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国内衣原体流行株的基因组分析与毒力基因克隆表达

缩略词表第5-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-13页
前言第14-18页
第一部分 衣原体流行株的全基因组序列测定与分析第18-34页
    1 引言第18页
    2 材料与方法第18-23页
        2.1 材料第18-20页
            2.1.1 菌株、细胞、实验动物第18-19页
            2.1.2 主要实验材料及试剂第19页
            2.1.3 实验仪器设备第19-20页
        2.2 方法第20-23页
            2.2.1 细胞培养第20-21页
            2.2.2 Cps和Ct的感染第21页
            2.2.3 Cps和Ct的传代培养第21-22页
            2.2.4 Cps和Ct的纯化第22页
            2.2.5 CpsCG1株和CtQH111L株基因测序和序列分析第22-23页
    3 结果第23-31页
        3.1 CpsCG1株重测序结果第23-24页
        3.2 完成Ct的分离和培养及纯化第24-25页
        3.3 Ct QH111L株测序结果第25-31页
    4 讨论第31-34页
第二部分 重要衣原体毒力基因的克隆表达第34-60页
    1 引言第34页
    2 材料与方法第34-49页
        2.1 材料第34-36页
            2.1.1 菌株、细胞、实验动物第34页
            2.1.2 主要实验材料及试剂第34-35页
            2.1.3 实验仪器设备第35-36页
        2.2 方法第36-49页
            2.2.1 构建B598_0590、incA和ompA基因的原核表达载体第36-41页
            2.2.2 融合蛋白的表达和纯化第41-43页
            2.2.3 动物免疫第43页
            2.2.4 细胞培养第43-44页
            2.2.5 Cps培养第44页
            2.2.6 融合蛋白的IFA第44页
            2.2.7 CtCT135及移码突变后的原核表达载体构建第44-45页
            2.2.8 融合蛋白的表达第45页
            2.2.9 总RNA提取第45页
            2.2.10 CtCT135移码突变前后的RT-qPCR第45-47页
            2.2.11 CtCT135 C端融合原核表达载体构建第47页
            2.2.12 CtCT135 C端融合蛋白表达和纯化第47页
            2.2.13 动物免疫第47页
            2.2.14 融合蛋白的鉴定——WB第47-48页
            2.2.17 构建B598_0681基因的原核表达载体第48-49页
            2.2.18 融合蛋白的表达和纯化第49页
    3 结果第49-58页
        3.1 成功扩增B598_0590、incA和ompA基因第49页
        3.2 诱导表达并完成3种目的蛋白纯化第49-50页
        3.3 IFA观察蛋白在HeLa229细胞中的定位第50-52页
        3.4 成功扩增CtCT135基因第52页
        3.5 RT-qPCR第52-55页
        3.6 完成目的蛋白的诱导表达第55页
        3.7 免疫印迹实验验证融合蛋白表达第55-56页
        3.8 成功扩增B598_0681基因第56-57页
        3.9 诱导表达并完成B598_0681基因表达蛋白的纯化第57-58页
    4 讨论第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-65页
附录第65-67页
个人简历第67-68页
致谢第68页

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