| 符号及缩略词 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第11-12页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的生物学特性 | 第12-17页 |
| ·分类地位 | 第12-13页 |
| ·形态结构及理化性质 | 第13-14页 |
| ·基因组结构 | 第14-15页 |
| ·PRRSV的主要蛋白 | 第15-17页 |
| ·遗传变异 | 第17-18页 |
| ·致病机制与临床表现 | 第18-21页 |
| ·致病的机制 | 第18-19页 |
| ·临床症状 | 第19-20页 |
| ·剖检的病变 | 第20页 |
| ·显微镜下病变 | 第20-21页 |
| ·防治 | 第21-22页 |
| ·紧密连接蛋白CLDN4的研究进展 | 第22-24页 |
| ·CLDN4与病毒 | 第22-23页 |
| ·CLDN4与癌症 | 第23-24页 |
| ·CLDN4的应用前景 | 第24页 |
| ·研究目的及意义 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-49页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·毒株及细胞 | 第24页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·质粒及受体菌 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要设备及仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-49页 |
| ·主要试剂配制 | 第26-29页 |
| ·目的基因的获取 | 第29-32页 |
| ·p ET-30(a)-CLDN4及p EGFP-N1-CLDN4重组质粒的构建 | 第32-35页 |
| ·CLDN4重组蛋白的表达与纯化 | 第35-38页 |
| ·CLDN4蛋白单克隆抗体的制备 | 第38-41页 |
| ·CLDN4单克隆抗体的鉴定 | 第41-42页 |
| ·SD-TA12株病毒的准备 | 第42-43页 |
| ·荧光定量检测 PRRSV 感染 Marc-145 细胞后病毒 CLDN4 m RNA 表达量的变化 | 第43-45页 |
| ·IFA 检测 PRRSV 感染 Marc-145 细胞后病毒 CLDN4 蛋白表达量的变化 | 第45-46页 |
| ·重组质粒p EGFP-N1-CLDN4的提取 | 第46-47页 |
| ·重组质粒转染Marc-145细胞 | 第47-48页 |
| ·转染重组质粒后的Marc-145细胞对PRRSV感染量影响的检测 | 第48页 |
| ·检测抗CLDN4的阳性血清对PRRSV的作用 | 第48页 |
| ·检测抗CLDN4蛋白的单克隆抗体对PRRSV的作用 | 第48-49页 |
| 3 实验结果 | 第49-59页 |
| ·CLDN4的PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·重组质粒p ET-30a-CLDN4和p EGFP-N1-CLDN4的成功构建 | 第50-51页 |
| ·酶切鉴定重组质粒 | 第50-51页 |
| ·测序结果的分析 | 第51页 |
| ·p ET-30a-CLDN4蛋白的表达鉴定与纯化结果 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE、Western Blot鉴定p ET-30a-CLDN4蛋白的表达 | 第51页 |
| ·p ET-30a-CLDN4重组蛋白的纯化结果 | 第51-52页 |
| ·p ET-30a-CLDN4重组蛋白的浓度测定 | 第52页 |
| ·CLDN4蛋白单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| ·小鼠血清抗体效价的测定 | 第52-53页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选结果 | 第53页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第53-54页 |
| ·IFA鉴定结果 | 第53页 |
| ·Western Blot鉴定结果 | 第53-54页 |
| ·病毒繁殖的结果 | 第54页 |
| ·病毒纯化的结果 | 第54页 |
| ·纯化后病毒TCID50的检测结果 | 第54页 |
| ·荧光定量检测PRRSV感染Marc-145细胞后CLDN4 m RNA表达水平的结果 | 第54-55页 |
| ·IFA检测PRRSV感染Marc-145细胞后CLDN4蛋白表达水平的结果 | 第55-56页 |
| ·重组的p EGFP-N1-CLDN4质粒转染Marc-145细胞后的鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组的p EGFP-N1-CLDN4质粒在转染Marc-145细胞后对PRRSV感染该细胞的影响 | 第57-58页 |
| ·抗CLDN4蛋白的血清对PRRSV感染Marc-145细胞的作用 | 第58-59页 |
| ·抗CLDN4蛋白的单克隆抗体对PRRSV感染Marc-145细胞的作用 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·荧光定量检测PRRSV感染Marc-145细胞后CLDN4 m RNA表达水平 | 第60页 |
| ·CLDN4的真核表达及PRRSV感染的作用 | 第60-61页 |
| ·抗CLDN4蛋白血清在PRSSV感染Marc-145细胞中的作用 | 第61页 |
| ·抗CLDN4蛋白的单克隆抗体在PRRSV感染Marc-145细胞中的作用 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介 | 第74-75页 |
| 硕士期间发表和待发表的论文 | 第75页 |
