| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·帕金森疾病 | 第11-16页 |
| ·帕金森疾病概述 | 第11-12页 |
| ·帕金森病致病相关基因 | 第12-16页 |
| ·PARK1和PARK4(SNCA)相关的PD | 第12-13页 |
| ·PARK2(parkin)相关的PD | 第13-14页 |
| ·PARK5(UCHL1)相关的PD | 第14页 |
| ·PARK6(PINK1)相关的PD | 第14页 |
| ·PARK8(LRRK2)相关的PD | 第14-15页 |
| ·PITX3与PD | 第15-16页 |
| ·miRNA的生物学特点与合成机制 | 第16-18页 |
| ·miRNA的基因组织形式 | 第16-17页 |
| ·miRNA合成的一般过程 | 第17-18页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第18-19页 |
| ·miRNA靶位点分析与鉴定 | 第19-21页 |
| ·计算机分析miRNA靶位点的原理与应用 | 第19-21页 |
| ·miRNA靶位点的鉴定 | 第21页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料 | 第22-32页 |
| ·使用的数据库及分析软件 | 第22-23页 |
| ·细胞和质粒 | 第23-26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·试剂与耗材 | 第27-29页 |
| ·引物序列 | 第29-32页 |
| 第三章 实验方法 | 第32-47页 |
| ·调控帕金森疾病相关基因的miRNA预测 | 第32-33页 |
| ·选择帕金森疾病相关基因作为研究对象 | 第32页 |
| ·miRNA靶位点确定 | 第32页 |
| ·预测结果的可靠性分析 | 第32-33页 |
| ·预测结果的实验验证 | 第33-47页 |
| ·miRNA表达载体构建 | 第33-36页 |
| ·构建携带靶基因3'UTR的psicheck-2质粒 | 第36-41页 |
| ·小鼠胚胎神经干细胞(mouse eNPCs)分离、培养与鉴定 | 第41-45页 |
| ·转染mouse eNPC细胞 | 第45页 |
| ·利用双荧光素酶报告系统检测miRNA对携带靶位点序列的荧光素酶报告基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 第四章 结果与分析 | 第47-73页 |
| ·调控帕金森疾病相关基因的miRNA预测 | 第47-55页 |
| ·miRNA靶位点确定 | 第47-53页 |
| ·靶位点保守性分析 | 第53-54页 |
| ·预测结果的可靠性分析 | 第54-55页 |
| ·micro表达载体构建 | 第55-62页 |
| ·miRNA Stem-Loop序列扩增 | 第55页 |
| ·菌落PCR鉴定miRNA表达载体 | 第55-56页 |
| ·miRNA表达载体测序 | 第56-62页 |
| ·携带靶基因3’UTR的psiCHECK-2质粒构建 | 第62-68页 |
| ·小鼠基因组DNA提取 | 第62页 |
| ·靶序列扩增 | 第62-63页 |
| ·双酶切验证阳性psiCHECK-target重组质粒 | 第63-64页 |
| ·阳性克隆测序鉴定 | 第64-68页 |
| ·小鼠胚胎神经干细胞的分离、培养与鉴定 | 第68-71页 |
| ·小鼠胚胎神经干细胞的分离与培养 | 第68-69页 |
| ·小鼠胚胎神经干细胞的鉴定 | 第69-71页 |
| ·报告基因检测 | 第71-73页 |
| 第五章 讨论 | 第73-76页 |
| ·帕金森疾病相关基因可能受到miRNA的复杂调控 | 第73页 |
| ·计算机预测是miRNA功能研究的重要方法 | 第73-74页 |
| ·新的有效的miRNA靶基因鉴定方法对于miRNA功能研究的必要性 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第82页 |
