摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 前言 | 第11-26页 |
1.1 组织工程 | 第11-14页 |
1.1.1 种子细胞 | 第12页 |
1.1.2 可溶性因子 | 第12-13页 |
1.1.3 生物支架材料 | 第13-14页 |
1.2 干细胞微环境 | 第14-16页 |
1.2.1 干细胞壁龛 | 第14-15页 |
1.2.2 ECM调节细胞行为 | 第15-16页 |
1.3 模拟ECM的组织工程支架材料设计 | 第16-19页 |
1.3.1 三维多孔支架 | 第17-18页 |
1.3.2 水凝胶 | 第18页 |
1.3.3 微纳米纤维支架 | 第18页 |
1.3.4 脱细胞基质作为支架材料 | 第18-19页 |
1.4 电纺纤维支架在组织工程中的应用 | 第19-23页 |
1.4.1 静电纺丝技术 | 第19-20页 |
1.4.2 电纺纤维支架应用于组织构建 | 第20-22页 |
1.4.3 静电纺丝微纳米支架材料的表面修饰 | 第22-23页 |
1.5 课题的提出 | 第23-26页 |
第2章 材料与方法 | 第26-36页 |
2.1 实验药品与试剂 | 第26页 |
2.2 实验器材 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-30页 |
2.3.1 静电纺丝 | 第27-28页 |
2.3.2 细胞分离与培养 | 第28-29页 |
2.3.3 细胞接种 | 第29页 |
2.3.4 脱细胞过程 | 第29-30页 |
2.4 检测表征方法 | 第30-36页 |
2.4.1 扫描电子显微镜 | 第30页 |
2.4.2 原子力显微镜 | 第30页 |
2.4.3 透射电子显微镜 | 第30页 |
2.4.4 力学性能测试 | 第30-31页 |
2.4.5 接触角测量 | 第31页 |
2.4.6 死活染色 | 第31页 |
2.4.7 CCK-8检测 | 第31页 |
2.4.8 细胞骨架染色 | 第31-32页 |
2.4.9 免疫荧光染色 | 第32页 |
2.4.10 生物化学分析 | 第32-33页 |
2.4.11 组织学染色 | 第33页 |
2.4.12 基因表达分析 | 第33-34页 |
2.4.13 统计学分析 | 第34-36页 |
第3章 PCL电纺纤维膜的制备、表征与脱细胞基质修饰 | 第36-55页 |
3.1 PCL电纺纤维膜的表征 | 第36-38页 |
3.2 rAC在PCL电纺纤维膜上的生长 | 第38-40页 |
3.3 接种密度为4×10~(4)cells/scaffold的rAC在PCL电纺纤维膜上生长和基质分泌 | 第40-44页 |
3.3.1 死活染色 | 第40-41页 |
3.3.2 电纺纤维膜上rAC的增殖 | 第41-42页 |
3.3.3 电纺纤维膜上rAC的GAG的累积 | 第42-43页 |
3.3.4 第7天时PCL电纺纤维膜上软骨基质定性与定量表征 | 第43-44页 |
3.4 脱细胞后PCL电纺纤维膜表面结构的变化 | 第44-47页 |
3.5 脱细胞前后PCL电纺纤维膜上ECM成分的变化 | 第47-51页 |
3.5.1 PCL电纺纤维膜上Ⅱ型胶原和Aggrecan的免疫荧光染色 | 第47-49页 |
3.5.2 脱细胞前后GAG和总胶原的变化 | 第49-50页 |
3.5.3 脱细胞前后PCL电纺纤维膜上ECM成分的生物化学分析 | 第50-51页 |
3.6 讨论 | 第51-54页 |
3.7 小结 | 第54-55页 |
第4章 dECM/PCL复合电纺纤维支架对rMSCs粘附、增殖和分化的影响 | 第55-67页 |
4.1 不同电纺纤维支架上rMSCs的形态 | 第55-56页 |
4.2 不同电纺纤维支架上rMSCs的增殖 | 第56-57页 |
4.3 不同电纺纤维支架上rMSCs的活性 | 第57-58页 |
4.4 不同电纺纤维支架上rMSCs的成软骨分化 | 第58-64页 |
4.4.1 rMSCs在生长培养基中的成软骨分化 | 第58-60页 |
4.4.2 rMSCs在诱导培养基中的成软骨分化 | 第60-64页 |
4.5 讨论 | 第64-66页 |
4.6 本章小结 | 第66-67页 |
第5章 全文总结与展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
附:攻读硕士期间发表的论文 | 第77页 |