| 第一部分 LIM家族蛋白AJUBA对结肠癌肿瘤细胞迁移的作用研究 | 第11-40页 |
| 摘要 | 第12-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| 第二章 材料设备与实验方法 | 第21-28页 |
| 2.1 材料设备 | 第21页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第21页 |
| 2.2.2 构建质粒与转染 | 第21-22页 |
| 2.2.3 构建Ajuba稳转细胞系 | 第22-23页 |
| 2.2.4 Western blot检测细胞内蛋白表达 | 第23-24页 |
| 2.2.5 细胞总RNA提取与cDNA合成 | 第24-26页 |
| 2.2.6 RT-PCR检测基因表达 | 第26页 |
| 2.2.7 Transwell侵袭实验 | 第26页 |
| 2.2.8 荧光素酶报告基因实验 | 第26页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀实验(Co-Immunoprecipitation, Co-IP) | 第26-27页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-33页 |
| 3.1 Ajuba与转录因子Twist存在相互作用 | 第28页 |
| 3.2 Ajuba协同Twist调控N-cadherin表达 | 第28-29页 |
| 3.3 构建结直肠癌SW1116-Ajuba稳转细胞 | 第29-30页 |
| 3.4 Ajuba可以促进细胞迁移侵袭能力 | 第30-32页 |
| 3.5 Ajuba蛋白质水平改变影响细胞上皮-间质化转变 | 第32-33页 |
| 第四章 讨论 | 第33-35页 |
| 4.1 结直肠腺癌与肿瘤细胞转移 | 第33页 |
| 4.2 Ajuba在细胞上皮-间质化(EMT)中的作用 | 第33-34页 |
| 4.3 肿瘤标志物的建立与远期研究规划 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 综述 Twist1蛋白在肿瘤疾病中的生物作用及相关分子机制研究 | 第40-59页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 第二部分 LIM蛋白AJUBA对乳腺癌细胞的生物学作用与分子机制研究 | 第59-90页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| ABSTRACT | 第61-62页 |
| 第一章 绪论 | 第62-64页 |
| 第二章 材料设备与实验方法 | 第64-75页 |
| 2.1 材料设备 | 第64页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第64页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第64页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第64页 |
| 2.2 实验方法 | 第64-75页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第64页 |
| 2.2.2 构建质粒与转染 | 第64-65页 |
| 2.2.3 构建Ajuba稳转细胞系 | 第65-66页 |
| 2.2.4 Western blot检测细胞内蛋白表达 | 第66-67页 |
| 2.2.5 细胞总RNA提取与cDNA合成 | 第67-69页 |
| 2.2.6 RT-PCR检测基因表达 | 第69页 |
| 2.2.7 荧光素酶报告基因实验 | 第69页 |
| 2.2.8 细胞活性检测(Cell Counting Kit-8, CCK-8) | 第69页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第69-70页 |
| 2.2.10 免疫荧光实验(IF) | 第70-71页 |
| 2.2.11 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第71-74页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第74-75页 |
| 第三章 实验结果 | 第75-85页 |
| 3.1 Ajuba与雌激素受体α(ERα)存在相互作用 | 第75-77页 |
| 3.2 Ajuba全长与ERαC端结合 | 第77-78页 |
| 3.3 Ajuba表达上升能够加速细胞生长 | 第78-81页 |
| 3.4 Ajuba通过协助ERα上调细胞内CDK6表达 | 第81-82页 |
| 3.5 Ajuba参与ERα介导的CDK6转录活性 | 第82-85页 |
| 第四章 讨论 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第91页 |
