| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 RV概述 | 第11-18页 |
| 1.1.1 Po RV的病毒体形态 | 第11页 |
| 1.1.2 Po RV的群分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 Po RV的理化及培养特性 | 第12页 |
| 1.1.4 Po RV的基因组结构 | 第12页 |
| 1.1.5 Po RV结构蛋白及功能 | 第12-13页 |
| 1.1.6 Po RV非结构蛋白及功能 | 第13-14页 |
| 1.1.7 RV的特征和致病机理 | 第14-15页 |
| 1.1.8 Po RV流行现状 | 第15-16页 |
| 1.1.9 Po RV的诊断 | 第16-17页 |
| 1.1.10 Po RV的预防及控制 | 第17-18页 |
| 1.2 抗原表位研究方法 | 第18-19页 |
| 1.2.1 B细胞抗原表位鉴定的方法概况 | 第18-19页 |
| 1.2.2 T细胞抗原表位研究方法概况 | 第19页 |
| 1.3 研究意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第21-24页 |
| 2.2.2 表达及鉴定重组蛋白 | 第24-26页 |
| 2.2.3 单克隆抗体的制备 | 第26-29页 |
| 2.2.4 单克隆抗体的鉴定 | 第29页 |
| 2.2.5 蛋白的抗原表位鉴定 | 第29-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-42页 |
| 3.1 目的基因的克隆 | 第32-33页 |
| 3.1.1 NSP3与NSP5基因的扩增 | 第32页 |
| 3.1.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2 重组蛋白的表达与鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.1 重组质粒的原核表达及SDS-PAGE检测 | 第33页 |
| 3.2.2 重组蛋白的纯化 | 第33页 |
| 3.2.3 重组蛋白的Western blot分析 | 第33-34页 |
| 3.3 MABS的制备 | 第34-36页 |
| 3.3.1 间接ELISA检测方法的建立 | 第34-35页 |
| 3.3.2 MAb的建立 | 第35页 |
| 3.3.3 亚型鉴定及抗体效价测定 | 第35-36页 |
| 3.4 MABS的鉴定 | 第36-38页 |
| 3.4.1 Western blot鉴定 | 第36页 |
| 3.4.2 IFA鉴定 | 第36-38页 |
| 3.5 抗原表位的鉴定 | 第38-42页 |
| 3.5.1 NSP3和NSP5蛋白特性分析 | 第38页 |
| 3.5.2 抗原表位的初步鉴定 | 第38-39页 |
| 3.5.3 抗原表位的精确鉴定 | 第39-40页 |
| 3.5.4 抗原表位保守性分析 | 第40-42页 |
| 4.讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 基因的克隆和蛋白的表达 | 第42页 |
| 4.2 MABS的制备及其鉴定 | 第42-43页 |
| 4.3 抗原表位的鉴定 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第54页 |