| 摘要 | 第6-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-28页 |
| 1.1 植物开花研究进展 | 第16-21页 |
| 1.1.1 春化途径和自主途径调控开花 | 第16-17页 |
| 1.1.2 光周期和赤霉素对开花的影响 | 第17-19页 |
| 1.1.3 温度对植物开花的影响 | 第19-21页 |
| 1.2 MADS-box蛋白家族 | 第21页 |
| 1.3 花器官发育模型 | 第21-22页 |
| 1.4 AGL6-Like基因研究进展 | 第22-24页 |
| 1.5 AGL15-Like基因研究进展 | 第24-26页 |
| 1.6 蛋白相互作用研究方法 | 第26-27页 |
| 1.6.1 酵母双杂交 | 第26页 |
| 1.6.2 双分子荧光互补技术(BiFC) | 第26-27页 |
| 1.7 DNA与蛋白互作研究方法 | 第27-28页 |
| 1.7.1 酵母单杂交技术 | 第27页 |
| 1.7.2 双萤光素酶法 | 第27-28页 |
| 第二章引言 | 第28-29页 |
| 第三章 芥菜AGL6、AGL15及AGL15启动子的克隆及生物分析 | 第29-59页 |
| 3.1 材料 | 第29页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 菌种及载体 | 第29页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第29页 |
| 3.1.4 主要试验仪器 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-42页 |
| 3.2.1 试验试剂的配制 | 第29-30页 |
| 3.2.2 总RNA提取(TRIZOL? Reagent) | 第30页 |
| 3.2.3 总RNA的反转录 | 第30-32页 |
| 3.2.4 芥菜基因组DNA的提取 | 第32页 |
| 3.2.5 PCR目的条带的回收(OMEGA Gel Extraction kit) | 第32-33页 |
| 3.2.6 质粒提取(OMEGA Plasmid Mini Kit) | 第33-34页 |
| 3.2.7 阳性克隆的确定 | 第34-35页 |
| 3.2.8 引物设计 | 第35页 |
| 3.2.9 芥菜AGL6、AGL15的cDNA与DNA特异性PCR扩增 | 第35-38页 |
| 3.2.10 芥菜AGL15启动子克隆 | 第38-42页 |
| 3.2.11 生物信息学分析 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-59页 |
| 3.3.1 芥菜总RNA和DNA的提取 | 第42-43页 |
| 3.3.2 芥菜AGL6、AGL15的cDNA克隆 | 第43-44页 |
| 3.3.3 芥菜AGL6、AGL15的DNA克隆 | 第44-45页 |
| 3.3.4 芥菜AGL6的序列分析 | 第45-51页 |
| 3.3.5 芥菜AGL15的序列分析 | 第51-56页 |
| 3.3.6 AGL15启动子的克隆 | 第56-57页 |
| 3.3.7 AGL15启动子的分析 | 第57-59页 |
| 第四章 芥菜AGL6、AGL15蛋白与SOC1、AGL24、SVP的蛋白互作研究 | 第59-85页 |
| 4.1 材料 | 第59页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第59页 |
| 4.1.2 菌种及载体 | 第59页 |
| 4.1.3 试验试剂 | 第59页 |
| 4.1.4 试验仪器 | 第59页 |
| 4.2 试验方法 | 第59-69页 |
| 4.2.1 试验试剂的配制 | 第59-64页 |
| 4.2.2 酵母双杂交检测 AGL6、AGL15 与 SOC1、SVP、AGL24 蛋白互作 | 第64-67页 |
| 4.2.3 BiFC检测AGL6、AGL15与SOC1、SVP、AGL24蛋白互作 | 第67-69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-85页 |
| 4.3.1 酵母表达载体的构建 | 第69-70页 |
| 4.3.2 酵母重组质粒的自激活及毒性检测 | 第70-72页 |
| 4.3.3 BiFC重组质粒的构建 | 第72-73页 |
| 4.3.4 酵母双杂交鉴定蛋白相互作用 | 第73-76页 |
| 4.3.5 BiFC鉴定蛋白间的相互作用 | 第76-85页 |
| 第五章 芥菜AGL6氨基酸敲除突变体与SOC1、AGL24、SVP的蛋白互作研究 | 第85-99页 |
| 5.1 材料 | 第85页 |
| 5.2 方法 | 第85-89页 |
| 5.2.1 试验试剂的配制 | 第85页 |
| 5.2.2 AGL6蛋白相互作用位点的预测 | 第85-86页 |
| 5.2.3 AGL6基因突变体的引物设计 | 第86页 |
| 5.2.4 AGL6基因突变体构建 | 第86-87页 |
| 5.2.5 AGL6突变体的酵母表达载体的构建 | 第87页 |
| 5.2.6 AGL6突变体的BiFC载体的构建 | 第87-88页 |
| 5.2.7 蛋白互作检测 | 第88-89页 |
| 5.3 结果与分析 | 第89-99页 |
| 5.3.1 AGL6突变体的构建 | 第89页 |
| 5.3.2 AGL6氨基酸敲除突变载体构建 | 第89-92页 |
| 5.3.3 AGL6氨基酸敲除突变体与SOC1、AGL24、SVP的互作 | 第92-99页 |
| 第六章 芥菜AGL15氨基酸敲除突变体与AGL24的蛋白互作 | 第99-111页 |
| 6.1 材料 | 第99页 |
| 6.2 方法 | 第99-102页 |
| 6.2.1 试验试剂的配制 | 第99页 |
| 6.2.2 AGL15蛋白互作位点的预测 | 第99页 |
| 6.2.3 AGL15氨基酸敲除突变体引物设计 | 第99-100页 |
| 6.2.4 AGL15突变体酵母和BiFC重组质粒的构建 | 第100-101页 |
| 6.2.5 AGL6突变体蛋白互作 | 第101-102页 |
| 6.3 结果与分析 | 第102-111页 |
| 6.3.1 AGL15突变体的酵母表达质粒的构建 | 第102-104页 |
| 6.3.2 AGL15突变体的BiFC重组质粒的构建 | 第104页 |
| 6.3.3 蛋白互作鉴定 | 第104-111页 |
| 第七章 芥菜AGL15启动子与SOC1、AGL24、AGL6、AGL15蛋白的相互作用 | 第111-122页 |
| 7.1 材料 | 第111页 |
| 7.1.1 菌株与载体 | 第111页 |
| 7.1.2 试验试剂 | 第111页 |
| 7.1.3 试验仪器 | 第111页 |
| 7.2 试验方法 | 第111-116页 |
| 7.2.1 试验试剂的配制 | 第111页 |
| 7.2.2 AGL15启动子表达载体的构建 | 第111-113页 |
| 7.2.3 酵母单杂交检测AGL15启动子与SOC1、AGL24、AGL15、AGL6蛋白互作 | 第113-114页 |
| 7.2.4 双萤光素酶检测AGL15启动子与SOC1、AGL24、AGL15、AGL6蛋白互作 | 第114-116页 |
| 7.3 结果与分析 | 第116-122页 |
| 7.3.1 酵母单杂交表达载体的构建 | 第116页 |
| 7.3.2 双萤光素表达载体构建 | 第116-117页 |
| 7.3.3 AGL15启动子与SOC1、AGL24、AGL15、AGL6蛋白的相互作用 | 第117-122页 |
| 第八章 讨论 | 第122-124页 |
| 第九章 结论 | 第124-126页 |
| 9.1 成功克隆芥菜AGL6、AGL15基因 | 第124页 |
| 9.2 获得芥菜AGL15的启动子 | 第124页 |
| 9.3 芥菜AGL6能与SOC1、AGL24、SVP蛋白互作 | 第124页 |
| 9.4 芥菜AGL15不能与SOC1、SVP、AGL6互作，能与AGL24互作 | 第124页 |
| 9.5 芥菜AGL6氨基酸敲除突变体与SOC1、AGL24、SVP互作鉴定 | 第124-125页 |
| 9.6 芥菜AGL15氨基酸敲除突变体与AGL24蛋白的相互鉴定 | 第125页 |
| 9.7 芥菜AGL15启动子能与蛋白SOC1、AGL24、AGL15蛋白互作 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-140页 |
| 附录 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 项目资助 | 第143-144页 |
| 在校期间发表学术论文 | 第144页 |
