摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 硒与硒蛋白 | 第11-15页 |
1.1.1 硒 | 第11页 |
1.1.2 硒蛋白 | 第11-15页 |
1.2 15KD硒蛋白 | 第15-17页 |
1.3 15KD硒蛋白与内质网应激 | 第17-19页 |
1.3.1 内质网应激简介 | 第17页 |
1.3.2 内质网应激激活的信号通路 | 第17-19页 |
1.4 15KD硒蛋白与内质网应激 | 第19-20页 |
1.5 15KD硒蛋白与神经退行性疾病 | 第20页 |
1.6 差异蛋白质组学 | 第20-21页 |
1.6.1 差异蛋白质组学 | 第20-21页 |
1.6.2 iTRAQ技术在蛋白质组学中的应用 | 第21页 |
1.7 本课题研究的目的与意义 | 第21-22页 |
第2章 实验材料与方法 | 第22-37页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 实验所用的细胞模型 | 第22页 |
2.2 实验试剂 | 第22-24页 |
2.3 主要仪器和设备 | 第24-25页 |
2.4 主要应用的生物学软件及相关网站 | 第25-26页 |
2.4.1 western blot数据分析 | 第25-26页 |
2.4.2 iTRQ生物信息学分析 | 第26页 |
2.5 培养基及主要试剂的配制 | 第26-28页 |
2.5.1 细胞培养基的配置 | 第26页 |
2.5.2 SDS-PAGE电泳试剂的配制 | 第26-27页 |
2.5.3 iTRQ实验试剂的配置 | 第27-28页 |
2.6 实验方法 | 第28-37页 |
2.6.1 细胞培养 | 第28-29页 |
2.6.2 细胞总蛋白的提取 | 第29页 |
2.6.3 蛋白定量 | 第29-30页 |
2.6.5 蛋白免疫印记(western blot) | 第30-33页 |
2.6.6 CCK-8 法检测细胞活力 | 第33页 |
2.6.7 iTRQ 实验 | 第33-36页 |
2.6.8 统计分析 | 第36-37页 |
第3章 实验结果 | 第37-70页 |
第一部分 SEP15在内质网应激中表达变化及其功能研究 | 第37-51页 |
3.1 SEP15在衣霉素(TM)诱导的内质网应激下的表达变化 | 第37-44页 |
3.1.1 Tm诱导N2a细胞内质网应激下细胞活力的检测 | 第37页 |
3.1.2 Sep15在Tm诱导N2a细胞内质网应激中的表达变化 | 第37-38页 |
3.1.3 Tm诱导N2a细胞内质网应激水平的检测 | 第38-44页 |
3.2 SEP15在二硫苏糖醇(DTT)诱导的内质网应激中的表达变化 | 第44-49页 |
3.2.1 二硫苏糖醇(DTT)诱导N2a细胞内质网应激下细胞活力的检测 | 第44页 |
3.2.2 二硫苏糖醇(DTT)诱导N2a细胞内质网应激中Sep15水平的检测 | 第44-45页 |
3.2.3 二硫苏糖醇(DTT)诱导N2a细胞内质网应激水平的检测 | 第45-49页 |
3.3 SEP15在AΒ 诱导的疾病模型中的表达变化 | 第49-51页 |
3.3.1 Aβ1-42 处理N2a细胞后活力的检测 | 第49页 |
3.3.2 Aβ 诱导的疾病模型中Sep15的表达变化 | 第49-50页 |
3.3.3 Aβ 诱导N2a细胞内质网应激水平的检测 | 第50-51页 |
第二部分 不同内质网应激下的差异蛋白组学研究 | 第51-70页 |
3.1 SDS-PAGE考马斯亮蓝染色 | 第51-52页 |
3.2 高效液相色谱分离肽段 | 第52-53页 |
3.3 N2a细胞诱导不同内质网应激下的差异蛋白质鉴定结果 | 第53-70页 |
3.3.1 N2a细胞在Tm和DTT诱导内质网应激下的差异蛋白分析 | 第53-54页 |
3.3.2 共同差异蛋白的生物信息学分析 | 第54-55页 |
3.3.2.1 趋势相同的共同差异蛋白的信号通路分析 | 第54-55页 |
3.3.3 仅在Tm处理中的差异蛋白生物信息学分析 | 第55-61页 |
3.3.4 仅在DTT处理中的差异蛋白生物信息学分析 | 第61-70页 |
第4章 讨论 | 第70-78页 |
4.1 SEP15在内质网应激中的功能探究 | 第70-73页 |
4.2 TM和DTT诱导的内质网应激中差异蛋白质组研究 | 第73-78页 |
第5章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
附录 | 第84-108页 |
1.TM和DTT处理N2a细胞的共同差异蛋白及其相关信息(趋势相同) | 第84-85页 |
2.TM和DTT处理N2a细胞的共同差异蛋白及其相关信息(趋势不同) | 第85-86页 |
3.仅在TM处理的N2a细胞中的差异蛋白及其相关信息 | 第86-98页 |
4.仅在DTT处理的N2a细胞中的差异蛋白及其相关信息 | 第98-106页 |
5.DTT中骨架相关蛋白 | 第106页 |
6.DTT中钙结合蛋白 | 第106-107页 |
7.DTT细胞周期相关蛋白 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第109页 |