| 摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 英文缩略词对照表 | 第11-13页 |
| 1 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 细胞衰老 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞衰老主要标志 | 第14-19页 |
| 1.2.1 细胞形态改变 | 第14页 |
| 1.2.2 细胞周期停滞 | 第14-15页 |
| 1.2.3 衰老相关 β-半乳糖苷酶活性 | 第15页 |
| 1.2.4 肿瘤抑制分子网络活化 | 第15-17页 |
| 1.2.5 衰老相关的异染色质聚集 | 第17-18页 |
| 1.2.6 衰老相关分泌表型 | 第18-19页 |
| 1.3 衰老的两面性 | 第19-20页 |
| 1.4 SWI/SNF染色质重塑复合物家族 | 第20-24页 |
| 1.4.1 SWI/SNF家族蛋白介绍 | 第20-23页 |
| 1.4.2 SWI/SNF家族蛋白参与调控细胞衰老 | 第23-24页 |
| 1.5 本文研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 1.6 本文研究内容 | 第25-27页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第25页 |
| 1.6.2 研究路线 | 第25-27页 |
| 1.7 课题特色及创新性 | 第27-29页 |
| 2 细胞培养 | 第29-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第29页 |
| 2.1.2 试剂及实验器材 | 第29页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第29-30页 |
| 2.2 细胞培养方法 | 第30-33页 |
| 3 过氧化氢(H_2O_2)诱导细胞衰老模型的建立 | 第33-47页 |
| 3.1 引言 | 第33-34页 |
| 3.2 MTT检测不同浓度H_2O_2对细胞存活率的影响 | 第34-36页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第35页 |
| 3.2.3 实验结果 | 第35-36页 |
| 3.3 细细胞衰老的形态学观察及衰老相关的SA-beta-gal染色 | 第36-39页 |
| 3.3.1 实验材料及设备 | 第36-37页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第37页 |
| 3.3.3 实验结果 | 第37-39页 |
| 3.4 H_2O_2处理后测定细胞生长曲线 | 第39-40页 |
| 3.4.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.4.3 实验结果 | 第40页 |
| 3.5 H_2O_2处理后测定细胞周期 | 第40-43页 |
| 3.5.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.5.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 3.5.3 实验结果 | 第42-43页 |
| 3.6 数据处理 | 第43页 |
| 3.7 结果分析与讨论 | 第43-47页 |
| 4 筛选SWI/SNF复合物中衰老调控相关亚基 | 第47-61页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 检测H_2O_2处理后SWI/SNF中各亚基表达水平 | 第47-53页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.2.3 实验结果 | 第51-53页 |
| 4.3 Western Blot检测H_2O_2处理后BAF57、BAF60a和SNF5的表达 | 第53-58页 |
| 4.3.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.3.2 实验步骤 | 第54-58页 |
| 4.3.3 实验结果 | 第58页 |
| 4.4 数据分析与统计 | 第58-59页 |
| 4.5 结果分析与讨论 | 第59-61页 |
| 5 过表达BAF57、BAF60a和SNF5对细胞衰老的影响 | 第61-87页 |
| 5.1 引言 | 第61页 |
| 5.2 重组载体构建 | 第61-69页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第61-63页 |
| 5.2.2 实验步骤 | 第63-65页 |
| 5.2.3 实验结果 | 第65-69页 |
| 5.3 重重组质粒转染及过表达检测 | 第69-76页 |
| 5.3.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 5.3.2 实验步骤 | 第70-74页 |
| 5.3.3 实验结果 | 第74-76页 |
| 5.4 过表达BAF57、BAF60a和SNF5对SA-β-gal染色的影响 | 第76-78页 |
| 5.4.1 实验材料及设备 | 第76页 |
| 5.4.2 实验步骤 | 第76-77页 |
| 5.4.3 实验结果 | 第77-78页 |
| 5.5 过表达BAF57、BAF60a和SNF5对细胞增殖的影响 | 第78-80页 |
| 5.5.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.5.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.5.3 实验结果 | 第79-80页 |
| 5.6 过表达BAF57、BAF60_a和SNF5对细胞周期的影响 | 第80-83页 |
| 5.6.1 实验材料 | 第80页 |
| 5.6.2 实验方法 | 第80-82页 |
| 5.6.3 实验结果 | 第82-83页 |
| 5.7 结果分析与讨论 | 第83-87页 |
| 6 沉默BAF57、BAF60_a和SNF5对细胞衰老的影响 | 第87-105页 |
| 6.1 引言 | 第87页 |
| 6.2 半定量RT-PCR检测BAF57、BAF60_a和SNF5沉默效率 | 第87-92页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第87-88页 |
| 6.2.2 实验方法 | 第88-91页 |
| 6.2.3 实验结果 | 第91-92页 |
| 6.3 蛋白质免疫印迹检测BAF57、BAF60_a和SNF5沉默效率 | 第92-97页 |
| 6.3.1 实验材料 | 第92页 |
| 6.3.2 实验方法 | 第92-96页 |
| 6.3.3 实验结果 | 第96-97页 |
| 6.4 沉默三个亚基，SA-β-gal染色检测细胞衰老情况 | 第97-99页 |
| 6.4.1 实验材料 | 第97页 |
| 6.4.2 实验步骤 | 第97-98页 |
| 6.4.3 实验结果 | 第98-99页 |
| 6.5 沉默三个亚基，流式细胞术检测细胞周期 | 第99-102页 |
| 6.5.1 实验材料 | 第99-100页 |
| 6.5.2 实验步骤 | 第100-101页 |
| 6.5.3 实验结果 | 第101-102页 |
| 6.6 结结果分析与讨论 | 第102-105页 |
| 7 BAF57、BAF60_a和SNF5参与调控衰老机制初探 | 第105-119页 |
| 7.1 引言 | 第105-106页 |
| 7.2 过表达BAF57、BAF60_a和SNF5对衰老相关因子影响 | 第106-111页 |
| 7.2.1 实验材料 | 第106-107页 |
| 7.2.2 实验步骤 | 第107-110页 |
| 7.2.3 实验结果 | 第110-111页 |
| 7.3 沉默三个亚基，检测衰老相关因子表达 | 第111-116页 |
| 7.3.1 实验材料 | 第111-112页 |
| 7.3.2 实验步骤 | 第112-115页 |
| 7.3.3 实验结果 | 第115-116页 |
| 7.4 结果分析与讨论 | 第116-119页 |
| 8 结论与展望 | 第119-121页 |
| 8.1 主要结论 | 第119-120页 |
| 8.2 后续工作建议 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-143页 |
| 附录 | 第143页 |
