| 英文缩略语表 | 第9-12页 |
| 第一部分 IP-10在甲型H1N1流感病毒诱导的急性肺损伤中致病机理的研究 | 第12-70页 |
| 中文摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 引言 | 第15-18页 |
| 一、实验材料与方法 | 第18-49页 |
| 第一节 甲型H1N1流感病毒的培养、收集和浓缩 | 第18-20页 |
| 1.1 实验材料 | 第18页 |
| 1.1.1 病毒 | 第18页 |
| 1.1.2 动物 | 第18页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第18页 |
| 1.1.4 实验试剂 | 第18页 |
| 1.2 方法 | 第18-20页 |
| 1.2.1 活胚检查 | 第18-19页 |
| 1.2.2 鸡胚尿囊腔接种 | 第19页 |
| 1.2.3 流感病毒的收获 | 第19页 |
| 1.2.4 鸡胚尿囊液中流感病毒的粗离 | 第19页 |
| 1.2.5 超速离心法浓缩流感病毒 | 第19-20页 |
| 第二节 甲型H1N1流感病毒血凝单位及50%培养组织感染剂量(TCID50)的测定 | 第20-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 病毒 | 第20页 |
| 2.1.2 细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 制备1%鸡红细胞悬液 | 第20-21页 |
| 2.2.2 MDCK细胞的培养 | 第21页 |
| 2.2.3 流感病毒的血凝单位测定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 流感病毒TCID50的测定 | 第22页 |
| 第三节 纯合Ip-10基凶敲除小鼠的鉴定 | 第22-26页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第22-23页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第23页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第23页 |
| 3.1.4 主要溶液配方 | 第23-24页 |
| 3.1.5 PCR引物 | 第24页 |
| 3.2 方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 小鼠DNA提取 | 第24-25页 |
| 3.2.2 PCR扩增目的片段 | 第25-26页 |
| 第四节 Ip-10基因敲除小鼠感染甲型H1N1流感病毒后的相关检测 | 第26-33页 |
| 4.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 4.1.1 病毒 | 第26页 |
| 4.1.2 细胞 | 第26页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第26页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 4.1.5 实验试剂 | 第27页 |
| 4.1.6 主要溶液配方 | 第27-28页 |
| 4.1.7 荧光定量PCR引物 | 第28页 |
| 4.2 方法 | 第28-33页 |
| 4.2.1 检测BJ501株感染后小鼠的体重变化和死亡率 | 第28页 |
| 4.2.2 检测BJ501株感染后小鼠肺组织的病理变化 | 第28-29页 |
| 4.2.3 检测BJ501株感染后小鼠肺组织的湿干比 | 第29-30页 |
| 4.2.4 检测BJ501株感染后小鼠肺组织中的病毒滴度 | 第30页 |
| 4.2.5 RT-PCR检测BJ501株感染后小鼠肺组织中的病毒载量 | 第30-33页 |
| 4.2.5.1 小鼠肺组织样品的准备 | 第30-31页 |
| 4.2.5.2 总RNA提取 | 第31-32页 |
| 4.2.5.3 cDNA第一链合成 | 第32页 |
| 4.2.5.4 荧光定量PCR检测 | 第32-33页 |
| 第五节 IP-10在甲型H1N1流感病毒感染诱导的小鼠急性肺损伤中相关信号通路的检测 | 第33-41页 |
| 5.1 实验材料 | 第33-37页 |
| 5.1.1 病毒 | 第33-34页 |
| 5.1.2 实验动物 | 第34页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第34页 |
| 5.1.4 实验试剂 | 第34页 |
| 5.1.5 主要溶液配方 | 第34-36页 |
| 5.1.6 使用的主要抗体 | 第36-37页 |
| 5.2 方法 | 第37-41页 |
| 5.2.1 Pi3k基因敲除小鼠感染甲型H1N1流感病毒后的相关检测 | 第37-39页 |
| 5.2.1.1 检测BJ501株感染后小鼠的体重变化和死亡率 | 第37页 |
| 5.2.1.2 检测BJ501株感染后小鼠肺组织的病理变化 | 第37-38页 |
| 5.2.1.3 检测BJ501株感染后小鼠肺组织的湿干比 | 第38-39页 |
| 5.2.2 Western blot检测BJ501株感染后小鼠肺组织中相关蛋白表达水平的变化 | 第39-41页 |
| 5.2.2.1 小鼠肺组织样品的制备 | 第39页 |
| 5.2.2.2 BCA蛋白质定量试剂盒检测蛋白浓度 | 第39-40页 |
| 5.2.2.3 Western blot检测 | 第40-41页 |
| 5.2.2.4 Western blot结果定量分析 | 第41页 |
| 第六节 IP-10单克隆抗体治疗甲型H1N1流感病毒感染小鼠的相关检测 | 第41-49页 |
| 6.1 实验材料 | 第42页 |
| 6.1.1 病毒 | 第42页 |
| 6.1.2 实验动物 | 第42页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第42页 |
| 6.1.4 实验试剂 | 第42页 |
| 6.2 方法 | 第42-49页 |
| 6.2.1 检测IP-10单克隆抗体治疗BJ501株感染小鼠的死亡率 | 第42-43页 |
| 6.2.2 检测IP-10单克隆抗体治疗BJ501株感染小鼠的肺组织的病理变化 | 第43-44页 |
| 6.2.3 检测IP-10单克隆抗体治疗BJ501株感染小鼠的肺组织的湿干比 | 第44-45页 |
| 6.2.4 检测IP-10单克隆抗体治疗BJ501株感染小鼠的支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平 | 第45-49页 |
| 6.2.4.1 小鼠支气管肺泡灌洗液样品的制备 | 第45页 |
| 6.2.4.2 ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液中IP-10的水平 | 第45-46页 |
| 6.2.4.3 Bio-Plex Pro~(TM) Assays检测小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子的水平 | 第46-49页 |
| 二、实验结果 | 第49-67页 |
| 第一节 血凝单位及TCID50测定 | 第49页 |
| 1.1 甲型H1N1流感病毒血凝单位的测定结果 | 第49页 |
| 1.2 甲型H1N1流感病毒TCID50的测定结果 | 第49页 |
| 第二节 纯合Ip-10基因敲除小鼠的鉴定 | 第49-50页 |
| 2.1 纯合Ip-10基因敲除小鼠的鉴定结果 | 第49-50页 |
| 第三节 Ip-10基因敲除小鼠感染2009甲型H1N1流感病毒后的相关检测 | 第50-55页 |
| 3.1 敲除Ip-10基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠死亡和体重下降 | 第50-52页 |
| 3.1.1 Ip-10KO小鼠死亡率显著低于野生型对照小鼠 | 第50-51页 |
| 3.1.2 Ip-10KO小鼠体重下降程度显著低于野生型对照小鼠 | 第51-52页 |
| 3.2 敲除Ip-10基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部病理炎症程度 | 第52页 |
| 3.3 敲除Ip-10基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部水肿程度 | 第52-53页 |
| 3.4 敲除Ip-10基因可以有效降低小鼠肺组织中BJ501株的病毒滴度 | 第53-55页 |
| 第四节 IP-10在甲型H1N1流感病毒感染诱导的小鼠急性肺损伤中相关信号通路的检测 | 第55-61页 |
| 4.1 PI3K-Akt-p38-ATF2信号通路在IP-10的下游发挥重要作用 | 第55-59页 |
| 4.1.1 敲除Pi3k基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠死亡和体重下降 | 第55-57页 |
| 4.1.1.1 Pi3k KO小鼠死亡率显著低于野生型对照小鼠 | 第55-56页 |
| 4.1.1.2 Pi3k KO小鼠体重下降程度显著低于野生型对照小鼠 | 第56-57页 |
| 4.1.2 敲除Pi3k基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部病理炎症程度 | 第57页 |
| 4.1.3 敲除Pi3k基因可以有效缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部水肿程度 | 第57-58页 |
| 4.1.4 Akt-p38-ATF2信号通路在IP-10的下游被激活 | 第58-59页 |
| 4.2 JNK/MAPK信号通路在IP-10的下游发挥重要作用 | 第59-60页 |
| 4.3 ERK/MAPK信号通路未参与到IP-10的下游 | 第60页 |
| 4.4 IP-10下游的信号通路模式图 | 第60-61页 |
| 第五节 IP-10单克隆抗体治疗2009甲型H1N1流感病毒感染小鼠的相关检测 | 第61-67页 |
| 5.1 IP-10单克隆抗体可以缓解BJ501株感染引起的小鼠死亡 | 第61-62页 |
| 5.2 IP-10单克隆抗体可以缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部病理炎症程度 | 第62-63页 |
| 5.3 IP-10单克隆抗体可以缓解BJ501株感染引起的小鼠肺部水肿程度 | 第63页 |
| 5.4 IP-10单克隆抗体可以降低BJ501株感染小鼠肺中细胞因子的分泌 | 第63-67页 |
| 三、结论 | 第67-68页 |
| 四、讨论 | 第68-70页 |
| 第二部分 细胞因子风暴与H7N9禽流感病人预后的相关研究 | 第70-98页 |
| 中文摘要 | 第71-72页 |
| Abstract | 第72-73页 |
| 引言 | 第73-75页 |
| 一、实验材料与方法 | 第75-81页 |
| 1 实验材料 | 第75页 |
| 1.1 实验仪器 | 第75页 |
| 1.2 实验试剂 | 第75页 |
| 2 方法 | 第75-81页 |
| 2.1 H7N9禽流感病毒感染患者的招募 | 第75-77页 |
| 2.1.1 H7N9禽流感病毒感染患者的入组标准和遴选过程 | 第75-76页 |
| 2.1.2 入组的H7N9禽流感病毒感染患者的基本临床信息 | 第76-77页 |
| 2.2 甲型H1N1流感病人和健康志愿者的招募 | 第77-78页 |
| 2.3 Bio-Plex Pro~(TM) Assays测定H7N9禽流感患者血浆中细胞因子的水平 | 第78-81页 |
| 二、实验结果 | 第81-95页 |
| 1. H7N9禽流感病毒感染的病人血浆中出现细胞因子风暴 | 第81-86页 |
| 2. H7N9病人和H5N1、猪流感以及SARS病人血浆中细胞因子水平的比较 | 第86-87页 |
| 3. H7N9病人血浆中某些细胞因子的水平与病毒载量呈正相关 | 第87-89页 |
| 3. H7N9病人血浆中某些细胞因子的水平与疾病严重程度呈正相关 | 第89-90页 |
| 4. H7N9病人血浆中某些细胞因子的水平与病人的死亡相关 | 第90-95页 |
| 三、结论 | 第95-96页 |
| 四、讨论 | 第96-98页 |
| 综述 | 第98-110页 |
| 参考文献 | 第110-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 个人简历 | 第120-123页 |
