmUBA1基因的结构及功能 | 第71-72页 |
4.4 PmUBE2A基因的结构及功能 | 第72-73页 |
4.5 PmUBE2G1基因的结构及功能 | 第73-74页 |
4.6 PmUBE2G2基因的结构及功能 | 第74-75页 |
4.7 PmUBE2H基因的结构及功能 | 第75-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-86页 |
附录A 引物序列 | 第86-91页 |
附录B 基因序列 | 第91-103页 |
附录C 荧光定量PCR结果 | 第103-110页 |