中文摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 陆栖脊椎动物高原适应研究概况 | 第14-23页 |
1.1 呼吸系统对低氧的适应 | 第15-16页 |
1.1.1 肺通气响应 | 第15-16页 |
1.1.2 肺结构的改变 | 第16页 |
1.2 心脏对低氧的适应 | 第16页 |
1.3 氧运输系统 | 第16-17页 |
1.4 代谢强度和酶活性对低氧的适应 | 第17-18页 |
1.5 低氧响应基因的表达变化及调控 | 第18-23页 |
1.5.1 低氧诱导因子 | 第19-20页 |
1.5.2 血管内皮生长因子 | 第20-22页 |
1.5.3 促红细胞生成素 | 第22页 |
1.5.4 一氧化氮合酶 | 第22-23页 |
第二章 青藏高原沙蜥属蜥蜴研究概况 | 第23-26页 |
2.1 中国沙蜥属研究概述 | 第23-24页 |
2.2 青藏高原沙蜥属蜥蜴研究 | 第24-26页 |
第三章 红尾沙蜥心肺、脉管系统对高海拔低氧的生理适应 | 第26-39页 |
3.1 引言 | 第26页 |
3.2 材料 | 第26-29页 |
3.2.1 样本采集 | 第26-27页 |
3.2.2 主要试剂及配制 | 第27-29页 |
3.3 实验方法 | 第29-31页 |
3.3.1 肺组织显微结构 | 第29页 |
3.3.2 心肌和骨骼肌毛细血管密度 | 第29-30页 |
3.3.3 数据分析 | 第30-31页 |
3.4 实验结果 | 第31-37页 |
3.4.1 心肺重量和心肺重量与体重比 | 第31-32页 |
3.4.2 肺组织显微结构观察 | 第32-34页 |
3.4.3 心肌毛细血管密度 | 第34页 |
3.4.4 骨骼肌毛细血管密度 | 第34-37页 |
3.5 讨论 | 第37-39页 |
第四章 红尾沙蜥HIFs和VEGF-A基因克隆及mRNA表达研究 | 第39-71页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 样品采集 | 第39-40页 |
4.3 主要实验仪器及试剂 | 第40-42页 |
4.3.1 主要实验仪器 | 第40页 |
4.3.2 主要试剂 | 第40-41页 |
4.3.3 主要溶液配制 | 第41-42页 |
4.3.4 主要分析软件和在线分析程序 | 第42页 |
4.4 实验方法 | 第42-52页 |
4.4.1 红尾沙蜥和荒漠沙蜥组织总RNA提取 | 第42-43页 |
4.4.2 去除总RNA中的基因组DNA | 第43页 |
4.4.3 RT-PCR cDNA第一链合成 | 第43-44页 |
4.4.4 RACE-PCR cDNA合成 | 第44页 |
4.4.5 红尾沙蜥HIF-1和VEGF-A基因序列扩增 | 第44-50页 |
4.4.6 Real-time PCR | 第50-52页 |
4.5 结果 | 第52-67页 |
4.5.1 不同组织总RNA提取 | 第52-53页 |
4.5.2 HIF-1α和HIF-2α RT-PCR扩增 | 第53页 |
4.5.3 HIF-1α和HIF-2α RACE-PCR扩增 | 第53-54页 |
4.5.4 HIF-1α和HIF-2α cDNA序列生物信息学分析 | 第54-62页 |
4.5.5 VEGF-A基因RT-PCR扩增 | 第62页 |
4.5.6 VEGF-A cDNA序列生物信息学分析 | 第62-65页 |
4.5.7 Real-time PCR内参基因的选择 | 第65页 |
4.5.8 不同组织HIF-1α、HIF-2α和VEGF-A mRNA表达 | 第65-67页 |
4.5.9 HIF-1α、HIF-2α和VEGF-A mRNA表达相关性分析 | 第67页 |
4.6 讨论 | 第67-71页 |
第五章 红尾沙蜥肌红蛋白对高原低氧的适应 | 第71-87页 |
5.1 引言 | 第71页 |
5.2 样品采集 | 第71页 |
5.3 主要实验仪器和试剂 | 第71页 |
5.4 实验方法 | 第71-73页 |
5.4.1 肌红蛋白RT-PCR及RACE-PCR | 第71-72页 |
5.4.2 肌红蛋白序列分析 | 第72-73页 |
5.4.3 肌红蛋白三维空间结构及同源建模评估 | 第73页 |
5.4.4 肌红蛋白mRNA的表达 | 第73页 |
5.4.5 肌红蛋白浓度的测定 | 第73页 |
5.5 结果 | 第73-83页 |
5.5.1 肌红蛋白RT-PCR和RACE-PCR | 第73-74页 |
5.5.2 肌红蛋白cDNA全长序列分析 | 第74-76页 |
5.5.3 肌红蛋白氨基酸序列分析 | 第76-79页 |
5.5.4 肌红蛋白三维空间结构与同源建模评估 | 第79-82页 |
5.5.5 肌红蛋白mRNA表达 | 第82页 |
5.5.6 肌红蛋白浓度 | 第82-83页 |
5.6 讨论 | 第83-87页 |
第六章 红尾沙蜥一氧化氮含量及一氧化氮合酶对高原低氧的适应 | 第87-104页 |
6.1 引言 | 第87页 |
6.2 样品采集 | 第87页 |
6.3 主要实验仪器和试剂 | 第87页 |
6.4 方法 | 第87-94页 |
6.4.1 RNA提取及cDNA反转录 | 第87-88页 |
6.4.2 eNOS、nNOS和iNOS基因的克隆 | 第88-89页 |
6.4.3 eNOS,nNOS和iNOS Real-time PCR | 第89-90页 |
6.4.4 NOS酶活测定 | 第90-92页 |
6.4.5 NO含量测定 | 第92-93页 |
6.4.6 组织蛋白浓度的测定 | 第93-94页 |
6.4.7 数据分析 | 第94页 |
6.5 结果 | 第94-100页 |
6.5.1 NOSs基因RT-PCR及序列分析 | 第94-96页 |
6.5.2 两种沙蜥不同组织中eNOS、nNOS和iNOS mRNA表达水平 | 第96-98页 |
6.5.3 iNOS和总NOS酶活性测定 | 第98-99页 |
6.5.4 NO含量 | 第99-100页 |
6.6 讨论 | 第100-104页 |
6.6.1 长期的高原低氧适应增加了红尾沙蜥nNOS和iNOS mRNA的表达 | 第100-101页 |
6.6.2 较低水平的iNOS酶活性是红尾沙蜥适应高原低氧环境的策略之一 | 第101-102页 |
6.6.3 红尾沙蜥NO含量与长期的高原低氧适应间的关系 | 第102-104页 |
第七章 结论与创新 | 第104-106页 |
7.1 主要结论 | 第104-105页 |
7.2 创新点 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-119页 |
在读期间发表论文情况 | 第119-120页 |
学术交流与获奖情况 | 第120-121页 |
学术交流 | 第120页 |
获奖情况 | 第120-121页 |
参与科研项目 | 第121-122页 |
致谢 | 第122-124页 |
附录 | 第124-151页 |