一株FPV-GZ01猫细小病毒的分离鉴定与遗传进化分析及对猫的致病性研究
摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 生物学特性 | 第12-14页 |
1.1.1 形态特征与理化性质 | 第12-13页 |
1.1.2 培养特性 | 第13页 |
1.1.3 血凝特性 | 第13-14页 |
1.2 猫细小病毒的基因组结构与功能 | 第14-16页 |
1.2.1 基因组结构 | 第14页 |
1.2.2 结构蛋白 | 第14-15页 |
1.2.3 非结构蛋白 | 第15-16页 |
1.3 猫细小病毒的流行病学情况 | 第16-17页 |
1.4 猫细小病毒的感染机制 | 第17-18页 |
1.5 猫细小病毒的诊断方法 | 第18-19页 |
1.5.1 血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验 | 第18-19页 |
1.5.2 细胞分离培养 | 第19页 |
1.5.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第19页 |
1.6 本研究的背景与意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-35页 |
2.1 试验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 病料来源 | 第20页 |
2.1.2 细胞 | 第20-21页 |
2.1.3 病毒毒株 | 第21页 |
2.1.4 实验动物 | 第21页 |
2.1.5 主要试验试剂 | 第21-22页 |
2.1.6 仪器与器材 | 第22页 |
2.2 研究方法 | 第22-35页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第22-24页 |
2.2.2 粪便样品的处理 | 第24页 |
2.2.3 粪便样品的血凝试验 | 第24页 |
2.2.4 样品中DNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.5 对粪便样品进行PCR检测 | 第25-26页 |
2.2.6 病毒的分离 | 第26页 |
2.2.7 病毒理化特性试验 | 第26-27页 |
2.2.8 血凝鉴定 | 第27页 |
2.2.9 病毒PCR鉴定 | 第27页 |
2.2.10 全基因组的PCR引物设计 | 第27-28页 |
2.2.11 全基因组的PCR反应体系和条件 | 第28页 |
2.2.12 PCR产物的回收 | 第28-29页 |
2.2.13 DNA凝胶回收试剂盒 | 第29页 |
2.2.14 PCR产物的克隆 | 第29-31页 |
2.2.15 同源性分析 | 第31-32页 |
2.2.16 主要功能位点分析 | 第32-33页 |
2.2.17 遗传进化分析 | 第33页 |
2.2.18 动物实验分组 | 第33-34页 |
2.2.19 攻毒剂量 | 第34页 |
2.2.20 临床监测 | 第34页 |
2.2.21 实验动物粪便DNA的提取与鉴定 | 第34页 |
2.2.22 动物剖检 | 第34-35页 |
2.2.23 石蜡切片的制作 | 第35页 |
2.2.24 免疫组织化学染色 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-60页 |
3.1 粪便样品的PCR检测结果 | 第35-36页 |
3.2 粪便样品的血凝实验结果 | 第36页 |
3.3 病毒分离鉴定的结果 | 第36-37页 |
3.4 病毒的理化特性实验结果 | 第37页 |
3.5 病毒的PCR鉴定结果 | 第37-38页 |
3.6 病毒的血凝实验结果 | 第38页 |
3.7 病毒的全基因组序列分段扩增结果 | 第38-39页 |
3.8 病毒的同源性分析结果 | 第39-42页 |
3.9 病毒的主要氨基酸功能位点分析结果 | 第42-44页 |
3.10 病毒的遗传进化分析结果 | 第44-54页 |
3.11 动物实验结果 | 第54-60页 |
3.11.1 临床症状 | 第54页 |
3.11.2 体温监测结果 | 第54页 |
3.11.3 体重监测结果 | 第54-55页 |
3.11.4 动物存活率 | 第55-56页 |
3.11.5 粪便PCR检测结果 | 第56-57页 |
3.11.6 病理剖检 | 第57-58页 |
3.11.7 病理组织学变化 | 第58-59页 |
3.11.8 免疫组织化学染色结果 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-65页 |
4.1 粪便样品的PCR检测 | 第60页 |
4.2 粪便样品的血凝实验 | 第60-61页 |
4.3 病毒分离鉴定 | 第61页 |
4.4 病毒的理化特性实验 | 第61页 |
4.5 病毒的PCR鉴定 | 第61页 |
4.6 病毒的血凝实验 | 第61页 |
4.7 病毒的全基因组序列分段扩增 | 第61-62页 |
4.8 病毒的同源性分析 | 第62页 |
4.9 病毒的主要氨基酸功能位点分析 | 第62-63页 |
4.10 病毒的遗传进化分析结果 | 第63页 |
4.11 动物实验分析 | 第63-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
附录 硕士期间发表论文 | 第70-71页 |