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脱细胞基质修饰的聚己内酯电纺纤维的制备及其应用于间充质干细胞成软骨分化的研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 前言第11-26页
    1.1 组织工程第11-14页
        1.1.1 种子细胞第12页
        1.1.2 可溶性因子第12-13页
        1.1.3 生物支架材料第13-14页
    1.2 干细胞微环境第14-16页
        1.2.1 干细胞壁龛第14-15页
        1.2.2 ECM调节细胞行为第15-16页
    1.3 模拟ECM的组织工程支架材料设计第16-19页
        1.3.1 三维多孔支架第17-18页
        1.3.2 水凝胶第18页
        1.3.3 微纳米纤维支架第18页
        1.3.4 脱细胞基质作为支架材料第18-19页
    1.4 电纺纤维支架在组织工程中的应用第19-23页
        1.4.1 静电纺丝技术第19-20页
        1.4.2 电纺纤维支架应用于组织构建第20-22页
        1.4.3 静电纺丝微纳米支架材料的表面修饰第22-23页
    1.5 课题的提出第23-26页
第2章 材料与方法第26-36页
    2.1 实验药品与试剂第26页
    2.2 实验器材第26-27页
    2.3 实验方法第27-30页
        2.3.1 静电纺丝第27-28页
        2.3.2 细胞分离与培养第28-29页
        2.3.3 细胞接种第29页
        2.3.4 脱细胞过程第29-30页
    2.4 检测表征方法第30-36页
        2.4.1 扫描电子显微镜第30页
        2.4.2 原子力显微镜第30页
        2.4.3 透射电子显微镜第30页
        2.4.4 力学性能测试第30-31页
        2.4.5 接触角测量第31页
        2.4.6 死活染色第31页
        2.4.7 CCK-8检测第31页
        2.4.8 细胞骨架染色第31-32页
        2.4.9 免疫荧光染色第32页
        2.4.10 生物化学分析第32-33页
        2.4.11 组织学染色第33页
        2.4.12 基因表达分析第33-34页
        2.4.13 统计学分析第34-36页
第3章 PCL电纺纤维膜的制备、表征与脱细胞基质修饰第36-55页
    3.1 PCL电纺纤维膜的表征第36-38页
    3.2 rAC在PCL电纺纤维膜上的生长第38-40页
    3.3 接种密度为4×10~(4)cells/scaffold的rAC在PCL电纺纤维膜上生长和基质分泌第40-44页
        3.3.1 死活染色第40-41页
        3.3.2 电纺纤维膜上rAC的增殖第41-42页
        3.3.3 电纺纤维膜上rAC的GAG的累积第42-43页
        3.3.4 第7天时PCL电纺纤维膜上软骨基质定性与定量表征第43-44页
    3.4 脱细胞后PCL电纺纤维膜表面结构的变化第44-47页
    3.5 脱细胞前后PCL电纺纤维膜上ECM成分的变化第47-51页
        3.5.1 PCL电纺纤维膜上Ⅱ型胶原和Aggrecan的免疫荧光染色第47-49页
        3.5.2 脱细胞前后GAG和总胶原的变化第49-50页
        3.5.3 脱细胞前后PCL电纺纤维膜上ECM成分的生物化学分析第50-51页
    3.6 讨论第51-54页
    3.7 小结第54-55页
第4章 dECM/PCL复合电纺纤维支架对rMSCs粘附、增殖和分化的影响第55-67页
    4.1 不同电纺纤维支架上rMSCs的形态第55-56页
    4.2 不同电纺纤维支架上rMSCs的增殖第56-57页
    4.3 不同电纺纤维支架上rMSCs的活性第57-58页
    4.4 不同电纺纤维支架上rMSCs的成软骨分化第58-64页
        4.4.1 rMSCs在生长培养基中的成软骨分化第58-60页
        4.4.2 rMSCs在诱导培养基中的成软骨分化第60-64页
    4.5 讨论第64-66页
    4.6 本章小结第66-67页
第5章 全文总结与展望第67-69页
参考文献第69-76页
致谢第76-77页
附:攻读硕士期间发表的论文第77页

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