摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-41页 |
第一章 水稻-稻瘟病菌互作机制的研究进展 | 第17-33页 |
1 水稻稻瘟病 | 第17-20页 |
·水稻稻瘟病的危害 | 第17-18页 |
·水稻稻瘟病的病症 | 第18-20页 |
·叶瘟 | 第18-19页 |
·叶枕瘟 | 第19页 |
·节瘟 | 第19页 |
·穗颈瘟和穗瘟 | 第19-20页 |
2 稻瘟病菌的致病机理 | 第20-26页 |
·稻瘟病病菌的分类地位 | 第20页 |
·Magnoporth oryzae的特征 | 第20-21页 |
·稻瘟病菌的生活史和病害循环 | 第21页 |
·稻瘟病菌的侵染机制 | 第21-22页 |
·分生孢子的附着和萌发 | 第22-26页 |
·调控附着胞生成的信号转导模式 | 第23-24页 |
·附着胞的发育和功能 | 第24页 |
·稻瘟病菌侵入后生长 | 第24-26页 |
·稻瘟病菌在寄主中的定殖 | 第26页 |
3 水稻的先天免疫系统 | 第26-33页 |
·病原相关分子模式触发的免疫反应 | 第27-30页 |
·几丁质触发的水稻PTI | 第27-28页 |
·几丁质受体的下游调控元件 | 第28-30页 |
·效应因子触发的免疫反应中的效应因子和R蛋白 | 第30-32页 |
·基于效应因子和R蛋白的水稻-稻瘟病菌免疫反应 | 第30页 |
·NBS-LRR识别效应子的方式 | 第30-31页 |
·水稻R蛋白的信号途径 | 第31-32页 |
·PTI与ETI间的重叠 | 第32-33页 |
第二章 SNARE蛋白在植物中的功能研究 | 第33-41页 |
1 SNARE蛋白 | 第33-36页 |
·SNARE的结构与分类 | 第33-36页 |
·SNARE介导膜融合的过程 | 第36页 |
2 植物SNARE家族 | 第36-38页 |
·植物Q-SNARE | 第36-37页 |
·植物R-SNARE | 第37-38页 |
3 植物SNARE的生物学功能 | 第38-40页 |
·与胞质分裂有关 | 第38页 |
·与向重力性有关 | 第38页 |
·与脂质筏有关 | 第38-39页 |
·与植物的抗病性有关 | 第39页 |
·参与非生物胁迫和ABA信号途径 | 第39-40页 |
4 展望 | 第40页 |
5 本研究的目的与意义 | 第40-41页 |
第二部分 研究报告 | 第41-95页 |
第三章 水稻SYPls基因的鉴定和功能分析 | 第41-57页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
·植物材料及处理 | 第42页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第42页 |
·Quantitative Real-time PCR分析 | 第42-43页 |
·序列检索和生物信息学分析 | 第43页 |
·细胞定位分析 | 第43-45页 |
·载体构建 | 第43-44页 |
·水稻原生质体转化 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-54页 |
·水稻SYP1家族基因的鉴定 | 第45-49页 |
·保守结构域分析 | 第47-48页 |
·系统发育和内含子/外显子结构分析 | 第48-49页 |
·OsSYP1s在水稻中的组织表达模式各不相同 | 第49-50页 |
·OsSYP1s在稻瘟病菌接种前后的诱导表达 | 第50-51页 |
·OsSYP1s的亚细胞定位 | 第51-54页 |
3 讨论 | 第54-57页 |
第四章 水稻OsSYP121在抗稻瘟病中的作用 | 第57-79页 |
1 材料和方法 | 第57-65页 |
·植物材料 | 第57-58页 |
·植物材料的处理 | 第58-59页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第59页 |
·Quantitative Real-time PCR分析 | 第59页 |
·PCR扩增OsSYP121的编码区和启动子序列 | 第59-60页 |
·目的片段的PCR扩增 | 第59页 |
·PCR反应产物的回收、测序与序列比对分析 | 第59-60页 |
·水稻转基因植株的获得及鉴定 | 第60-63页 |
·SYP121过量表达转基因植株的获得及鉴定 | 第60-63页 |
·OsSYP121干涉表达转基因植株的获得及鉴定 | 第63页 |
·T_2代转基因植株农艺性状考察 | 第63页 |
·T_3代转基因植株对稻瘟病病菌的抗性鉴定 | 第63-64页 |
·Uvitex染色 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-75页 |
·OsSYP121基因组序列分析 | 第65-68页 |
·植物中的SYP121蛋白高度保守 | 第65-66页 |
·不同水稻品种中OsSYP121启动子序列存在差异 | 第66-68页 |
·OsSYP121转基因材料的获得及验证 | 第68-71页 |
·OsSYP121过量表达转基因水稻植株的检测 | 第68-69页 |
·OsSYP121干涉抑制表达植株的获得和检测 | 第69-71页 |
·OsSYP121转基因水稻植株农艺性状考察 | 第71-72页 |
·OsSYP121在水稻稻瘟病抗性上的作用 | 第72-75页 |
3 讨论 | 第75-79页 |
第五章 水稻OsSYP121互作蛋白的鉴定 | 第79-95页 |
1 材料与方法 | 第80-86页 |
·DUALmembrane系统筛选OsSYP121互作蛋白 | 第80-85页 |
·植物材料 | 第80页 |
·植物材料的处理 | 第80页 |
·cDNA文库的构建 | 第80页 |
·pBT3-N-OsSYP121诱饵载体的构建 | 第80页 |
·酵母感受态细胞的制备和转化 | 第80-81页 |
·转录自激活活性检测 | 第81页 |
·阳性克隆的初步筛选 | 第81-84页 |
·回转验证 | 第84页 |
·阳性克隆的序列分析 | 第84-85页 |
·酵母双杂交体系鉴定SNARE蛋白核心复合体成员 | 第85-86页 |
·载体构建 | 第85页 |
·pGBKT7-OsSYP121质粒转化酵母菌株AH109 | 第85-86页 |
·OsSYP121诱饵蛋白的自激活检测 | 第86页 |
·捕获质粒转入携带pGBKT7-OsSYP121质粒的AH109酵母菌株 | 第86页 |
·DUALmembrane酵母双杂交系统鉴定SNARE蛋白核心复合体成员 | 第86页 |
·载体构建 | 第86页 |
·捕获载体转入携带pBT3-N-OsSYP121质粒的酵母菌株NMY51 | 第86页 |
2 结果与分析 | 第86-93页 |
·利用DUALmembrane系统筛选水稻SNARE蛋白SYP121互作子 | 第86-91页 |
·诱饵蛋白OsSYP121的转录自激活检测 | 第87-88页 |
·阳性克隆的初步筛选 | 第88-89页 |
·回转验证 | 第89-91页 |
·鉴定OsSYP121与OsSNAP32以及OsVAMP724/714互作 | 第91-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
全文结论 | 第95-97页 |
全文创新点 | 第97-99页 |
附录 | 第99-109页 |
参考文献 | 第109-125页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第125-127页 |
致谢 | 第127页 |