| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第17-31页 |
| 1.1 半翅目昆虫的氨基酸营养需求 | 第17-18页 |
| 1.2 半翅目昆虫氨基酸合成及其与共生菌的关系 | 第18-20页 |
| 1.3 组氨酸的生物合成 | 第20-27页 |
| 1.3.1 组氨酸生物合成途径 | 第20-24页 |
| 1.3.2 组氨酸与其他生物合成途径的联系 | 第24-26页 |
| 1.3.3 组氨酸合成途径的调控 | 第26-27页 |
| 1.4 昆虫RNAi研究进展 | 第27-30页 |
| 1.4.1 RNAi的作用机制 | 第27-28页 |
| 1.4.2 介导双链RNA进入昆虫的方法 | 第28页 |
| 1.4.3 RNAi技术在褐飞虱中的研究进展 | 第28-30页 |
| 1.5 本课题的研究内容与意义 | 第30-31页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第30页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第30-31页 |
| 2 组氨酸合成基因的克隆与来源分析 | 第31-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 供试虫源 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.2 研究方法 | 第33-41页 |
| 2.2.1 常用试剂及培养基的配制 | 第33页 |
| 2.2.2 试虫取样 | 第33-34页 |
| 2.2.3 总RNA的提取和c DNA第一链合成 | 第34-35页 |
| 2.2.4 组氨酸合成基因的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.5 引物设计与合成 | 第36-37页 |
| 2.2.6 克隆与序列分析 | 第37-39页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第39页 |
| 2.2.8 褐飞虱基因组PCR | 第39-40页 |
| 2.2.9 实时荧光定量分析 (RT-q PCR) | 第40-41页 |
| 2.2.10 数据分析 | 第41页 |
| 2.3 结果与分析 | 第41-58页 |
| 2.3.1 组氨酸合成基因的鉴定与克隆 | 第41-43页 |
| 2.3.2 序列分析与系统进化 | 第43-54页 |
| 2.3.3 龄期、组织表达和基因组PCR | 第54-58页 |
| 2.3.4 褐飞虱体内组氨酸合成通路的完善 | 第58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-60页 |
| 3 组氨酸合成关键基因EdeHis1的研究 | 第60-88页 |
| 3.1 实验材料 | 第60-61页 |
| 3.1.1 供试虫源 | 第60页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第60-61页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第61页 |
| 3.2 研究方法 | 第61-75页 |
| 3.2.1 引物设计与合成 | 第61-62页 |
| 3.2.2 EdeHis1的 5’RACE和 3’RACE | 第62-63页 |
| 3.2.3 dsRNA的合成 | 第63-66页 |
| 3.2.4 注射dsRNA的生物测定 | 第66-69页 |
| 3.2.5 褐飞虱人工饲料的配制及饲养方法 | 第69-70页 |
| 3.2.6 外源组氨酸的饲喂与注射 | 第70-71页 |
| 3.2.7 实时荧光定量分析 (RT-q PCR) | 第71页 |
| 3.2.8 游离氨基酸的测定 | 第71页 |
| 3.2.9 组氨酸对EdeHis1蛋白构型的影响 | 第71-74页 |
| 3.2.10 数据分析 | 第74-75页 |
| 3.3 结果与分析 | 第75-85页 |
| 3.3.1 组氨酸对褐飞虱存活的影响 | 第75页 |
| 3.3.2 EdeHis1的RACE扩增 | 第75-76页 |
| 3.3.3 dsRNA对EdeHis1的表达及褐飞体内游离氨基酸的影响 | 第76-79页 |
| 3.3.4 dsEdeHis1对褐飞虱生长发育的影响 | 第79-80页 |
| 3.3.5 组氨酸对EdeHis1的调控 | 第80-82页 |
| 3.3.6 组氨酸调控EdeHis1的构型 | 第82-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-88页 |
| 4 组氨酸合成基因EdeHis2及EdeHis6的研究 | 第88-95页 |
| 4.1 实验材料 | 第88页 |
| 4.1.1 供试虫源 | 第88页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第88页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第88页 |
| 4.2 研究方法 | 第88-90页 |
| 4.2.1 总RNA的提取及c DNA第一链的合成 | 第88页 |
| 4.2.2 引物设计与合成 | 第88-89页 |
| 4.2.3 dsRNA的合成 | 第89页 |
| 4.2.4 注射dsRNA的生物测定 | 第89-90页 |
| 4.2.5 实时荧光定量分析 (RT-q PCR) | 第90页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第90页 |
| 4.3 结果与分析 | 第90-94页 |
| 4.3.1 dsRNA对EdeHis2、EdeHis6基因表达量的影响 | 第90页 |
| 4.3.2 dsEdeHis2及dsEdeHis6对褐飞虱生长发育的影响 | 第90-92页 |
| 4.3.3 dsEdeHis6影响褐飞虱翅的发育 | 第92-94页 |
| 4.4 讨论 | 第94-95页 |
| 5 全文总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 附录1 组氨酸合成基因克隆的碱基序列 | 第108-110页 |
| 附录2 褐飞虱类酵母共生菌基因的干扰效率 | 第110-113页 |
| 作者简历 | 第113页 |
