摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-23页 |
1.1 间充质干细胞的概述 | 第9-13页 |
1.1.1 间充质干细胞的定义 | 第9页 |
1.1.2 间充质干细胞的特性 | 第9-10页 |
1.1.3 间充质干细胞的体外多向分化 | 第10-11页 |
1.1.4 间充质干细胞的微环境 | 第11页 |
1.1.5 间充质干细胞在治疗中的应用 | 第11-13页 |
1.2 Oct4基因的简介 | 第13-19页 |
1.2.1 Oct4基因 | 第13-14页 |
1.2.2 Oct4基因内各种调控元件参与其表达调控 | 第14页 |
1.2.3 OCT4在体细胞重编程中的关键作用 | 第14-15页 |
1.2.4 OCT4的功能受到选择性剪切和翻译后修饰的调控 | 第15-16页 |
1.2.5 OCT4在间充质干细胞中的作用 | 第16-18页 |
1.2.6 OCT4在癌症中的作用 | 第18-19页 |
1.3 DNA甲基化的概述 | 第19-23页 |
1.3.1 DNA甲基化的简介 | 第19页 |
1.3.2 DNA甲基化的功能及作用机制 | 第19-20页 |
1.3.3 DNA甲基化的研究方法 | 第20-23页 |
2 材料与方法 | 第23-42页 |
2.1 实验材料 | 第23-28页 |
2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第24-26页 |
2.1.3 溶液配制 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-42页 |
2.2.1 UC-MSCs原代分离 | 第28-29页 |
2.2.2 BM-MSCs原代分离 | 第29-30页 |
2.2.3 UC-MSCs传代培养 | 第30-31页 |
2.2.4 MSCs冻存 | 第31页 |
2.2.5 MSCs解冻复苏 | 第31页 |
2.2.6 其他细胞培养 | 第31页 |
2.2.7 UC-MSCs成骨分化 | 第31-32页 |
2.2.8 茜素红染色 | 第32页 |
2.2.9 ALP染色 | 第32页 |
2.2.10 UC-MSCs成脂分化 | 第32-33页 |
2.2.11 油红O染色 | 第33页 |
2.2.12 流式细胞术 | 第33页 |
2.2.13 细胞总RNA提取 | 第33-34页 |
2.2.14 DNase I处理总RNA | 第34页 |
2.2.15 将处理后的RNA反转录成cDNA | 第34-35页 |
2.2.16 Real-Time PCR | 第35-36页 |
2.2.17 ICC实验 | 第36页 |
2.2.18 基因组DNA提取 | 第36-37页 |
2.2.19 对提取的基因组 DNA 进行化学处理 | 第37页 |
2.2.20 甲基化特异性PCR | 第37-38页 |
2.2.21 DNA琼脂糖凝胶电泳及PCR产物切胶回收 | 第38-39页 |
2.2.22 DNA克隆及测序 | 第39-41页 |
2.2.23 统计学分析 | 第41-42页 |
3 结果 | 第42-52页 |
3.1 UC-MSCs的分离和形态 | 第42-43页 |
3.2 BM-MSCs的分离 | 第43-44页 |
3.3 UC-MSCs的成脂分化 | 第44页 |
3.4 UC-MSCs的成骨分化 | 第44-45页 |
3.5 UC-MSCs的流式细胞术鉴定 | 第45-46页 |
3.6 Real-Time PCR检测Oct4在各种细胞中的表达 | 第46-47页 |
3.7 流式细胞术(FACS)检测Oct4在各种细胞中的表达 | 第47-48页 |
3.8 细胞免疫荧光(ICC)检测Oct4在各种细胞中的表达 | 第48-49页 |
3.9 各种细胞Oct4调控区域的DNA甲基化检测 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-67页 |
在校期间发表论文情况 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |