| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略表 | 第6-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 镉致骨骼毒性的研究进展 | 第11-16页 |
| 1. 镉致骨骼毒性的流行病学研究 | 第11-12页 |
| 2. 镉致骨毒性的机制 | 第12-16页 |
| 2.1 镉间接致骨毒性 | 第12-13页 |
| 2.2 镉直接致骨毒性 | 第13-14页 |
| 2.3 镉致骨毒性与其他微量元素的关系 | 第14-16页 |
| 第二章 细胞凋亡中镉和钙的相互作用 | 第16-21页 |
| 1. 镉与钙及其相关蛋白 | 第16-19页 |
| 1.1 镉与钙稳态 | 第16-17页 |
| 1.2 镉对钙调蛋白的作用 | 第17-18页 |
| 1.3 镉对CaMKⅡ的作用 | 第18-19页 |
| 2. 镉与细胞凋亡 | 第19-21页 |
| 2.1 镉对细胞凋亡的影响 | 第19页 |
| 2.2 镉对钙蛋白酶的影响 | 第19页 |
| 2.3 钙调蛋白在细胞凋亡中的作用 | 第19-21页 |
| 第三章 内质网应激在细胞凋亡过程中的作用 | 第21-25页 |
| 1. 内质网应激与细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 2. 镉诱导内质网应激 | 第22-23页 |
| 3. 内质网应激和UPR调节镉诱导的细胞凋亡 | 第23-25页 |
| 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-63页 |
| 第一章 镉致成骨细胞钙超载及内质网钙稳态失衡引发内质网应激 | 第26-34页 |
| 1. 材料 | 第26-27页 |
| 1.1 实验动物 | 第26页 |
| 1.2 主要仪器 | 第26-27页 |
| 1.3 主要试剂及材料 | 第27页 |
| 2. 方法 | 第27-29页 |
| 2.1 溶液配制 | 第27页 |
| 2.2 SD大鼠成骨细胞的准备 | 第27-28页 |
| 2.2.1 成骨细胞的分离培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 成骨细胞的消化传代 | 第28页 |
| 2.3 细胞存活率监测 | 第28页 |
| 2.4 流式细胞术检测细胞内游离钙离子浓度 | 第28页 |
| 2.5 免疫印迹检测成骨细胞中BiP、ATF4、CHOP蛋白表达 | 第28-29页 |
| 2.5.1 细胞处理 | 第28-29页 |
| 2.5.2 蛋白样品制备 | 第29页 |
| 2.5.3 免疫印迹 | 第29页 |
| 2.6 数据分析 | 第29页 |
| 3. 结果 | 第29-33页 |
| 3.1 镉对细胞存活率、细胞内钙离子浓度的影响及2-APB的保护效应 | 第29-31页 |
| 3.2 镉对原代大鼠成骨细胞UPR蛋白表达的影响 | 第31-33页 |
| 3.2.1 镉暴露不同时间段对细胞UPR蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 3.2.2 不同浓度镉对原代大鼠成骨细胞UPR蛋白表达的影响 | 第31-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-34页 |
| 第二章 镉致成骨细胞CaMKⅡ表达水平变化及其在内质网应激中的作用 | 第34-40页 |
| 1. 材料 | 第34页 |
| 1.1 实验动物 | 第34页 |
| 1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 1.3 主要试剂及材料 | 第34页 |
| 2. 方法 | 第34-35页 |
| 2.1 细胞培养 | 第34页 |
| 2.2 免疫印迹检测成骨细胞中CaMKⅡ、BiP、ATF4、CHOP蛋白表达 | 第34页 |
| 2.3 数据分析 | 第34-35页 |
| 3. 结果 | 第35-38页 |
| 3.1 镉对原代大鼠成骨细胞CaMKⅡ蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.2 镉及2-APB对原代大鼠成骨细胞CaMKⅡ蛋白表达水平的影响 | 第36页 |
| 3.3 镉及KN93对原代大鼠成骨细胞细胞活性及UPR蛋白表达水平的影响 | 第36-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 CaMKⅡ在镉致成骨细胞内质网应激引发细胞调亡过程中的作用 | 第40-49页 |
| 1. 材料 | 第40页 |
| 1.1 实验动物 | 第40页 |
| 1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 1.3 主要试剂及材料 | 第40页 |
| 2. 方法 | 第40-41页 |
| 2.1 细胞核荧光染色 | 第40-41页 |
| 2.2 Annexin V-FITC流式细胞检测 | 第41页 |
| 2.3 Western Blot分析凋亡蛋白表达 | 第41页 |
| 2.4 数据分析 | 第41页 |
| 3. 结果 | 第41-47页 |
| 3.1 镉及2-APB对原代大鼠成骨细胞Caspase蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.2 镉及KN93对原代大鼠成骨细胞Caspase蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.3 镉及2-APB或KN93对成骨细胞凋亡水平的影响 | 第43-47页 |
| 3.3.1 镉及2-APB或KN93对成骨细胞凋亡率的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.2 镉及2-APB或KN93对成骨细胞核形态的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.3 镉及2-APB或KN93对成骨细胞BCL2家族蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-49页 |
| 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第64-65页 |
