摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-13页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
1.1.蹄疫病毒的分子生物学 | 第13-21页 |
1.1.1.蹄疫病毒与.蹄疫 | 第13页 |
1.1.2.蹄疫病毒基因组的结构 | 第13-14页 |
1.1.3.蹄疫病毒编码的结构蛋白 | 第14-15页 |
1.1.4.蹄疫病毒编码的非结构蛋白 | 第15-16页 |
1.1.5.蹄疫病毒基因组的非编码区 | 第16页 |
1.1.6 蛋白相互作用的研究方法 | 第16-21页 |
1.2 微RNA病毒的复制复合物 | 第21-25页 |
1.2.1 微RNA病毒的生命周期 | 第21-23页 |
1.2.2 微RNA病毒复制复合物的研究 | 第23-24页 |
1.2.3 存在的问题和假说 | 第24-25页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
第二章 .蹄疫病毒感染细胞中PI4KB招募以及 3A-3DPOL-PI4KB复制复合物的形成 | 第26-49页 |
2.1 材料和方法 | 第27-33页 |
2.1.1 载体、细胞、毒株、生化试剂以及抗体 | 第27-28页 |
2.1.2 仪器设备 | 第28页 |
2.1.3 试剂及溶液的配制 | 第28-29页 |
2.1.4 RNA的提取及其反转录 | 第29页 |
2.1.5 质粒的构建 | 第29-30页 |
2.1.6 蛋白在细菌细胞的表达 | 第30-31页 |
2.1.7 细胞的转染 | 第31页 |
2.1.8 病毒接种及细胞处理 | 第31页 |
2.1.9 病毒TCID50的 测定 | 第31页 |
2.1.10 Western blot检 测 | 第31-32页 |
2.1.11 GST pulldown | 第32页 |
2.1.12免疫共沉淀 | 第32页 |
2.1.13激光共聚焦 | 第32页 |
2.1.14 Real-time RT-PCR | 第32-33页 |
2.1.15 RNA干扰 | 第33页 |
2.1.16数据分析 | 第33页 |
2.2 结果 | 第33-46页 |
2.2.1 沉默PI4KB抑制 3A蛋白的表达以及FMDV的复制 | 第33-34页 |
2.2.2 过表达PI4KB促进 3A蛋白的表达以及FMDV的复制 | 第34-35页 |
2.2.3 FMDV 3A间接招募PI4KB到达病毒复制位点 | 第35-36页 |
2.2.4 FMDV的复制不依赖于细胞蛋白GBF1 | 第36-37页 |
2.2.5 FMDV 3A蛋白与细胞蛋白ACBD3相互作用 | 第37-38页 |
2.2.6 ACBD3与细胞蛋白PI4KB共定位 | 第38-40页 |
2.2.7 ACBD3的GOLD结构域介导其与FMDV 3A与PI4KB的相互作用 | 第40-41页 |
2.2.8 FMDV 3A竞争性结合ACBD3 | 第41页 |
2.2.9 ACBD3对于FMDV 3A招募PI4KB到达病毒复制位点是非必需的 | 第41-42页 |
2.2.10 ACBD3不是FMDV复制必需的细胞蛋白 | 第42-44页 |
2.2.11 FMDV 3Dpol是PI4KB相互作用蛋白 | 第44-45页 |
2.2.12 FMDV 3Dpol与内源性PI4KB共定位于病毒复制位点 | 第45页 |
2.2.13在FMDV复合物位点 3A-3Dpol-PI4KB复合物的形成 | 第45-46页 |
2.3 讨论 | 第46-49页 |
第三章 全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简历 | 第58页 |