| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第15-24页 |
| 第一章 卵母细胞体外成熟研究进展 | 第15-20页 |
| 1.1 卵母细胞成熟机制 | 第15-16页 |
| 1.2 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第16-19页 |
| 1.2.1 卵母细胞的来源 | 第16-17页 |
| 1.2.2 卵母细胞体外培养条件 | 第17页 |
| 1.2.3 卵母细胞体外培养体系 | 第17-19页 |
| 1.3 卵母细胞的激活与早期胚胎的发育 | 第19-20页 |
| 第二章 WNT/Frizzleds信号通路及其在卵巢中的作用 | 第20-24页 |
| 2.1 WNT信号通路 | 第20-22页 |
| 2.2 Frizzleds受体家族 | 第22页 |
| 2.3 WNT/Frizzleds信号通路在卵巢中的作用 | 第22-23页 |
| 2.4 Frizzleds受体家族在卵巢中的作用 | 第23页 |
| 2.5 本研究目前存在的主要问题及意义 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-53页 |
| 第三章 Frizzleds家族基因在猪卵巢中的表达规律 | 第24-31页 |
| 3.1 引言 | 第24页 |
| 3.2 试验材料 | 第24-25页 |
| 3.2.1 试验样品采集 | 第24-25页 |
| 3.2.2 主要试验试剂 | 第25页 |
| 3.2.3 主要试验仪器 | 第25页 |
| 3.2.4 主要试剂的配制 | 第25页 |
| 3.3 试验方法 | 第25-28页 |
| 3.3.1 组织样品的收集 | 第25页 |
| 3.3.2 组织中总RNA的提取与纯化 | 第25-26页 |
| 3.3.3 反转录（RT） | 第26-27页 |
| 3.3.4 实时定量PCR分析 | 第27-28页 |
| 3.3.5 统计分析 | 第28页 |
| 3.4 结果与分析 | 第28-29页 |
| 3.4.1 猪卵巢总RNA质量检测 | 第28页 |
| 3.4.2 Frizzled基因家族表达检测 | 第28-29页 |
| 3.4.3 猪卵巢组织中WNT信号受体Frizzleds家族mRNA的相对表达 | 第29页 |
| 3.5 讨论 | 第29-30页 |
| 3.6 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 Frizzled5在不同直径卵泡中表达以及Frizzled5蛋白在卵巢中的定位 | 第31-37页 |
| 4.1 引言 | 第31页 |
| 4.2 试验材料 | 第31-32页 |
| 4.2.1 试验样品的采集 | 第31-32页 |
| 4.2.2 主要试验试剂 | 第32页 |
| 4.2.3 主要试验仪器 | 第32页 |
| 4.3 试验方法 | 第32-33页 |
| 4.3.1 材料收集 | 第32-33页 |
| 4.3.2 猪卵泡总RNA的提取和实时定量PCR | 第33页 |
| 4.3.3 猪卵巢组织免疫组化（IHC） | 第33页 |
| 4.3.4 统计分析 | 第33页 |
| 4.4 结果与分析 | 第33-35页 |
| 4.4.1 猪卵泡总RNA质量检测 | 第33页 |
| 4.4.2 不同直径卵泡中Frizzled5的相对表达分析 | 第33-34页 |
| 4.4.3 Frizzled5蛋白在猪卵巢上的免疫定位 | 第34-35页 |
| 4.5 讨论 | 第35页 |
| 4.6 小结 | 第35-37页 |
| 第五章 Frizzleds受体基因在体外培养的猪卵母细胞中的时序表达 | 第37-46页 |
| 5.1 引言 | 第37-38页 |
| 5.2 试验材料 | 第38-39页 |
| 5.2.1 试验样品的采集 | 第38页 |
| 5.2.2 主要试验试剂 | 第38页 |
| 5.2.3 主要试验仪器 | 第38页 |
| 5.2.4 主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| 5.3 试验方法 | 第39-40页 |
| 5.3.1 猪卵母细胞的收集与培养 | 第39页 |
| 5.3.2 不同时间猪卵母细胞的体外成熟培养 | 第39页 |
| 5.3.3 猪卵母细胞的成熟和孤雌激活后卵裂率的观察 | 第39-40页 |
| 5.3.4 猪卵泡总RNA的提取和实时定量PCR | 第40页 |
| 5.3.5 统计分析方法 | 第40页 |
| 5.4 结果与分析 | 第40-44页 |
| 5.4.1 不同培养时间对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第40-41页 |
| 5.4.2 猪卵母细胞体外成熟培养不同时间卵丘扩散的变化 | 第41-42页 |
| 5.4.3 Frizzleds受体家族在卵母细胞体外成熟中时序表达 | 第42-44页 |
| 5.5 讨论 | 第44-45页 |
| 5.6 小结 | 第45-46页 |
| 第六章 WNT-C59抑制剂对猪卵母细胞体外成熟培养的影响 | 第46-53页 |
| 6.1 引言 | 第46页 |
| 6.2 试验材料 | 第46-47页 |
| 6.2.1 试验样品的采集 | 第46页 |
| 6.2.2 主要试验试剂 | 第46页 |
| 6.2.3 主要试验仪器 | 第46-47页 |
| 6.2.4 主要试剂的配制 | 第47页 |
| 6.3 试验方法 | 第47-48页 |
| 6.3.1 猪卵母细胞的收集及培养 | 第47页 |
| 6.3.2 猪卵母细胞的成熟和孤雌激活后卵裂率的观察 | 第47页 |
| 6.3.3 WNT信号通路受体Frizzled5及关键组分 β-catenin的表达 | 第47-48页 |
| 6.3.4 统计分析 | 第48页 |
| 6.4 结论与分析 | 第48-51页 |
| 6.4.1 不同浓度抑制剂WNT-C59对卵丘细胞扩散的影响 | 第48-49页 |
| 6.4.2 不同浓度抑制剂WNT-C59对卵母细胞成熟的影响 | 第49-50页 |
| 6.4.3 WNT -C59对WNT信号通路受体Frizzled5及 β-catenin在卵母细胞表达的影响 | 第50-51页 |
| 6.5 讨论 | 第51-52页 |
| 6.6 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 缩略词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
