| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 石油污染土壤情况概述 | 第15页 |
| 1.1.1 石油污染土壤现状 | 第15页 |
| 1.1.2 石油污染土壤的危害 | 第15页 |
| 1.2 石油污染土壤修复方法 | 第15-16页 |
| 1.3 石油污染土壤修复植物的筛选 | 第16-18页 |
| 1.3.1 石油污染土壤对植物生长的影响 | 第16-17页 |
| 1.3.2 石油污染土壤的花卉植物修复研究 | 第17页 |
| 1.3.3 土壤的石油污染与植物耐受性 | 第17-18页 |
| 1.4 植物抗逆机制 | 第18-22页 |
| 1.4.1 植物细胞壁与抗逆机制 | 第19-20页 |
| 1.4.2 内切β甘露聚糖酶(edMAN) | 第20-22页 |
| 1.5 半定量与实时荧光定量 | 第22-23页 |
| 1.6 融合报告基因载体与亚细胞定位 | 第23-24页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 紫茉莉内切β甘露聚糖酶基因在转录水平的表达规律分析 | 第25-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 紫茉莉根中总RNA提取 | 第26页 |
| 2.2.2 RNA凝胶电泳检测 | 第26页 |
| 2.2.3 RNA反转录获得第一链cDNA | 第26-27页 |
| 2.2.4 实时荧光定量引物设计 | 第27页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.3.1 紫茉莉根总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.3.2 石油污染土壤中紫茉莉内切β甘露聚糖酶基因实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第30-31页 |
| 第三章 紫茉莉内切β甘露聚糖酶基因的克隆、生物信息学分析及亚细胞定位 | 第31-53页 |
| 3.1 试验材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 菌株及载体 | 第31页 |
| 3.1.2 克隆所需酶及试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.3 克隆所需培养基 | 第32页 |
| 3.1.4 克隆所需主要仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.5 所用生物学软件 | 第33页 |
| 3.1.6 亚细胞定位试验材料 | 第33页 |
| 3.1.7 亚细胞定位试验试剂 | 第33页 |
| 3.1.8 试验所用主要仪器 | 第33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-40页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第33-34页 |
| 3.2.2 紫茉莉内切β甘露聚糖酶(edMAN)基因克隆 | 第34页 |
| 3.2.3 目的基因胶回收与TA克隆载体连接转化筛选 | 第34-35页 |
| 3.2.4 菌落PCR鉴定 | 第35页 |
| 3.2.5 紫茉莉内切β甘露聚糖酶基因序列获得 | 第35页 |
| 3.2.6 紫茉莉内切β甘露聚糖酶蛋白质二级结构和结构域的预测 | 第35-36页 |
| 3.2.7 紫茉莉内切β甘露聚糖酶亚细胞定位的预测 | 第36页 |
| 3.2.8 紫茉莉内切β甘露聚糖酶同源性进化树构建 | 第36页 |
| 3.2.9 重组植物表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.10 pCAMBIA1303-Localization edMAN重组体转化到大肠杆菌(E.coli)菌株DH5α | 第38页 |
| 3.2.11 菌落PCR鉴定 | 第38页 |
| 3.2.12 双酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.2.13 叶盘法转化烟草GUS融合基因pCAMBIA1303::edMAN活性检测 | 第38-39页 |
| 3.2.14 基因枪法pCAMBIA1303::edMAN基因洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第39-40页 |
| 3.3 结果分析 | 第40-51页 |
| 3.3.1 无酶切位点紫茉莉内切β甘露聚糖酶(edMAN)基因克隆 | 第40-41页 |
| 3.3.2 紫茉莉内切β甘露聚糖酶编码区blast比对 | 第41-42页 |
| 3.3.3 不同物种中内切β甘露聚糖酶基因和氨基酸序列的比对及同源性分析 | 第42-44页 |
| 3.3.4 紫茉莉内切β甘露聚糖酶蛋白质二级结构预测 | 第44-45页 |
| 3.3.5 在内切β甘露聚糖酶结构域和亚细胞定位预测 | 第45-47页 |
| 3.3.6 Localization edMAN基因克隆 | 第47-48页 |
| 3.3.7 PMD18T-localization edMAN、pCAMBIA1303双酶切 | 第48-49页 |
| 3.3.8 叶盘法pCAMBIA1303::edMAN基因转化烟草GUS报告基因瞬时表达检测 | 第49页 |
| 3.3.9 基因枪法pCAMBIA1303::edMAN基因洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第51-53页 |
| 第四章 甘露寡糖信号对于石油污染土壤中紫茉莉耐受性的影响 | 第53-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第54页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第54-55页 |
| 4.2 结果与分析 | 第55-73页 |
| 4.2.1 不同石油污染浓度不同处理下可溶性蛋白含量 | 第55-58页 |
| 4.2.2 不同石油污染浓度不同处理下丙二醛(MDA)含量 | 第58-62页 |
| 4.2.3 不同石油污染浓度不同处理下过氧化物酶(POD)含量 | 第62-64页 |
| 4.2.4 不同石油污染浓度不同处理下超氧化物酶(SOD)含量 | 第64-67页 |
| 4.2.5 不同石油污染浓度不同处理下过氧化氢酶(CAT)含量 | 第67-70页 |
| 4.2.6 不同石油污染浓度不同处理下紫茉莉内切β甘露聚糖酶(edMAN)酶活 | 第70-73页 |
| 4.3 讨论与小结 | 第73-75页 |
| 第五章 结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
