| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 细胞自噬 | 第11页 |
| 1.2 植物细胞自噬的分子机制 | 第11-16页 |
| 1.2.1 参与植物细胞自噬的保守基因 | 第11-13页 |
| 1.2.2 参与细胞自噬的形成的蛋白组分 | 第13-16页 |
| 1.3 植物细胞自噬的生理功能 | 第16-23页 |
| 1.3.1 植物细胞自噬在植物的生长发育中的功能 | 第16-17页 |
| 1.3.2 植物细胞自噬在植物的衰老中的功能 | 第17-18页 |
| 1.3.3 植物细胞自噬在植物响应非生物胁迫中的功能 | 第18-20页 |
| 1.3.4 植物细胞自噬在植物响应生物胁迫中的功能 | 第20-23页 |
| 1.4 GAPDH是重要的多功能蛋白 | 第23-24页 |
| 1.5 植物中GAPDH的功能研究 | 第24-27页 |
| 第2章 材料与方法 | 第27-45页 |
| 2.1 植物材料和生长条件 | 第27页 |
| 2.2 载体构建 | 第27-29页 |
| 2.2.1 功能载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.2 LIC载体构建 | 第28-29页 |
| 2.3 培养基 | 第29页 |
| 2.4 碱裂解法提取质粒 | 第29页 |
| 2.5 植物DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.6 琼脂糖凝胶回收纯化DNA | 第30页 |
| 2.7 大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| 2.8 大肠杆菌的热激转化 | 第30-31页 |
| 2.9 农杆菌GV3101感受态的制备 | 第31页 |
| 2.10 农杆菌感受态的冻融转化 | 第31页 |
| 2.11 免疫杂交 | 第31-32页 |
| 2.12 烟草总蛋白Pull Down及互作蛋白质谱鉴定 | 第32-34页 |
| 2.12.1 烟草总蛋白Pull Down | 第32页 |
| 2.12.2 SDS-PAGE胶蛋白电泳 | 第32页 |
| 2.12.3 银染 | 第32-33页 |
| 2.12.4 胶内酶切 | 第33页 |
| 2.12.5 质谱鉴定分析 | 第33-34页 |
| 2.13 荧光素酶互补实验 | 第34页 |
| 2.14 蛋白表达验证以及免疫共沉淀（Co-IP）实验 | 第34-35页 |
| 2.15 体外互作验证（Pull-down）实验 | 第35-36页 |
| 2.16 双分子荧光互补（BiFC）实验 | 第36页 |
| 2.17 细胞自噬观察 | 第36-37页 |
| 2.17.1 CFP-NbATG8f分子标记观察 | 第36页 |
| 2.17.2 MDC染色 | 第36-37页 |
| 2.17.3 电镜观察 | 第37页 |
| 2.17.4 细胞自噬小体的计数 | 第37页 |
| 2.18 植物RNA提取、反转录PCR和实时定量PCR | 第37-38页 |
| 2.19 MV注射 | 第38页 |
| 2.20 ROS检测 | 第38-39页 |
| 2.20.1 NBT染色 | 第38-39页 |
| 2.20.2 DAB染色 | 第39页 |
| 2.21 病毒诱导基因沉默（VIGS） | 第39页 |
| 2.22 病毒侵染及荧光拍照 | 第39-40页 |
| 2.23 病原菌生长检测 | 第40页 |
| 2.24 细胞死亡实验 | 第40-41页 |
| 2.24.1 细胞死亡诱导 | 第40页 |
| 2.24.2 台盼蓝染色观察 | 第40-41页 |
| 2.25 引物序列 | 第41-45页 |
| 第3章 ATG3体内互作蛋白的筛选 | 第45-50页 |
| 3.1 本章引言 | 第45页 |
| 3.2 结果与分析 | 第45-48页 |
| 3.2.1 ATG3体内互作蛋白筛选与分类 | 第45-47页 |
| 3.2.2 GAPC是ATG3特异的互作蛋白之一 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第4章 ROS负调控GAPCs与ATG3互作 | 第50-62页 |
| 4.1 本章引言 | 第50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-61页 |
| 4.2.1 GAPCs与ATG3均主要定位在胞质 | 第50-51页 |
| 4.2.2 GAPCs与ATG3存在体内互作 | 第51-53页 |
| 4.2.3 GAPCs与ATG3存在体外直接互作 | 第53-54页 |
| 4.2.4 GAPCs与ATG3互作位于胞质中 | 第54-57页 |
| 4.2.5 GAPCs与ATG3互作受ROS负调控 | 第57-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-62页 |
| 第5章 沉默GAPCs激活细胞自噬 | 第62-72页 |
| 5.1 本章引言 | 第62-63页 |
| 5.2 结果分析 | 第63-71页 |
| 5.2.1 本生烟草中沉默GAPCs载体构建和表型观察 | 第63页 |
| 5.2.2 VIGS基因沉默效率检测 | 第63-66页 |
| 5.2.3 在本生烟中沉默GAPCs能够激活细胞自噬 | 第66-69页 |
| 5.2.4 gapc拟南芥突变体中能够观察到细胞自噬激活 | 第69-71页 |
| 5.3 讨论 | 第71-72页 |
| 第6章 GAPCs负调控ATG3以及ROS诱导的细胞自噬 | 第72-82页 |
| 6.1 本章引言 | 第72页 |
| 6.2 结果与分析 | 第72-81页 |
| 6.2.1 过表达ATG3可以激活细胞自噬 | 第72-76页 |
| 6.2.2 过表达GAPCs可以抑制ATG3激活的细胞自噬 | 第76-77页 |
| 6.2.3 过表达GAPCs可以抑制ROS激活的细胞自噬 | 第77-80页 |
| 6.2.4 MV处理不影响ATG3的mRNA水平 | 第80-81页 |
| 6.3 讨论 | 第81-82页 |
| 第7章 GAPCs参与植物免疫反应 | 第82-88页 |
| 7.1 本章引言 | 第82页 |
| 7.2 结果与分析 | 第82-86页 |
| 7.2.1 沉默GAPCs导致N基因介导的本生烟对TMV-GFP抗性增加 | 第82-83页 |
| 7.2.2 沉默GAPCs导致N基因介导的HR细胞死亡加速 | 第83-84页 |
| 7.2.3 沉默GAPCs导致对寄主病原细菌的抗性增加 | 第84页 |
| 7.2.4 沉默GAPCs导致对非寄主病原细菌的抗性增加 | 第84-85页 |
| 7.2.5 沉默GAPCs不影响非寄主抗性导致的细胞死亡 | 第85-86页 |
| 7.3 讨论 | 第86-88页 |
| 第8章 讨论与展望 | 第88-94页 |
| 8.1 讨论 | 第88-93页 |
| 8.1.1 ATG3-GAPCs互作在细胞自噬中的作用 | 第88-91页 |
| 8.1.2 GAPCs在植物抗病性中的作用 | 第91-93页 |
| 8.2 仍待解决的科学问题 | 第93-94页 |
| 第9章 其他研究工作 | 第94-104页 |
| 9.1 本章引言 | 第94页 |
| 9.2 结果与讨论 | 第94-104页 |
| 9.2.1 3IP2s主要定位在胞质 | 第94-96页 |
| 9.2.2 3IP2s能够与ATG3在本生烟草中互作 | 第96-98页 |
| 9.2.3 ATG3与 3IP2s互作位于胞质中 | 第98页 |
| 9.2.4 沉默 3IP2s导致依赖于ATG3的细胞自噬激活 | 第98-100页 |
| 9.2.5 沉默 3IP2s导致叶绿体形态受损 | 第100-101页 |
| 9.2.6 过表达 3IP2s导致叶绿体降解加速 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第115-116页 |
