摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
前言 | 第15-17页 |
缩略词表 | 第17-18页 |
第一章 查尔酮合酶的研究进展 | 第18-28页 |
前言 | 第18页 |
一、CHS蛋白结构 | 第18-20页 |
二、CHS作用底物 | 第20-21页 |
三、CHS在植物黄酮生物合成途径中的活性 | 第21-23页 |
四、CHS基因研究进展 | 第23-24页 |
五、CHS基因在植物体内的亚细胞定位 | 第24页 |
六、CHS基因在植物体内的活性 | 第24-25页 |
七、CHS基因的表达调控 | 第25-26页 |
八、CHS基因响应外界损伤的保护 | 第26-27页 |
结论 | 第27-28页 |
第二章 红花查尔酮合酶家族基因的克隆及生物信息学分析 | 第28-54页 |
第一节 查尔酮合酶基因的克隆 | 第28-43页 |
一、实验材料 | 第29-32页 |
二、实验方法 | 第32-40页 |
三、实验结果 | 第40-42页 |
四、结果分析 | 第42-43页 |
第二节 查尔酮合酶基因的全长克隆 | 第43-54页 |
一、基因全长引物设计 | 第43页 |
二、基因全长克隆 | 第43页 |
三、基因全长克隆结果 | 第43-44页 |
四、查尔酮合酶的生物信息学分析 | 第44-45页 |
五、生物信息学分析结果 | 第45-53页 |
六、生物信息学分析结果讨论 | 第53-54页 |
第三章 查尔酮合酶基因的表达特征研究 | 第54-60页 |
一、材料 | 第54-55页 |
(一)试剂 | 第54页 |
(二)MeJA溶液配置 | 第54页 |
(三)仪器 | 第54-55页 |
二、实验方法 | 第55-56页 |
(一)应用MeJA刺激红花植株 | 第55页 |
(二)RNA提取 | 第55页 |
(三)cDNA第一链合成 | 第55-56页 |
(四)qPCR | 第56页 |
三、实验结果 | 第56-59页 |
(一)qPCR引物设计 | 第56-57页 |
(二)目的基因的表达水平 | 第57页 |
(三)红花CHS基因对MeJA处理的响应及表达分析 | 第57-59页 |
四、讨论 | 第59-60页 |
第四章 红花黄酮类成分积累对MeJA处理的响应及与CHS基因表达的关联性分析 | 第60-75页 |
第一节 MeJA刺激红花黄酮类化合物累积的影响 | 第60-74页 |
一、仪器设备 | 第60页 |
二、材料和方法 | 第60-62页 |
(一)样品前处理条件 | 第60页 |
(二)液相色谱方法 | 第60-61页 |
(三)质谱方法 | 第61-62页 |
三、黄酮类成分积累的半定量测定 | 第62-63页 |
四、结果分析 | 第63-74页 |
第二节 黄酮类成分积累与CHS基因表达的关联性分析 | 第74-75页 |
第五章 查尔酮合酶基因的亚细胞定位 | 第75-81页 |
第一节 查尔酮合成酶基因真核表达载体的构建 | 第75-80页 |
一、材料 | 第75-76页 |
(一)表达菌株与表达载体 | 第75页 |
(二)试剂与药品 | 第75-76页 |
(三)主要仪器设备 | 第76页 |
二、PCR扩增目的基因片段 | 第76-78页 |
三、结果 | 第78-79页 |
四、亚细胞定位 | 第79-80页 |
本章小结 | 第80-81页 |
第六章 查尔酮合酶基因的体外催化功能研究 | 第81-99页 |
第一节 原核表达 | 第81-97页 |
一、所用材料与试剂 | 第81-83页 |
二、实验方法 | 第83-91页 |
三、实验结果 | 第91-97页 |
本章小结 | 第97-99页 |
结论与讨论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-106页 |
致谢 | 第106页 |