| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-16页 |
| ·木质素的概述 | 第9-11页 |
| ·木质素的生物合成途径上的关键酶类 | 第11-14页 |
| ·苯丙酸合成途径涉及的酶类 | 第11-13页 |
| ·木质素特异合成途径中的酶类 | 第13页 |
| ·木质素特异合成途径下游酶类的调控 | 第13-14页 |
| ·肉桂酸4-羟基化酶的国内外研究现状 | 第14-16页 |
| ·C4H基因的酶学性质 | 第14页 |
| ·肉桂酸-4-羟化酶在木质素生物合成中的作用 | 第14-16页 |
| 2 引言 | 第16-17页 |
| 3. 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·实验载体与菌株 | 第17页 |
| ·实验主要试剂 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·实验主要仪器 | 第17页 |
| ·实验所用溶液的配制 | 第17-19页 |
| ·CTAB溶液的配置 | 第17-18页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA的溶液配制 | 第18页 |
| ·培养基相关溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·抗生素的配置 | 第19页 |
| ·米C4H基因的克隆 | 第19-21页 |
| ·PCR反应及琼脂糖电泳 | 第19-20页 |
| ·PCR扩增目的片段及产物回收 | 第20-21页 |
| ·P1301+C4H干涉表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·C4H RNAi载体的构建方案 | 第21页 |
| ·目的片段与pUCCRNAi载体酶切连接 | 第21-23页 |
| ·p1301+C4H干涉表达载体转化农杆菌 | 第23-24页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·冻融法质粒导入农杆菌 | 第23-24页 |
| ·干涉表达载体转化农杆菌 | 第24页 |
| ·玉米的茎尖转化 | 第24-25页 |
| ·工程菌的制备 | 第24页 |
| ·玉米种子的消毒与萌发 | 第24页 |
| ·诱导与侵染 | 第24-25页 |
| ·侵染苗的移栽与筛选 | 第25页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第25-26页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第25页 |
| ·转基因植株的半定量RT-PCR分析 | 第25-26页 |
| ·木质素、纤维素含量的测定及实验方法 | 第26-29页 |
| ·制取草粉 | 第26-27页 |
| ·水分含量的测定 | 第27页 |
| ·木质素含量的测定 | 第27-28页 |
| ·纤维素含量的测定 | 第28-29页 |
| ·番红染色 | 第29页 |
| ·玉米秸秆纤维长度测量 | 第29-30页 |
| ·结晶度测量 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-39页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第31页 |
| ·载体构建验证 | 第31-33页 |
| ·pUCCRNAi+2F载体构建验证 | 第31-33页 |
| ·干涉载体导入农杆菌的验证及转基因植株的获得 | 第33-34页 |
| ·干涉载体的PCR验证 | 第33页 |
| ·转基因植株的获得 | 第33-34页 |
| ·转C4H基因植株的检测 | 第34-39页 |
| ·转C4H基因植株的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的半定量RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的Klason木质素与纤维素的测定 | 第36-37页 |
| ·转基因植株的组织化学染色观察 | 第37-38页 |
| ·转基因植株秸秆纤维长度及结晶度测量 | 第38-39页 |
| 5 讨论 | 第39-41页 |
| ·C4H基因的下调对玉米木质素、纤维素含量及纤维长度和结晶度的影响 | 第39-40页 |
| ·抑制C4H表达对植株的正常生长的影响 | 第40-41页 |
| 6 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 个人简介 | 第50-51页 |
| 研究成果 | 第51页 |