摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
符号说明 | 第8-9页 |
综述一:犬干扰素研究进展 | 第9-15页 |
1 干扰素概述 | 第9-10页 |
2 犬干扰素的作用及应用 | 第10-12页 |
3 干扰素的制备 | 第12-13页 |
4 长效干扰素研究 | 第13-14页 |
5 结语 | 第14-15页 |
综述二:类弹性蛋白多肽及其在重组蛋白纯化中的应用 | 第15-23页 |
1. 综述 | 第15-17页 |
2. 在重组蛋白纯化中的应用 | 第17-23页 |
研究内容一:不同标签融合犬β干扰素的表达及条件优化 | 第23-37页 |
1. 材料与方法 | 第23-32页 |
1.1 主要试剂 | 第23页 |
1.2 载体与菌株 | 第23-24页 |
1.3 溶液与培养基 | 第24-25页 |
1.4 实验设备 | 第25页 |
1.5 目的基因PCR扩增 | 第25-26页 |
1.6 PCR产物纯化 | 第26页 |
1.7 目的片段与T载体连接 | 第26页 |
1.8 感受态细胞制备 | 第26-27页 |
1.9 连接产物转化 | 第27页 |
1.10 重组子鉴定 | 第27-28页 |
1.11 表达载体构建 | 第28-29页 |
1.12 融合蛋白表达 | 第29-32页 |
2. 结果 | 第32-35页 |
2.1 目的基因PCR扩增 | 第32页 |
2.2 表达载体鉴定 | 第32-33页 |
2.3 融合干扰素表达分析 | 第33页 |
2.4 诱导表达温度优化 | 第33-34页 |
2.5 可溶性蛋白表达分析 | 第34-35页 |
2.6 IPTG浓度和诱导时间优化 | 第35页 |
3. 讨论 | 第35-37页 |
研究内容二:融合犬β干扰素的分离纯化及抗病毒活性和体外半衰期比较 | 第37-48页 |
1. 材料与方法 | 第37-42页 |
1.1 试剂与耗材 | 第37页 |
1.2 主要溶液 | 第37-38页 |
1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
1.4 His-CaIFN β纯化 | 第38页 |
1.5 CaIFN β-ELP纯化 | 第38-40页 |
1.6 干扰素活性检测 | 第40-42页 |
1.7 干扰素血浆稳定性检测 | 第42页 |
2. 结果 | 第42-46页 |
2.1 His-CaIFN β纯化 | 第42-43页 |
2.2 CaIFNβ-ELP纯化 | 第43-45页 |
2.3 VSV滴度测定 | 第45页 |
2.4 融合干扰素活性测定 | 第45页 |
2.5 间接免疫荧光 | 第45-46页 |
2.6 干扰素血浆稳定性 | 第46页 |
3. 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |