| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第7-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-16页 |
| 第一章 鸭圆环病毒致病性研究进展 | 第11-16页 |
| 1 发现及病原学 | 第11页 |
| 2 检测方法 | 第11-13页 |
| 3 致病机制 | 第13-15页 |
| 4 小结 | 第15-16页 |
| 第二部分 试验研究 | 第16-65页 |
| 第二章 实时荧光定量PCR检测鸭圆环病毒方法的建立及半数感染量的确定 | 第16-30页 |
| 1 材料 | 第16-17页 |
| ·病料及毒株来源 | 第16页 |
| ·主要试剂及相关配制试剂 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| 2 方法 | 第17-22页 |
| ·qPCR标准质粒的构建 | 第17-20页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·qPCR标准质粒目的片段的扩增 | 第17-18页 |
| ·扩增产物的纯化及其与载体的连接 | 第18-19页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第19页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第19页 |
| ·阳性重组质粒的鉴定及浓度测定 | 第19-20页 |
| ·DuCV特异性qPCR方法的建立 | 第20-21页 |
| ·qPCR的引物设计 | 第20页 |
| ·qPCR反应退火温度的优化 | 第20页 |
| ·标准曲线的建立 | 第20-21页 |
| ·qPCR方法的敏感性试验 | 第21页 |
| ·qPCR方法的特异性试验 | 第21页 |
| ·qPCR方法的重复性试验 | 第21页 |
| ·DuCV半数感染量的测定 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-28页 |
| ·标准质粒pEASY-T1-rep的构建 | 第22-24页 |
| ·标准质粒中Rep全长片段的扩增 | 第22-23页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒pEASY-T1-rep酶切鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒pEASY-T1-rep测序分析 | 第23-24页 |
| ·DuCV特异性qPCR方法的建立 | 第24-27页 |
| ·qPCR反应退火温度的优化 | 第24页 |
| ·标准曲线的建立 | 第24-25页 |
| ·qPCR方法的敏感性试验 | 第25页 |
| ·qPCR方法的特异性试验 | 第25-26页 |
| ·qPCR方法的重复性试验 | 第26-27页 |
| ·DuCV半数感染量的测定 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| ·DuCV特异性qPCR检测方法的建立 | 第28-29页 |
| ·DuCV半数感染量的测定 | 第29页 |
| 5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 荧光定量分析鸭圆环病毒在人工感染雏鸭体内的侵染分布及组织病理学观察的研究 | 第30-52页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| ·毒株 | 第30页 |
| ·试验动物 | 第30页 |
| ·主要试剂及相关配制试剂 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| ·DuCV人工感染雏鸭及样本采集 | 第31页 |
| ·样品的处理 | 第31页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的临床症状 | 第31-32页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的剖检观察 | 第32页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的组织病理学观察 | 第32页 |
| ·载玻片和盖玻片的处理 | 第32页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的组织病理学观察 | 第32页 |
| ·qPCR方法检测DuCV在人工感染雏鸭后体内的分布 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-49页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的临床症状 | 第33-34页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的剖检观察 | 第34-35页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的组织病理学观察 | 第35-41页 |
| ·胸腺 | 第35页 |
| ·脾脏 | 第35页 |
| ·法氏囊 | 第35页 |
| ·肝脏 | 第35页 |
| ·肾脏 | 第35-41页 |
| ·qPCR法检测各组织器官DuCV的动态分布变化 | 第41-49页 |
| ·DuCV在接种鸭免疫器官中的动态分布 | 第41-43页 |
| ·DuCV在接种鸭消化器官中的动态分布 | 第43-44页 |
| ·DuCV在接种鸭消化道中的动态分布 | 第44-47页 |
| ·DuCV在接种鸭呼吸道中的动态分布 | 第47-48页 |
| ·DuCV在接种鸭其他组织器官中的动态分布 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·雏鸭人工感染DuCV疾病模型的病理学检测 | 第49-50页 |
| ·qPCR法检测人工感染DuCV在雏鸭各组织器官的分布 | 第50-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 人工感染鸭圆环病毒致雏鸭免疫器官细胞凋亡的动态研究 | 第52-65页 |
| 1 材料 | 第52-53页 |
| ·毒株 | 第52页 |
| ·试验动物 | 第52页 |
| ·主要试剂及配制 | 第52-53页 |
| ·主要仪器及设备 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-55页 |
| ·人工感染试验 | 第53页 |
| ·兔抗鸭圆环病毒Cap蛋白IgG的纯化 | 第53页 |
| ·免疫组化法检测组织中DuCV抗原的分布变化 | 第53-54页 |
| ·两步法免疫组化法条件优化 | 第53页 |
| ·特异性试验 | 第53-54页 |
| ·免疫组化试验 | 第54页 |
| ·TUNEL法检测组织切片细胞凋亡 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-62页 |
| ·免疫组化法条件优化 | 第55页 |
| ·特异性试验 | 第55-56页 |
| ·免疫组化法检测组织中DuCV抗原的分布变化 | 第56-59页 |
| ·人工感染雏鸭后不同组织的动态凋亡变化 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 5 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第80页 |
