中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
综述一 布鲁氏菌病临床诊断方法的研究进展 | 第14-20页 |
1 病原学诊断 | 第14-17页 |
·布鲁氏菌的分离培养 | 第14-15页 |
·分子生物学诊断 | 第15-17页 |
·PCR及其衍生技术 | 第15-16页 |
·核酸探针技术 | 第16-17页 |
·环介导等温扩增技术 | 第17页 |
2 免疫学诊断技术 | 第17-20页 |
·血清凝集实验 | 第17页 |
·补体结合试验 | 第17-18页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第18页 |
·胶体金标记免疫层析技术 | 第18-20页 |
综述二 莱姆病免疫原性蛋白及诊断方法的研究进展 | 第20-26页 |
1 莱姆病免疫原性蛋白的研究进展 | 第20-23页 |
·莱姆病螺旋体外膜蛋白A | 第20-21页 |
·莱姆病螺旋体外膜蛋白C | 第21页 |
·莱姆病螺旋体膜脂蛋白A | 第21-22页 |
·鞭毛蛋白(FlaB/FlaA) | 第22-23页 |
·伯氏疏螺旋体膜蛋白(VlsE) | 第23页 |
2 莱姆病的实验室诊断 | 第23-26页 |
·病原学检测 | 第23-24页 |
·直接检测法 | 第23页 |
·病原的分离培养法 | 第23页 |
·分子生物学检测 | 第23-24页 |
·免疫学诊断技术 | 第24-26页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第24页 |
·间接免疫荧光试验 | 第24页 |
·蛋白质印迹法 | 第24页 |
·免疫渗滤试验 | 第24-26页 |
第二章 试验部分 | 第26-51页 |
试验一 布鲁菌病免疫胶体金试纸条快速诊断方法的建立 | 第26-41页 |
1 材料与方法 | 第26-31页 |
·材料 | 第26-27页 |
·细菌和血清 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·方法 | 第27-31页 |
·16M株的培养 | 第27页 |
·16M菌株LPS的提取纯化 | 第27页 |
·SDS-PAGE、银染鉴定 | 第27-28页 |
·优化胶体金制备条件及试纸条的组装 | 第28-31页 |
·试纸条检测时间及结果的判定 | 第31页 |
·胶体金试纸条对血清样品的检测 | 第31页 |
2 结果 | 第31-39页 |
·SDS-PAGE对LPS纯度鉴定 | 第31-32页 |
·胶体金颗粒的制备 | 第32页 |
·胶体金颗粒粒径的鉴定 | 第32-33页 |
·SPA与胶体金结合的最佳pH及最佳标记量 | 第33页 |
·所需耗材的最佳条件 | 第33-35页 |
·金标垫预处理的最佳条件 | 第33-34页 |
·上样垫预处理的最佳条件 | 第34页 |
·稳定剂的最佳条件 | 第34-35页 |
·抗原的最佳包被浓度 | 第35页 |
·试纸条检测时间及结果判定 | 第35-36页 |
·血清样品检测结果 | 第36-39页 |
·试纸条的特异性检测 | 第36页 |
·试纸条的敏感性检测 | 第36页 |
·试纸条的稳定性及重复性检测 | 第36-37页 |
·血清样品检测结果统计 | 第37-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
·LPS作为包被抗原的优势 | 第39-40页 |
·布病诊断中胶体金免疫层析技术的优势 | 第40-41页 |
试验二 莱姆病膜脂蛋白Bmp A的纯化及免疫渗滤卡快速诊断方法的初步建立 | 第41-51页 |
1 材料和方法 | 第41-44页 |
·材料 | 第41-42页 |
·主要药品试剂 | 第41-42页 |
·主要材料 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·方法 | 第42-44页 |
·重组蛋白BmpA的手工纯化 | 第42页 |
·胶体金(显色液)的制备 | 第42-43页 |
·免疫渗滤卡的组装 | 第43页 |
·抗原包被(点样/划线) | 第43页 |
·免疫渗滤卡的操作步骤 | 第43-44页 |
·实验用莱姆标准阳性血清 | 第44页 |
·特异性的检测 | 第44页 |
·稳定性、重复性的检测 | 第44页 |
2 结果 | 第44-50页 |
·渗滤卡的优化 | 第44-49页 |
·Bmp A蛋白的纯度及最佳浓度鉴定 | 第44-45页 |
·胶体金粒径的确定 | 第45-46页 |
·封闭液的确定 | 第46-47页 |
·洗涤液的确定 | 第47-48页 |
·包被抗原的最佳操作方法 | 第48页 |
·渗滤卡的结果判定 | 第48页 |
·特异性的检测 | 第48-49页 |
·稳定性、重复性检测 | 第49页 |
·血清样品检测 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-51页 |
·莱姆病诊断中优势抗原Bmp A蛋白 | 第50页 |
·免疫渗滤技术的建立 | 第50-51页 |
全文结论 | 第51页 |
创新点 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63-64页 |
附件 | 第64页 |