中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
符号说明 | 第9-13页 |
1. 文献综述 | 第13-24页 |
·山羊地方性鼻内腺瘤 | 第14页 |
·MIRNA的生物合成与在肿瘤中的功能 | 第14-16页 |
·MIRNA与肿瘤 | 第16-20页 |
·乳腺肿瘤与miRNA | 第16-18页 |
·人类肺癌中代表性miRNA | 第18-19页 |
·人类鼻咽癌与miRNA | 第19-20页 |
·MIRNA的预测与鉴定 | 第20-24页 |
·miRNA微阵列芯片与实时PCR连用检测已知miRNA的表达差异 | 第20-21页 |
·直接克隆法和生物信息学相结合寻找新miRNA | 第21-22页 |
·构建重组载体与Western blot联用检测特定miRNA对某肿瘤相应基因表达蛋白的影响 | 第22-23页 |
·第二代高通量测序技术和生物信息学相结合寻找新miRNA | 第23-24页 |
·研究的目的意义 | 第24页 |
2. 材料与方法 | 第24-39页 |
·材料 | 第24-27页 |
·组织材料、菌株 | 第24页 |
·主要试剂和溶液配制 | 第24-25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·使用的数据库及分析软件 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-39页 |
·总RNA的抽提 | 第27-28页 |
·Illumina深度测序的试验流程 | 第28-29页 |
·Illumina深度测序的生物信息分析 | 第29-33页 |
·PCR引物 | 第33-34页 |
·候选miRNA的真实性检测 | 第34-38页 |
·候选miRNA表达谱的qPCR验证 | 第38-39页 |
3. 结果 | 第39-55页 |
·山羊ENA肿瘤组织小分子RNA的深度测序 | 第39-51页 |
·总RNA的提取结果 | 第39页 |
·小分子RNA的序列信息 | 第39-42页 |
·小分子RNA序列的分类注释 | 第42-43页 |
·山羊鼻组织中已知miRNA分析 | 第43-50页 |
·山羊鼻组织中新发现的miRNA分析 | 第50-51页 |
·部分候选MIRNA的PCR分析 | 第51-55页 |
·部分候选miRNA的普通PCR分析 | 第51-53页 |
·部分候选miRNA的荧光定量PCR分析 | 第53-55页 |
4. 讨论 | 第55-61页 |
·ILLUMINA HISEQ测序的优势与不足 | 第55-56页 |
·ILLUMINA HISEQ测序数据质量的可靠性 | 第56-57页 |
·MIRNA的靶基因预测 | 第57-58页 |
·部分重要MIRNA靶基因的作用方式 | 第58-61页 |
5. 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第70页 |