| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 主要符号对照表 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·实验试剂 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·质粒、菌株和抗体 | 第23-24页 |
| ·主要培养基及溶液配制 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·VP60基因PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·融合PCR扩增AB基因片段 | 第26-27页 |
| ·重组质粒构建 | 第27-29页 |
| ·VP60重组蛋白及AB融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第29-31页 |
| ·抗VP60多抗血清的制备 | 第31页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第31-32页 |
| ·特异性阻断实验 | 第32页 |
| ·重复性实验 | 第32页 |
| ·敏感性实验 | 第32页 |
| ·AB融合蛋白与VP60蛋白作为不同包被抗原检测临床样品实验 | 第32页 |
| ·果蝇S2细胞培养 | 第32页 |
| ·筛选稳定转染BIP/VP60重组质粒的S2细胞 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR检测S2-VP60稳转细胞系中VP60的mRNA | 第33-34页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)检测VP60蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-44页 |
| ·基因片段扩增 | 第35-36页 |
| ·重组表达质粒鉴定 | 第36-37页 |
| ·VP60重组蛋白的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·VP60重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| ·AB融合蛋SDS-PAGE检测和Western blot分析 | 第38-39页 |
| ·确立间接ELISA最优反应条件 | 第39-40页 |
| ·阻断实验 | 第40页 |
| ·重复性实验 | 第40-41页 |
| ·敏感性实验 | 第41页 |
| ·AB融合蛋白与VP60完整蛋白分别做为包被抗原检测临床样品 | 第41-42页 |
| ·筛选稳定转染BIP/VP60重组质粒的S2细胞 | 第42页 |
| ·RT-PCR检测S2-VP60稳转细胞系中VP60的mRNA | 第42-43页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)检测VP60蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 作者简介 | 第57-58页 |
| 在读期间发表的论文 | 第58页 |
