| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 动物细胞培养技术 | 第10-11页 |
| 1.2 猪瘟病毒与猪瘟疫苗 | 第11-16页 |
| 1.2.1 猪瘟病毒 | 第12页 |
| 1.2.2 猪瘟病毒蛋白结构 | 第12-15页 |
| 1.2.3 猪瘟病毒侵染宿主细胞与自身扩增过程 | 第15-16页 |
| 1.3 猪瘟疫苗生产工艺 | 第16-17页 |
| 1.3.1 兔源猪瘟疫苗生产工艺 | 第16页 |
| 1.3.2 ST细胞源猪瘟疫苗生产工艺 | 第16-17页 |
| 1.4 ST细胞低血清微载体悬浮体系生产猪瘟疫苗工艺开发的优点与必要性 | 第17-20页 |
| 1.4.1 低血清(无血清)培养基的开发 | 第17-18页 |
| 1.4.2 微载体悬浮体系生产方式的优点 | 第18-19页 |
| 1.4.3 微载体悬浮培养技术在疫苗生产中的应用 | 第19-20页 |
| 1.5 本文主要研究内容、目的及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.2 细胞株与病毒株 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 ST细胞培养方法 | 第23-24页 |
| 2.3 分析方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 细胞密度与增殖参数测定 | 第24页 |
| 2.3.2 荧光定量PCR方法测定CSFV | 第24-25页 |
| 2.3.3 营养物和代谢副产物浓度测定 | 第25页 |
| 2.4 计算方法 | 第25-27页 |
| 2.4.1 细胞比生长速率的计算 | 第25页 |
| 2.4.2 葡萄糖比消耗速率,乳酸、氨比生成速率的计算 | 第25页 |
| 2.4.3 乳酸对葡萄糖转化率的计算 | 第25-26页 |
| 2.4.4 单位细胞产毒量的计算 | 第26页 |
| 2.4.5 微载体悬浮培养体系Cytodex 1理论微载体利用率计算 | 第26-27页 |
| 第3章 基于微载体悬浮体系ST细胞培养工艺的研究 | 第27-40页 |
| 3.1 前言 | 第27页 |
| 3.2 实验方案 | 第27-31页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第31-39页 |
| 3.3.1 ST细胞LSM低血清培养基Mixture Screening结果 | 第31-32页 |
| 3.3.2 微载体浓度对ST细胞生长代谢的影响 | 第32-35页 |
| 3.3.3 细胞接种密度对ST细胞生长代谢的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.4 灌注培养体系ST细胞生长与代谢情况 | 第37-38页 |
| 3.3.5 3L搅拌式反应器ST细胞生长与代谢情况 | 第38-39页 |
| 3.4 本章小结 | 第39-40页 |
| 第4章 基于LSM搅拌瓶体系CSFV生产工艺的研究 | 第40-62页 |
| 4.1 前言 | 第40-41页 |
| 4.2 实验方案 | 第41-42页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第42-60页 |
| 4.3.1 基于RT-qPCR方法的CSFV检测 | 第42页 |
| 4.3.2 方瓶静态培养体系ST细胞生长代谢、CSFV增殖与产量情况 | 第42-47页 |
| 4.3.3 不同pH缓冲体系对方瓶体系CSFV增殖的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.4 收毒换液间隔对CSFV增殖的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.5 降温操作与冻融次数对CSFV失活速率的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.6 初步考察搅拌瓶体系ST细胞生长、CSFV增殖与产量情况 | 第50-52页 |
| 4.3.7 考察MOI、TOI对ST细胞生长与CSFV增殖的影响 | 第52-56页 |
| 4.3.8 考察间歇搅拌接毒方式对ST细胞生长与CSFV增殖的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.9 考察收毒换液操作对ST细胞生长与CSFV增殖的影响 | 第57-60页 |
| 4.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第62-65页 |
| 5.1 全文总结 | 第62-63页 |
| 5.2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
