| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·真菌多糖 | 第9-14页 |
| ·多糖概述 | 第9页 |
| ·真菌多糖 | 第9-12页 |
| ·灰树花多糖 | 第12-13页 |
| ·多糖的测定方法 | 第13页 |
| ·多糖纯度鉴定及结构分析 | 第13-14页 |
| ·多糖分子量测定 | 第14页 |
| ·肿瘤 | 第14-15页 |
| ·肿瘤概述 | 第14页 |
| ·灰树花多糖抗肿瘤作用的优越性 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第15页 |
| ·细胞凋亡形态学特征 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤 | 第16页 |
| ·细胞凋亡信号转导通路 | 第16-19页 |
| ·细胞凋亡信号转导通路概述 | 第16-17页 |
| ·Notch与细胞凋亡 | 第17-18页 |
| ·Akt与细胞凋亡 | 第18-19页 |
| ·MAPK与细胞凋亡 | 第19页 |
| ·NF-κB与细胞凋亡 | 第19页 |
| ·本论文的研究目的及意义 | 第19-20页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·灰树花子实体与细胞株 | 第21页 |
| ·主要药品 | 第21-23页 |
| ·仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·主要溶液 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·灰树花子实体多糖的提取 | 第25页 |
| ·灰树花子实体多糖的分离纯化 | 第25-26页 |
| ·灰树花子实体多糖的纯度鉴定 | 第26-27页 |
| ·GFD化性质分析 | 第27-29页 |
| ·细胞体外培养 | 第29-30页 |
| ·细胞体外增殖抑制实验(MTT) | 第30页 |
| ·GFD抗肿瘤形态学观察 | 第30-31页 |
| ·流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期阻滞 | 第31-32页 |
| ·免疫荧光染色观察NF-κB/p65的入核 | 第32页 |
| ·蛋白抽提实验 | 第32-33页 |
| ·BCA试剂盒测定细胞蛋白浓度 | 第33-34页 |
| ·免疫印迹实验 | 第34-37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-54页 |
| ·灰树花子实体多糖的提取及分离纯化 | 第37-38页 |
| ·Sephadex G-200凝胶过滤色谱分离灰树花抗肿瘤多糖粗品 | 第37页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤色谱纯化灰树花抗肿瘤多糖 | 第37-38页 |
| ·GFD纯度鉴定及分子量测定 | 第38-39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳鉴定GFD | 第38页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)鉴定GFD并测定其分子量 | 第38-39页 |
| ·GFD理化性质分析 | 第39-42页 |
| ·GFD中性糖含量的测定 | 第39-40页 |
| ·GFD显色实验 | 第40页 |
| ·GFD紫外扫描定性分析 | 第40页 |
| ·GFD红外光谱定性分析 | 第40-41页 |
| ·原子力显微镜观察GFD | 第41页 |
| ·扫描电镜观察GFD | 第41-42页 |
| ·细胞体外增殖抑制实验(MTT) | 第42-43页 |
| ·细胞形态学观察 | 第43-45页 |
| ·HE染色检测细胞凋亡 | 第43页 |
| ·Hoechst33342检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
| ·AO/EB双染检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| ·扫描电镜检测细胞凋亡 | 第45页 |
| ·流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期阻滞 | 第45-46页 |
| ·GFD对HepG2细胞中NF-κB/p65入核的影响 | 第46-48页 |
| ·Notch1在GFD诱导的HepG2细胞凋亡中的作用 | 第48-49页 |
| ·GFD对HepG2细胞Notchl蛋白表达的影响 | 第48页 |
| ·Notch1对GFD作用的HepG2细胞凋亡率的影响 | 第48-49页 |
| ·MAPK和Akt通路在GFD诱导的HepG2细胞凋亡过程中的作用 | 第49-51页 |
| ·GFD对HepG2细胞MAPK和Akt通路相关蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| ·JNK和Akt对GFD作用的HepG2细胞凋亡率的影响 | 第50-51页 |
| ·Notch1通路在GFD抑制HepG2细胞Akt表达中的作用 | 第51页 |
| ·JNK在GFD阻止HepG2细胞NF-κB p65入核中的作用 | 第51-52页 |
| ·NF-κB调控的相关基因的表达 | 第52页 |
| ·Caspase家族成员在GFD诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用 | 第52-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-62页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第62-63页 |
| 8 致谢 | 第63页 |
