摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-29页 |
1.1 甲壳动物养殖现状 | 第11-12页 |
1.1.1 养殖产业的迅速发展 | 第11页 |
1.1.2 养殖病害的频繁发生 | 第11-12页 |
1.2 甲壳动物免疫防御机制及病害防治 | 第12-20页 |
1.2.1 甲壳动物免疫防御机制 | 第12-19页 |
1.2.2 甲壳动物病害防治的主要措施 | 第19-20页 |
1.3 CpG ODNs作为免疫增强剂的研究现状 | 第20-26页 |
1.3.1 CpG ODNs的发现 | 第20-21页 |
1.3.2 CpG ODNs的分类 | 第21-22页 |
1.3.3 CpG ODNs的作用机制 | 第22-24页 |
1.3.4 CpG ODNs在哺乳动物中的临床应用 | 第24-25页 |
1.3.5 CpG ODNs在水产养殖动物中的应用 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第26-29页 |
第二章 实验材料与方法 | 第29-41页 |
2.1 实验材料 | 第29-33页 |
2.1.1 实验动物、病毒 | 第29页 |
2.1.2 CpG ODNs的合成 | 第29-30页 |
2.1.3 实验用主要仪器 | 第30页 |
2.1.4 实验用主要试剂 | 第30-32页 |
2.1.5 实验用引物 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-41页 |
2.2.1 实验用病毒WSSV的提取 | 第33页 |
2.2.2 RNA干扰实验中EsMyD88基因dsRNA制备 | 第33-34页 |
2.2.3 凡纳滨对虾免疫处理及样品收集 | 第34-35页 |
2.2.4 中华绒螯蟹免疫处理及样品收集 | 第35页 |
2.2.5 凡纳滨对虾体内病毒拷贝数检测 | 第35-36页 |
2.2.6 实验虾蟹的RNA提取、cDNA合成和实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
2.2.7 表面等离子体共振SPR | 第37-38页 |
2.2.8 酶联免疫吸附(ELISA)检测 | 第38页 |
2.2.9 凡纳滨对虾血细胞ROS水平检测(流式细胞术) | 第38-39页 |
2.2.10 凡纳滨对虾血细胞吞噬率检测(流式细胞术) | 第39页 |
2.2.11 中华绒螯蟹血浆SOD活力检测 | 第39-40页 |
2.2.12 中华绒螯蟹血浆CAT活力检测 | 第40页 |
2.2.13 数据统计分析 | 第40-41页 |
第三章 实验结果 | 第41-57页 |
3.1 不同类型CpG ODNs在凡纳滨对虾抗病毒免疫中的作用 | 第41-50页 |
3.1.1 不同类型CpG ODNs的抗病毒效果 | 第41-42页 |
3.1.2 凡纳滨对虾LvTolls对不同类型CpG ODNs的免疫识别作用 | 第42-44页 |
3.1.3 不同类型CpG ODNs激活的下游免疫应答 | 第44-50页 |
3.2 中华绒螯蟹EsMyD88介导的CpG ODNs免疫增强作用 | 第50-57页 |
3.2.1 EsMyD88的干扰效果 | 第50-51页 |
3.2.2 CpG ODNs与EsMyD88 dsRNA共处理后免疫相关基因mRNA时序表达 | 第51-53页 |
3.2.3 CpG ODNs与EsMyD88 dsRNA共处理后下游免疫效应因子含量的变化 | 第53-57页 |
第四章 分析与讨论 | 第57-65页 |
4.1 不同类型CpG ODNs对凡纳滨对虾的免疫激活作用存在差异 | 第57-60页 |
4.2 A型CpG ODNs可能激活对虾IFN system-like抗病毒系统 | 第60-61页 |
4.3 EsMyD88介导CpG ODNs对中华绒螯蟹的免疫激活作用 | 第61-65页 |
第五章 结论与展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简历 | 第78页 |
攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第78页 |