| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-17页 |
| 1 绪论 | 第17-29页 |
| 1.1 多发性骨髓瘤 | 第17-18页 |
| 1.2 免疫调节药物的发展 | 第18-19页 |
| 1.3 免疫调节药物治疗多发性骨髓瘤的分子机理 | 第19-21页 |
| 1.4 CRL4泛素连接酶 | 第21-23页 |
| 1.5 CRLs泛素连接酶的调控 | 第23页 |
| 1.6 c-Ab1非受体酪氨酸激酶 | 第23-26页 |
| 1.7 CRISPR-Cas9基因编辑技术 | 第26-27页 |
| 1.8 本课题拟解决的科学问题 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-63页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-40页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.3 抗体 | 第31-32页 |
| 2.1.4 质粒和细菌 | 第32-33页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.6 常用溶液的配制 | 第34-39页 |
| 2.1.7 引物序列 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-63页 |
| 2.2.1 基因表达载体的构建 | 第40页 |
| 2.2.2 点突变质粒的构建 | 第40-42页 |
| 2.2.3 细胞培养常用技术 | 第42-43页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第43-44页 |
| 2.2.5 RNAi技术 | 第44页 |
| 2.2.6 细胞中总蛋白的提取及浓度测定 | 第44-46页 |
| 2.2.7 组蛋白提取 | 第46页 |
| 2.2.8 提取HeLa细胞的细胞质与细胞核蛋白(Fractions) | 第46-47页 |
| 2.2.9 蛋白质免疫共沉淀技术(Co-IP) | 第47-48页 |
| 2.2.10 蛋白质印记(Western Blot) | 第48-49页 |
| 2.2.11 蛋白降解实验及其定量 | 第49-50页 |
| 2.2.12 病毒包装及稳定细胞系构建 | 第50-51页 |
| 2.2.13 细胞中总RNA的提取 | 第51-52页 |
| 2.2.14 总RNA逆转录反应 | 第52页 |
| 2.2.15 Q-PCR(荧光定量PCR)反应 | 第52-53页 |
| 2.2.16 琼脂糖凝胶核酸电泳 | 第53-54页 |
| 2.2.17 质粒大量抽提 | 第54-56页 |
| 2.2.18 质粒小量抽提(Axygen plasmid Miniprep kit) | 第56-58页 |
| 2.2.19 PCR产物直接回收DNA(Axygen Cleanup kit) | 第58-59页 |
| 2.2.20 DNA凝胶回收(Axygen DNA Gel extraction kit) | 第59-61页 |
| 2.2.21 统计学处理 | 第61-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-86页 |
| 3.1 抑制骨髓瘤细胞c-Abl激酶活性会使细胞对来那度胺不敏感 | 第63-65页 |
| 3.2 激活c-Abl激酶可以增强来那度胺的骨髓瘤细胞毒性 | 第65-67页 |
| 3.3 激活c-Abl激酶可以增强来那度胺诱导的CRLA底物的降解 | 第67-74页 |
| 3.4 c-Abl激酶磷酸化DDB1促进DDA1蛋白的招募 | 第74-76页 |
| 3.5 来那度胺诱导的IKZF3蛋白的降解需要DDB1招募DDA1 | 第76-78页 |
| 3.6 来那度胺联合LBH589或地塞米松治疗多发性骨髓瘤的分子机制 | 第78-79页 |
| 3.7 c-Abl激酶增强CRL4底物的泛素化 | 第79-80页 |
| 3.8 c-Abl激酶增加Cul4A的neddylation水平 | 第80-82页 |
| 3.9 c-Abl影响Cul4A-DDB1与CSN的相互作用 | 第82-84页 |
| 3.10 DDA1蛋白不利于CSN5与DDB1相互作用 | 第84-86页 |
| 4 结论及意义 | 第86-87页 |
| 5 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-99页 |
| 作者简介 | 第99页 |
