| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第12-20页 |
| 1 vasa基因概述 | 第12-15页 |
| 1.1 原生殖细胞的起源和迁移 | 第12页 |
| 1.2 DEAD-box家族基因 | 第12-14页 |
| 1.3 vasa基因研究进展及意义 | 第14-15页 |
| 2 原核表达系统简介 | 第15-19页 |
| 2.1 大肠杆菌pET表达系统简介 | 第15-16页 |
| 2.2 载体的选择 | 第16-17页 |
| 2.3 原核表达质粒pET-28a、pET-32a | 第17-19页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 河南华溪蟹vasa基因克隆及序列分析 | 第20-40页 |
| 1 材料与方法 | 第20-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2 结果 | 第28-37页 |
| 2.1 性腺总RNA浓度及纯度检测 | 第28-29页 |
| 2.2 747bp vasa基因部分片段获得 | 第29-30页 |
| 2.3 RACE PCR克隆vasa基因5'-UTR及3'-UTR | 第30-32页 |
| 2.4 核苷酸序列特征分析 | 第32页 |
| 2.5 氨基酸序列特征分析 | 第32-34页 |
| 2.6 VASA蛋白三维结构预测 | 第34页 |
| 2.7 多序列比对和系统进化分析 | 第34-37页 |
| 2.8 vasa基因的组织分布 | 第37页 |
| 3 讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 河南华溪蟹VASA融合蛋白表达载体的构建 | 第40-50页 |
| 1 材料与方法 | 第40-44页 |
| 1.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 1.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2 结果 | 第44-46页 |
| 2.1 PCR扩增结果 | 第44-45页 |
| 2.2 双酶切反应 | 第45页 |
| 2.3 双酶切鉴定 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| 第四章 河南华溪蟹VASA融合蛋白的表达及纯化 | 第50-62页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| 1.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 1.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 2 结果 | 第56-59页 |
| 2.1 VASA融合蛋白表达状态的检测和分析 | 第56-58页 |
| 2.2 VASA融合蛋白的Western blot分析 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 个人简况及联系方式 | 第76-80页 |
