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大豆△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因GmP5CS1和GmP5CS2的克隆与初步功能验证

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略语第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 逆境胁迫对植物的影响第11-15页
   ·逆境胁迫对植物的危害第11页
   ·植物应对逆境胁迫的方式第11-14页
   ·逆境胁迫下植物脯氨酸积累的生物学意义第14-15页
 2 脯氨酸对植物体的影响第15-19页
   ·植物体中的脯氨酸代谢第15-16页
   ·脯氨酸在植物体内的分布第16页
   ·植物体中脯氨酸的合成第16-17页
   ·植物体中脯氨酸的降解第17页
   ·脯氨酸的生理功能第17-19页
 3 脯氨酸合成酶相关基因研究进展第19-21页
 4 本研究的目的及意义第21-23页
第二章 大豆GmP5CS1和GmP5CS2基因的克隆及表达分析第23-43页
 1 实验材料第23页
   ·植物材料第23页
   ·菌株及载体第23页
   ·主要试剂第23页
 2 实验方法第23-29页
   ·大豆基因组DNA提取第23-24页
   ·大豆总RNA的提取第24-25页
   ·大豆两个GmPSCS基因的引物设计第25-26页
   ·PCR扩增第26页
   ·割胶回收及目的基因纯化第26-27页
   ·PCR产物的连接第27页
   ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的转化第27页
   ·阳性克隆筛选第27页
   ·提取质粒第27-28页
   ·序列分析及相关生物信息学分析第28页
   ·组织表达分析第28页
   ·非生物胁迫分析第28页
   ·实时荧光定量PCR分析第28-29页
 3 结果与分析第29-40页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因的克隆第29-30页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因的氨基酸序列分析第30-35页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因组织表达特性第35页
   ·非生物胁迫处理对幼苗叶片和根的影响分析第35-40页
 4 讨论第40-43页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因的序列和功能分析第40页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因的组织表达分析第40-41页
   ·GmP5CS1和GmP5CS2基因的非生物胁迫分析第41-43页
第三章 大豆GmP5CS1和GmP5CS2基因转化拟南芥及初步功能分析第43-63页
 1 实验材料第43-44页
   ·植物材料第43页
   ·菌株和载体第43页
   ·主要试剂第43页
   ·常用培养基第43-44页
 2 实验方法第44-52页
   ·植物表达载体的构建第44-47页
   ·农杆菌介导法转化拟南芥第47-48页
   ·转基因拟南芥植株的鉴定第48-50页
   ·转GmP5CS1和GmP5CS2基因拟南芥的初步功能分析第50-52页
 3 结果与分析第52-61页
   ·植物表达载体的构建第52页
   ·转基因拟南芥的阳性检测第52-53页
   ·转GmP5CS1基因拟南芥耐逆性分析第53-57页
   ·转GmP5CS2基因拟南芥耐逆性分析第57-61页
 4 讨论第61-63页
   ·盐胁迫对拟南芥萌发率和根系生长的影响分析第61页
   ·盐胁迫对拟南芥中两个GmP5CS基因表达量的影响分析第61页
   ·盐胁迫对拟南芥体内脯氨酸含量影响变化的分析第61-63页
第四章 全文结论第63-65页
创新之处第65-67页
参考文献第67-79页
致谢第79页

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