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在人间充质干细胞及癌细胞内Oct4的表达及其DNA甲基化的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 前言第9-23页
    1.1 间充质干细胞的概述第9-13页
        1.1.1 间充质干细胞的定义第9页
        1.1.2 间充质干细胞的特性第9-10页
        1.1.3 间充质干细胞的体外多向分化第10-11页
        1.1.4 间充质干细胞的微环境第11页
        1.1.5 间充质干细胞在治疗中的应用第11-13页
    1.2 Oct4基因的简介第13-19页
        1.2.1 Oct4基因第13-14页
        1.2.2 Oct4基因内各种调控元件参与其表达调控第14页
        1.2.3 OCT4在体细胞重编程中的关键作用第14-15页
        1.2.4 OCT4的功能受到选择性剪切和翻译后修饰的调控第15-16页
        1.2.5 OCT4在间充质干细胞中的作用第16-18页
        1.2.6 OCT4在癌症中的作用第18-19页
    1.3 DNA甲基化的概述第19-23页
        1.3.1 DNA甲基化的简介第19页
        1.3.2 DNA甲基化的功能及作用机制第19-20页
        1.3.3 DNA甲基化的研究方法第20-23页
2 材料与方法第23-42页
    2.1 实验材料第23-28页
        2.1.1 实验仪器第23-24页
        2.1.2 主要实验试剂第24-26页
        2.1.3 溶液配制第26-28页
    2.2 实验方法第28-42页
        2.2.1 UC-MSCs原代分离第28-29页
        2.2.2 BM-MSCs原代分离第29-30页
        2.2.3 UC-MSCs传代培养第30-31页
        2.2.4 MSCs冻存第31页
        2.2.5 MSCs解冻复苏第31页
        2.2.6 其他细胞培养第31页
        2.2.7 UC-MSCs成骨分化第31-32页
        2.2.8 茜素红染色第32页
        2.2.9 ALP染色第32页
        2.2.10 UC-MSCs成脂分化第32-33页
        2.2.11 油红O染色第33页
        2.2.12 流式细胞术第33页
        2.2.13 细胞总RNA提取第33-34页
        2.2.14 DNase I处理总RNA第34页
        2.2.15 将处理后的RNA反转录成cDNA第34-35页
        2.2.16 Real-Time PCR第35-36页
        2.2.17 ICC实验第36页
        2.2.18 基因组DNA提取第36-37页
        2.2.19 对提取的基因组 DNA 进行化学处理第37页
        2.2.20 甲基化特异性PCR第37-38页
        2.2.21 DNA琼脂糖凝胶电泳及PCR产物切胶回收第38-39页
        2.2.22 DNA克隆及测序第39-41页
        2.2.23 统计学分析第41-42页
3 结果第42-52页
    3.1 UC-MSCs的分离和形态第42-43页
    3.2 BM-MSCs的分离第43-44页
    3.3 UC-MSCs的成脂分化第44页
    3.4 UC-MSCs的成骨分化第44-45页
    3.5 UC-MSCs的流式细胞术鉴定第45-46页
    3.6 Real-Time PCR检测Oct4在各种细胞中的表达第46-47页
    3.7 流式细胞术(FACS)检测Oct4在各种细胞中的表达第47-48页
    3.8 细胞免疫荧光(ICC)检测Oct4在各种细胞中的表达第48-49页
    3.9 各种细胞Oct4调控区域的DNA甲基化检测第49-52页
4 讨论第52-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-67页
在校期间发表论文情况第67-68页
致谢第68页

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