摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-20页 |
第一章 瓜类细菌性角斑病菌的研究进展 | 第10-14页 |
1 发生与分布 | 第10页 |
2 黄瓜细菌性角斑病致病规律及危害 | 第10-11页 |
3 黄瓜细菌性角斑病的防治 | 第11-12页 |
4 甜瓜细菌性叶斑病的研究进展 | 第12-14页 |
第二章 病原菌检测技术研究进展 | 第14-20页 |
1 几种常见的和新的免疫检测技术 | 第14-15页 |
·凝集试验 | 第14页 |
·酶标抗体技术-酶联免疫吸附法(ELISA) | 第14页 |
·胶体金标记免疫层析检测法 | 第14-15页 |
·流动注射免疫检测 | 第15页 |
2 常用的分子生物学检测方法 | 第15-20页 |
·基因芯片技术 | 第15页 |
·反转录PCR | 第15-16页 |
·巢式PCR | 第16页 |
·多重PCR | 第16页 |
·免疫吸附PCR | 第16页 |
·荧光定量PCR | 第16-17页 |
·Padlock探针 | 第17-18页 |
·LAMP | 第18-20页 |
第二部分 研究内容 | 第20-52页 |
第一章 应用Padlock探针检测瓜类细菌性角斑病菌 | 第22-38页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
·供试菌株 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·菌株的活化,培养和保存 | 第23-24页 |
·基因组DNA的提取 | 第24-26页 |
·探针设计、连接、酶切与扩增 | 第26页 |
·PLP与斑点杂交结合的高通量检测技术 | 第26-27页 |
·人工模拟种子带菌检测 | 第27页 |
·市售种子检测 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-37页 |
·探针设计结果 | 第27页 |
·探针的特异性及灵敏度验证 | 第27-31页 |
·高通量检测 | 第31-33页 |
·利用甜瓜株系Padlock探针对市售甜瓜种子的检测结果 | 第33-34页 |
·利用黄瓜株系Padlock探针对市售黄瓜种子的检测结果 | 第34-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
第二章 运用LAMP检测瓜类细菌性角斑病菌 | 第38-52页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
·供试菌株 | 第39页 |
·培养基 | 第39页 |
·菌株的活化,培养和保存 | 第39页 |
·基因组DNA的提取 | 第39页 |
·试剂与仪器 | 第39页 |
·LAMP引物设计 | 第39-40页 |
·LAMP扩增体系的建立 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-49页 |
·甜瓜株系LAMP的特异性验证 | 第41-42页 |
·甜瓜株系LAMP的灵敏度验证 | 第42-43页 |
·甜瓜株系LAMP人工模拟种子带菌检测 | 第43-44页 |
·黄瓜株系LAMP特异性验证 | 第44-46页 |
·黄瓜株系LAMP灵敏度验证 | 第46-47页 |
·黄瓜株系LAMP人工模拟种子带菌检测验 | 第47-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 | 第60-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |