| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 前言 | 第9-23页 |
| 1.1 七星瓢虫及其滞育 | 第9-11页 |
| 1.1.1 七星瓢虫简介 | 第9页 |
| 1.1.2 七星瓢虫滞育 | 第9-11页 |
| 1.2 滞育机理研究的进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 滞育期间昆虫体内化学物质的变化 | 第11-12页 |
| 1.2.2 滞育相关的蜕皮激素受体 | 第12-13页 |
| 1.2.3 热激蛋白与分子伴侣 | 第13页 |
| 1.2.4 滞育相关基因 | 第13-14页 |
| 1.3 SMARTer技术合成cDNA的优越性 | 第14-15页 |
| 1.4 抑制性消减杂交技术的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.4.1 抑制性消减杂交技术原理 | 第15-16页 |
| 1.4.2 抑制性消减杂交技术在昆虫中的应用 | 第16-17页 |
| 1.4.3 抑制性消减杂交技术在昆虫滞育中的应用 | 第17-21页 |
| 1.5 反向Northern斑点杂交 | 第21页 |
| 1.6 研究目的及内容 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 供试虫体 | 第23页 |
| 2.1.2 供试试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 试验仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 抑制性消减杂交文库的构建步骤 | 第25-41页 |
| 2.2.1 滞育与非滞育七星瓢虫RNA提取及优化 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA双链的合成及纯化 | 第26-30页 |
| 2.2.3 双链cDNA的酶切及纯化 | 第30页 |
| 2.2.4 接头连接及其连接效率的检测 | 第30-32页 |
| 2.2.5 两次杂交 | 第32-33页 |
| 2.2.6 两次PCR | 第33-35页 |
| 2.2.7 消减效率检测 | 第35页 |
| 2.2.8 第二次PCR产物的纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.9 载体的连接、转化与克隆 | 第36-37页 |
| 2.2.10 反向Northern斑点杂交探针的制备 | 第37-39页 |
| 2.2.11 反向Northern斑点杂交 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-50页 |
| 3.1 七星瓢虫抑制性消减杂交文库 | 第41-46页 |
| 3.1.1 样品总RNA浓度和完整性的检测 | 第41页 |
| 3.1.2 双链cDNA的合成与酶切效果的检测 | 第41-43页 |
| 3.1.3 正向文库和反向文库消减后第一次PCR和第二次PCR电泳检测 | 第43页 |
| 3.1.4 抑制性消减杂交文库消减效率的检测 | 第43-44页 |
| 3.1.5 抑制性消减杂交文库部分插入片段PCR的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.1.6 反向Northern斑点杂交探针效率的检测 | 第45页 |
| 3.1.7 抑制性消减杂交文库反向Northern杂交结果 | 第45-46页 |
| 3.2 七星瓢虫抑制性消减杂交文库的生物信息学分析 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-58页 |
| 4.1 抗胁迫类基因及分子伴侣 | 第50-51页 |
| 4.2 生殖类基因 | 第51-52页 |
| 4.3 能量代谢与转化类基因 | 第52-53页 |
| 4.4 细胞骨架类基因 | 第53-54页 |
| 4.5 调控基因 | 第54-55页 |
| 4.6 脂质代谢 | 第55页 |
| 4.7 结构性组分基因 | 第55-56页 |
| 4.8 物质转移类基因 | 第56-58页 |
| 5. 全文结论与总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-75页 |
| 作者简介 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
