| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 仙台病毒基本概述 | 第12-14页 |
| 1.1 仙台病毒的形态结构 | 第12页 |
| 1.2 仙台病毒的分子生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.3 仙台病毒生物学功能发挥方式 | 第13页 |
| 1.4 仙台病毒调节免疫应答 | 第13-14页 |
| 1.5 仙台病毒研究展望 | 第14页 |
| 2 细胞凋亡 | 第14-17页 |
| 2.1 细胞凋亡的分子机理 | 第14页 |
| 2.2 细胞凋亡的特征 | 第14-17页 |
| 3 细胞自噬 | 第17-20页 |
| 3.1 自噬的形成 | 第17页 |
| 3.2 自噬的分类 | 第17-18页 |
| 3.2.1 巨自噬 | 第18页 |
| 3.2.2 分子伴侣介导的自噬 | 第18页 |
| 3.2.3 微自噬 | 第18页 |
| 3.3 自噬在肿瘤中的作用 | 第18-20页 |
| 3.3.1 自噬的两面性 | 第18-19页 |
| 3.3.2 自噬的免疫研究 | 第19-20页 |
| 第一部分 HVJ-E致PC3凋亡的作用机制 | 第20-37页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1 细胞株、病毒 | 第20页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂和药品 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-29页 |
| 2.1 溶液配制 | 第22页 |
| 2.2 灭活仙台病毒的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.1 仙台病毒的繁殖 | 第22页 |
| 2.2.2 仙台病毒的浓缩 | 第22-23页 |
| 2.2.3 仙台病毒效价的测定 | 第23页 |
| 2.2.4 仙台病毒的灭活及感染力的验证 | 第23页 |
| 2.3 PC3细胞的培养 | 第23-24页 |
| 2.4 观察细胞形态 | 第24页 |
| 2.5 CCK-8法测定细胞的生长抑制效果 | 第24页 |
| 2.6 FACS(Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 2.7 FACS(探针DCFH-DA)检测细胞活性氧 | 第25页 |
| 2.8 Western blot检测细胞凋亡蛋白的表达 | 第25-28页 |
| 2.8.1 蛋白样品制备 | 第25页 |
| 2.8.2 测蛋白浓度 | 第25-26页 |
| 2.8.3 蛋白样品变性 | 第26页 |
| 2.8.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
| 2.8.5 转膜 | 第27页 |
| 2.8.6 免疫反应 | 第27-28页 |
| 2.8.7 化学发光、曝光 | 第28页 |
| 2.9 检测Caspase信号通路相关蛋白 | 第28页 |
| 2.10 检测Z-VAD-FMK预处理后细胞的凋亡和Caspase-3蛋白 | 第28页 |
| 2.11 检测MAPK信号通路相关蛋白 | 第28页 |
| 2.12 检测MAPK通路各个抑制剂预处理后细胞凋亡和凋亡相关蛋白 | 第28-29页 |
| 2.13 检测NAC预处理后细胞的凋亡率和凋亡相关蛋白 | 第29页 |
| 3. 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 HVJ-E对PC3细胞增殖活性的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 HVJ-E对PC3细胞凋亡的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 Caspase信号通路在HVJ-E致PC3细胞凋亡中发挥作用 | 第31-32页 |
| 3.4 MAPK信号通路在HVJ-E致PC3细胞凋亡中发挥作用 | 第32-33页 |
| 3.5 测定了PC3细胞的凋亡率和凋亡相关蛋白的表达 | 第33-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第二部分 自噬在HVJ-E致PC3凋亡中的作用 | 第37-42页 |
| 1. 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞株、病毒 | 第37页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 主要试剂和药品 | 第38页 |
| 2. 方法 | 第38-39页 |
| 2.1 溶液配制 | 第38页 |
| 2.2 细胞免疫荧光观察自噬小体 | 第38页 |
| 2.3 Western blot检测自噬相关蛋白 | 第38-39页 |
| 2.4 检测caspase-3、PARP、LC3的表达 | 第39页 |
| 2.5 检测细胞凋亡率 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-41页 |
| 3.1 HVJ-E可诱导PC3细胞发生自噬 | 第39-40页 |
| 3.2 诱导自噬可促进HVJ-E致PC3细胞凋亡的效应 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
